資源描述:
《光合細(xì)菌生產(chǎn)配方地優(yōu)化地地研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、實用標(biāo)準(zhǔn)文案光合細(xì)菌生產(chǎn)配方的優(yōu)化研究[摘要]本試驗選取了4種常用的光合細(xì)菌培養(yǎng)基,通過篩選,得出計數(shù)培養(yǎng)基為最佳。再對計數(shù)培養(yǎng)基進行優(yōu)化,得到最佳生產(chǎn)配方為:碳酸鈉2.0g,乙酸鈉3.0g,酵母膏2.0g,磷酸二氫鉀0.5g,Fe-EDTA0.005g,氯化銨1.0g,食鹽1.0g,六水氯化鎂0.2g,pH7.6,蒸餾水1000mL;該配方生產(chǎn)的活菌數(shù)可達12.5億個/mL。同時,光合細(xì)菌生長階段活菌數(shù)與OD值的擬合直線方程為y=4.2255x-0.6155(R2=0.9532),為生產(chǎn)上對光合細(xì)菌活菌數(shù)的檢測提供了一種簡單
2、快捷的方法。[關(guān)鍵詞]光合細(xì)菌;培養(yǎng)基;優(yōu)化[Abstract]Thisstudyoptimizedthecountingmediumfrom4photosyntheticbacteria.Thebestformulaofcountingmediumfortheproductionwere:sodiumcarbonate2.0g,sodiumacetate3.0g,yeastextract2.0g,potassiumdihydrogenphosphate0.5g,Fe-EDTA0.005g,ammoniumchloride1.
3、0g,salt1.0g,sixwatermagnesiumchloride0.2g,pH7.6,dis-tilledwater1000mLandwhentheformulawasusedintheproduction,viablebacteriacountsreached1.25billionpermilliliter.Atthesametime,analysistherelationshipbetweenphotosyntheticbacteriagrowthphasewithviablebacteriacountsandO
4、Dvalue,fittingalinearequationy=4.2255x-0.6155(R2=0.9532),toofferasimplemethodforthedetectingofthenumberofviableintheproductionofphotosyntheticbacteria.[Keywords]photosyntheticbacteria;culturemedium;optimization光合細(xì)菌(PSB)在自然環(huán)境下具有固氮、脫氮、固碳、硫化物氧化等多種功能(吳海燕等,2005),具有廣闊的應(yīng)用前
5、景。研究表明,光合細(xì)菌在溫度28~32℃,pH7.6,光照1500~3000lx條件下生長較好(唐亮和李玉林,2003;孫軍德等,2003)。本試驗擬對光合細(xì)菌培養(yǎng)基組分進行研究,旨在篩選一種能提高光合細(xì)菌活菌數(shù)的生產(chǎn)配方。1材料與方法1.1材料1.1.1菌種4株光合細(xì)菌62#、22#、41#精彩文檔實用標(biāo)準(zhǔn)文案、1051#,由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)微生態(tài)實驗室提供。1.1.2培養(yǎng)基改良71#培養(yǎng)基(操玉濤等,2006);光合細(xì)菌計數(shù)培養(yǎng)基(劉軍義等,2004);光合細(xì)菌推薦培養(yǎng)基(張偉,2003);紫色非硫細(xì)菌培養(yǎng)基(萬海龍,2003
6、)。1.1.3儀器超凈工作臺(蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司,型號:SW-CJ-2FD,潔凈度100級IS05);酸度計(成都方舟科技開發(fā)公司,型號:pHS-5);恒溫培養(yǎng)箱(Thermocorporation,型號:3111);分光光度計(上海市尤尼柯儀器有限公司,型號:UV-2100);全自動高壓消毒器(AatellScientifc,型號:AMA440N);干燥箱(中華人民共和國上海市實驗儀器廠,型號:101-3);200L的玻璃缸。1.2方法1.2.1培養(yǎng)基的篩選配改良71#培養(yǎng)基(A)、光合細(xì)菌計數(shù)培養(yǎng)基(B)、光合細(xì)菌推
7、薦培養(yǎng)基(C)、紫色非硫細(xì)菌培養(yǎng)基(D)各600mL,用5%NaOH調(diào)節(jié)pH為7.6;高壓滅菌后,按5%比例接種,在30℃恒溫培養(yǎng)箱,1500lx光照強度下,厭氧培養(yǎng)10d。培養(yǎng)期間,每天取5mL培養(yǎng)液,測定660nm下的OD值,觀察光合細(xì)菌生長情況并記錄。1.2.2培養(yǎng)基的優(yōu)化將上述所篩選出的培養(yǎng)基進行優(yōu)化,研究乙酸鈉、酵母膏和氯化鈉(用食鹽代替)含量對這4株光合細(xì)菌生長的影響。在所篩選的培養(yǎng)基中,配制300mL培養(yǎng)液,在其他成分不變的情況下,分別調(diào)整酵母膏,食鹽和乙酸鈉的濃度,即分別加入不同濃度的酵母膏(3、2、1.0、0
8、.5g/L),食鹽(5、4.0、3.0、2.0、1.0g/L)和乙酸鈉(4、3、2.0、1.0g/L),高壓滅菌,接種菌液,在30℃,1500lx條件下培養(yǎng)1周,測定660nm培養(yǎng)液OD值。1.2.3生產(chǎn)培養(yǎng)將篩選優(yōu)化得到的培養(yǎng)基作為生產(chǎn)配方,按5%接種量將混合菌液接于200