木聚糖酶基因克隆、表達(dá)和酶學(xué)性質(zhì)的研究

木聚糖酶基因克隆、表達(dá)和酶學(xué)性質(zhì)的研究

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1、!JIJIIlIIIIIH//lllI//llf華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用,,Y1812671學(xué)位論文題目:木聚糖酶基因的克隆、表達(dá)與酶學(xué)位級(jí)別博士所在學(xué)院學(xué)性質(zhì)研究生科院(系)學(xué)科專業(yè)微生物學(xué)導(dǎo)師姓名張先恩學(xué)生姓名張桂敏學(xué)位論文是如需保密,解密時(shí)間2010年7月1日是否保密獨(dú)創(chuàng)性聲明,本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果.盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用

2、過的材料,指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明,并表示了謝意。研究生簽名:鄉(xiāng)髟枉匆又時(shí)間:炒‘年歹月埸日學(xué)位論文使用授權(quán)書本人完全了解“華中農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定”,即學(xué)生必須按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本;學(xué)校有權(quán)保存提交論文的印刷版和電子版,并提供目錄檢索和閱覽服務(wù),可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人同意華中農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。注:保密學(xué)位論文在解密后適用于本

3、授權(quán)書。學(xué)位論文作者叛弓岳缸敬鋤始糊簽名日期:加6年歲月碾日簽名日期:加6年歲月繡日目錄中文摘要??????????????????????????????5Abstract??.???????????????????????????.-????????????.7縮略詞????????????????????????????????10l前言??????????????????????????????????????????..121.1研究問題的由來及意義??????????????????????121.2木

4、聚糖酶的研究進(jìn)展??????????????????????..141.2.1木聚糖的結(jié)構(gòu)???????????????????????..141.2.2木聚糖的酶解與木聚糖酶的作用機(jī)制?????????????.151.2.3木聚糖酶的酶學(xué)性質(zhì)????????????????????161.2.4木聚糖酶基因的克隆????????????????????.191.2.5木聚糖酶基因的異源表達(dá)??????????????????.211.2.6木聚糖酶基因的定點(diǎn)誘變??????????????????221.2.7

5、木聚糖酶的分子進(jìn)化????????????????????..241.2.8木聚糖酶的應(yīng)用??????????????????????.261.2.9木聚糖酶的研究趨勢(shì)??????.:?..j????????????291.3畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)的研究進(jìn)展???????????-???????一291.3.1載體的發(fā)展????????????????????????301.3.2受體菌??????????????????????????.3l1.3.3轉(zhuǎn)化方式??????????????????????????321.

6、3.4整合方式??????????????????????????321.3.5獲得高拷貝數(shù)整合轉(zhuǎn)化子的方法???????????????321.3.6溫度對(duì)畢赤酵母表達(dá)的影響?????????????????.331.3.7巴斯德畢赤酵母表達(dá)菌株的培養(yǎng)條件?????????????331.3.8畢赤酵母的糖基化?????????????????????。331.4本研究的目的??????????????????????????392材料與方法?????????????????????????????..412.1

7、實(shí)驗(yàn)材料和儀器設(shè)備???????????????????????.412.1.1實(shí)驗(yàn)菌株??????????????????????????4l2.1.2培養(yǎng)基??????????????????????????..412.1.3質(zhì)粒??????????????????????????????????..42,22.1.4引物????????????????????????????????????.432.1.5酶和試劑?????????????????????????..442.1.6儀器和設(shè)備?????????

8、???????????????..442.1.7主要緩沖液?????????????????????????452.2方法???????????????????????????????????????。462.2.1細(xì)菌總DNA的抽提?????????????????????462.2.2真菌總DNA的抽提?????????????????????462.2

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