sers活性磁性納米復(fù)合材料制備及其在腫瘤蛋白標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用研究

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1、摘要隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,大量研究證明腫瘤的產(chǎn)生和發(fā)展過(guò)程中都伴隨著一些特定蛋白質(zhì)的出現(xiàn)或者含量變化,檢測(cè)腫瘤標(biāo)志蛋白及其含量有望對(duì)腫瘤實(shí)現(xiàn)早期診斷。表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)用于蛋白質(zhì)檢測(cè)是蛋白質(zhì)檢測(cè)學(xué)與SERS技術(shù)相結(jié)合的新型檢測(cè)技術(shù),在生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域表現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛力?;谌髦谓Y(jié)構(gòu)的SERS免疫檢測(cè)是常用的一種基于SERS技術(shù)的蛋白質(zhì)檢測(cè)方法,基本組成部分有免疫檢測(cè)基底、待檢測(cè)蛋白、SERS免疫檢測(cè)探針。近年來(lái),磁性納米材料在生物樣品的分離提純方面表現(xiàn)出了突出的優(yōu)勢(shì),是理想的免疫基底材料。本論文中我們可控制備了Fe3O4@SiO2@Au核殼結(jié)構(gòu)這一兼具磁性和SERS活性的納米材料

2、,并進(jìn)一步構(gòu)建得到免疫檢測(cè)基底,結(jié)合花狀金納米顆粒構(gòu)建的SERS免疫探針,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤標(biāo)志蛋白CEA、NSE的高靈敏聯(lián)合免疫檢測(cè)。主要研究?jī)?nèi)容如下:(1)可控制備復(fù)合SERS增強(qiáng)性能的磁性納米材料首先采用共沉積法制備了Fe3O4磁性納米顆粒,隨后對(duì)納米顆粒進(jìn)行二氧化硅包殼,制備Fe3O4@SiO2核殼型納米結(jié)構(gòu),通過(guò)控制正硅酸乙酯的加入劑量調(diào)控了Fe3O4@SiO2的殼厚和包覆磁性顆粒粒子數(shù),并進(jìn)一步吸附金種子后生長(zhǎng)了一層SERS活性金納米殼,制備得到復(fù)合SERS增強(qiáng)性能的磁性納米材料Fe3O4@SiO2@Au。(2)基于SERS活性磁性納米顆粒開(kāi)展腫瘤標(biāo)志蛋白檢測(cè)選擇磁性和結(jié)構(gòu)俱佳、SER

3、S性能優(yōu)異的Fe3O4@SiO2@Au,經(jīng)表面修飾特定抗體構(gòu)建得到用于捕獲待檢測(cè)蛋白的免疫檢測(cè)基底,同時(shí)制備了具有優(yōu)異SERS增強(qiáng)性能的花狀金納米顆粒并構(gòu)建了SERS免疫檢測(cè)探針。免疫識(shí)別后形成三明治結(jié)構(gòu)復(fù)合物,利用外加磁場(chǎng),實(shí)施檢測(cè)樣品的分離與富集,分別對(duì)human-IgG和腫瘤標(biāo)志蛋白CEA實(shí)現(xiàn)了高靈敏、特異性檢測(cè)。(3)腫瘤標(biāo)志蛋白聯(lián)合檢測(cè)為實(shí)現(xiàn)雙元腫瘤蛋白標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè),我們基于Fe3O4@SiO2@Au材料,設(shè)計(jì)并構(gòu)建了能夠同時(shí)特異性捕獲腫瘤標(biāo)志物CEA和NSE的磁性免疫基底,并分別構(gòu)建了用于檢測(cè)CEA和NSE的高靈敏SERS探針,開(kāi)展并實(shí)現(xiàn)了對(duì)兩種腫瘤標(biāo)志蛋白的低濃度、特異性聯(lián)

4、合檢測(cè)。關(guān)鍵詞:表面增強(qiáng)拉曼散射、磁性納米顆粒、探針、免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物I萬(wàn)方數(shù)據(jù)AbstractWiththedevelopmentofmodernmedicine,alargenumberofresearchsshowthattheemergenceoftumorisoftenaccompaniedbytheemergenceofsomespecificproteinsorconcertrationchange.Theseproteinswerecalledthetumormarkerproteins,andtheaccuratedetectionoftumormarkerprotei

5、nsisexpectedtorealizeearlydiagnoseofcancer.Surface-enhancedRamanscattering(SERS)-basedproteindetectionhasbeenexpectedtobeapromisingandsignificanttechniqueforhighlysensitiveproteindetection,sinceSERStechniquepossessestheuniquefeatureswithultrahighsensitivity,anti-photobleachingandmultiplexdetectionc

6、apability.OneofthemostwidelyadoptedformatsofSERS-basedproteindetectionistheantibody-basedsandwichimmunoassay,includingimmuno-substrate(i.e.,supportingsubstrates),SERS-activeimmunosensor(i.e.,SERStags)andthetargetprotein.Magneticnanomaterialswhichshowprominentadvantageinseparationandpurificationofbi

7、ologicalsamplescanbeservedasidealimmuno-substrateinantibody-basedsandwichimmunoassay.Inthiswork,theSERS-activemagneticnanocomposite(Fe3O4@SiO2@Au)havebeentunablyfabricated,andtheultrasensitivedetectionsoftu

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