膀胱癌耐藥蛋白及相關(guān)凋亡基因的表達(dá)及意義

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1、中文摘要膀胱癌耐藥基因產(chǎn)物及相關(guān)凋亡因子的表達(dá)及意義東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬中大醫(yī)院泌尿外科研究生:陳兵海導(dǎo)師:楊建軍副教授副主任醫(yī)師目的:探討P一糖蛋白(P—gP)、多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)、Bcl一2、Bax在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及其意義。方法:取東南大學(xué)附屬中大醫(yī)院、江蘇省腫瘤醫(yī)院兩院于2004.12—2006.7年電切或開(kāi)放手術(shù)膀胱腫瘤標(biāo)本共59例,年齡36~83歲,男49例,女10例。均經(jīng)病理學(xué)證實(shí)為膀胱移行細(xì)胞癌,另有正常膀胱組織13例(經(jīng)膀胱前列腺摘除術(shù)中獲得)。腫瘤標(biāo)本均行HE染色診斷,按WHO病理分級(jí)標(biāo)準(zhǔn),按UICC臨床分期,Tt34例,Tz15例,Tn1

2、0例。膀胱腫瘤術(shù)后常規(guī)行羥基喜樹(shù)堿膀胱內(nèi)灌注化療。本組59例標(biāo)本中,未經(jīng)化療的初發(fā)腫瘤30例,其中G。18例,G29例,G,3例,T,20例,Tz7例,T3-,3例?;熀髲?fù)發(fā)腫瘤29例,其中G。14例,G28例,G37例,T。14例,T:8例,Ta、7例;其中復(fù)發(fā)一次15例,復(fù)發(fā)兩次7例,復(fù)發(fā)三次4例,復(fù)發(fā)超過(guò)三次3例。單發(fā)性腫瘤42例,多發(fā)性腫瘤17例。膀胱腫瘤標(biāo)本及正常膀胱粘膜標(biāo)本用sP免疫組化技術(shù)檢測(cè)P—gP、MRP蛋白的表達(dá),使用RT-PCR的方法檢測(cè)Bcl-2、Bax基因的表達(dá)。結(jié)果:(1)初發(fā)膀胱移行細(xì)胞癌組織中P-gp、MRP陽(yáng)性表達(dá)分別為50%(15/3

3、0),47%(14/30):化療后復(fù)發(fā)膀胱腫瘤組織中P-gp、MRP、陽(yáng)性表達(dá)分別為86%(25/29),68%(20/29);正常對(duì)照p-gP、MRP陽(yáng)性表達(dá)分別為7.7%(1/13),7.7%(1/13)。正常膀胱組織、初發(fā)膀胱腫瘤組織、化療后復(fù)發(fā)膀胱腫瘤組織內(nèi)P—gp表達(dá)兩兩比較都有顯著性差異。(P<0.05)。初發(fā)膀胱腫瘤組織、化療后復(fù)發(fā)膀胱腫瘤組織內(nèi)MRP表達(dá)顯著高于正常膀胱組織。(P<0.05)。(2)P-gp表達(dá)水平與病理分級(jí)、臨床分期密切相關(guān),G。、G和G。陽(yáng)性率分別為50%(16/32),88%(15/17),90%(9/10),T。、T:和T。、陽(yáng)性率

4、分別為53%(18/34),87%(13/15),90%(9/i0)。(3)初發(fā)膀胱移行細(xì)胞癌組織中Bcl一2、Bax與GAPDH灰度比值分別為0.796±0.44、1.8l±0.51;化療后復(fù)發(fā)膀胱腫瘤組織中Bcl一2、Bax與GAPDH灰度比值分別為1.18±0.69、1.49±0.67;正常膀胱組織Bcl一2、Bax與GAPDH灰度比值分別為0.277±0.023,0.491±O.031。正常膀胱組織、初發(fā)膀胱腫瘤組織、化療后復(fù)發(fā)膀胱腫瘤組織內(nèi)Bcl一2、Bax表達(dá)兩兩比較都有顯著性差異。(P

5、GAPDH相比,其灰度比值(%)在Gt、Gz和Gs中分別為48±10、117±14和211±28;其灰度比值(%)在T,、T。和T。中分別為56±14、118±12和208±33。Bax表達(dá)水平也與組織分級(jí)、臨床分期密切相關(guān),與GAPDH相比,其灰度比值(%)在G-、G。和G3中分別為213±17、153±21和56±16;其灰度比值(%)在T。、T。和T3中分別為208±14、157±15和48±8。(5)P-gp蛋白表達(dá)與Bcl-2呈正相關(guān)(r=O.658,P

6、%(25/42),多發(fā)性腫瘤中p-gP陽(yáng)性表達(dá)為88.2%(15/17);單發(fā)性腫瘤中,與內(nèi)參GAPDH相比Bcl一2的表達(dá)灰度比值(%)為72±37,,與內(nèi)參GAPDH相比Bcl一2的表達(dá)灰度比值(%)為165±63:?jiǎn)伟l(fā)性腫瘤中,與內(nèi)參GAPDH相比Bax的表達(dá)灰度比值(%)為191±40,多發(fā)性腫瘤中,與內(nèi)參GAPDH相比Bax的表達(dá)灰度比值(%)為115±64。多發(fā)性腫瘤中P—gP、Bcl一2的表達(dá)明顯高奎塞盔差鐾圭蘭壟笙奎予蕈發(fā)整瓣瘤,Bax寢達(dá)明顯低于擎發(fā)瞧瓣瘤。結(jié)論:籍麟藏綴緩P-gp、BcI-2、Bax,-j-作為判斷膀胱移行細(xì)胞璃的惡性程度指標(biāo)。P-gp

7、、Bcl一2和Bax可能與膀胱癌耐藥機(jī)制有關(guān)。聯(lián)合檢測(cè)P—gP、Bcl一2和Bax可能對(duì)判斷膀胱癌化療效果及預(yù)厝有一定的意義。P-gp、Bcl-2的高表達(dá)可能是膀胱癌術(shù)后復(fù)發(fā)有關(guān)?!觋P(guān)鍵詞]:磅胱腫瘤;多藥耐藥;P一糖鬣自;掏亡;Bcl-2;掛英文摘要theexpressionsandvalueofdrugresistanceproteinandtheassociatedapoptosisgenesintransitionalcellcarcinomasofbladderDepartmentofUrology,Zhong—Da

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