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《快速測定半胱氨酸含量方法地地的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、實用標準文案畢業(yè)論文2014屆快速測定半胱氨酸含量方法的研究學生姓名卓蕓蕓學號10114339系別化學化工學院專業(yè)班級藥學102指導(dǎo)教師邊可君完成日期2014年5月16日精彩文檔實用標準文案快速測定半胱氨酸的含量方法研究摘要鈣黃綠素是一種具有熒光性的物質(zhì)，在pH8.0的KH2PO4-NaOH緩沖液中，Cu(Ⅱ)與鈣黃綠素配位引起熒光猝滅。由于半胱氨酸與Cu(Ⅱ)的親和力較強，可從鈣黃綠素-Cu(Ⅱ)的絡(luò)合物中奪取Cu(Ⅱ)而使鈣黃綠素游離出來，從而使體系的熒光得以恢復(fù)，并且熒光恢復(fù)的程度與加入半胱氨酸的量在一定范圍內(nèi)呈線性，從而可以測定半胱氨酸的含量。本
2、實驗在鈣黃綠素與銅離子1:1，體系時間30min后，激發(fā)光譜493nm，發(fā)射光譜510nm下進行測定，該法的回歸線性方程為：y=22.475x-64.1r為：0.34%回收率為：101.9%。關(guān)鍵詞半胱氨酸；鈣黃綠素-銅配合物；熒光光度分析方法精彩文檔實用標準文案StudyonthemethodofrapiddeterminationofcysteinecontentABSTRACTCalceinisafluorescentsubstance,KH2PO4-NaOHinpH8.0buffer,Cu(Ⅱ)andcalceinligandfluorescen
3、cequenching.DuetocysteineandCu(Ⅱ)affinityisverystrong,canfromthecalcein-Cu(Ⅱ)winCucomplex(Ⅱ)andmakethecalceinfreed,Sothatthesystemoffluorescencewasrestored,andthedegreeoffluorescencerestorationandthequantityofaddingcysteineinacertainrangeislinear.Sothatitcandeterminethecontentofc
4、ysteine.Thisexperimentinthecalceinwithcopperions1:1,Systemtimeafter30min,Excitationspectrum493nm,Emissionspectrumdeterminationunder510nm,Themethodforthereturnofthelinearequation:y=22.45x-63.6,r:0.34%,Therecoveryrateof:101.9%.KEYWORDScysteine;Calcein-coppercomplexes;Fluorescentpho
5、tometricanalysismethod精彩文檔實用標準文案目錄摘要IABSTRACTII目錄III1緒論11.1常見的測定方法11.1.1HPLC法測定半胱氨酸的含量11.1.2分光光度法測定半胱氨酸的含量12實驗部分52.1儀器、藥品、試劑52.2實驗步驟52.2.1儲備溶液配制52.2.2體系的激發(fā)和發(fā)射光譜52.2.3.鈣黃綠素及銅離子濃度比對熒光強度的影響62.2.4緩沖溶液pH對熒光強度的影響62.2.5反應(yīng)時間對熒光強度的影響62.2.6標準曲線的繪制及線性關(guān)系考察62.2.7精密度實驗72.2.7回收率實驗72.2.8樣品半胱氨酸含量
6、的測定73實驗結(jié)果與討論73.1磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖溶液的配制73.2.2緩沖溶液pH對熒光強度的影響93.2.3反應(yīng)時間對熒光強度的影響103.2.4半胱氨酸標準曲線113.2.5鈣黃綠素及銅離子濃度比的選擇123.2.7回收率的測定133.2.8樣品溶液的測定144結(jié)論14致謝17精彩文檔實用標準文案精彩文檔實用標準文案1緒論半胱氨酸為含硫氨基酸，結(jié)構(gòu)式HSCH2CH(NH2)COOH，半胱氨酸含有巰基(-SH)，胱氨酸含有二硫鍵(-S-S-)，二者可以相互轉(zhuǎn)變，蛋白質(zhì)中兩個半胱氨酸殘基之間形成的二硫鍵對維持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)具有重要作用[1]，基于其
7、獨特的結(jié)構(gòu)，在動物體內(nèi)起著營養(yǎng)和免疫相關(guān)的重要生理功能。此外，半胱氨酸有刺激前T淋巴細胞分化為成熟的淋巴細胞的作用及增加人體對某些毒素的抵抗力。目前國內(nèi)外檢測半胱氨酸的方法有很多，已報道的測定半胱氨酸的方法有電化學法[2]、流動注射化學發(fā)光法[3]、催化動力學分光光度法[4]、旋光度法[5]、高效液相色譜法[6]及熒光分光光度法[7]等。1.1常見的測定方法1.1.1HPLC法測定半胱氨酸的含量高效液相色譜也叫高壓液相色譜，是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高效性，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動
8、相，故具有分析速度快的優(yōu)點。王洋等[8]采用高效液相色譜法來測定蛋白質(zhì)粉中L-半
