SZDBZ51-2011動(dòng)物甲型H1N1(2009-)流感病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)方法.pdf

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1、ICS11.220B41SZDB/Z51—2011SZDB/Z深圳市標(biāo)準(zhǔn)化指導(dǎo)性技術(shù)文件SZDB/Z51—2011動(dòng)物甲型H1N1(2009)流感病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)方法2011-12-29發(fā)布2012-01-01實(shí)施深圳市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IPDF文件使用"pdfFactoryPro"試用版本創(chuàng)建www.fineprint.cnSZDB/Z51—2011目次前言.................................................................................I

2、I引言................................................................................III1范圍................................................................................12規(guī)范性引用文件......................................................................13術(shù)語與縮略語.............

3、...........................................................14儀器與試劑..........................................................................15生物安全要求........................................................................26樣品采集和前處理.......................................

4、.............................37核酸提取............................................................................38實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè).................................................................49分析條件設(shè)定和結(jié)果判定..............................................................4附錄A

5、...............................................................................6附錄B................................................................................7附錄C................................................................................8IPDF文件使用"pdfFactoryPr

6、o"試用版本創(chuàng)建www.fineprint.cnSZDB/Z51—2011前言本文件按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本文件的某些內(nèi)容有可能涉及專利,應(yīng)按照專利法的規(guī)定執(zhí)行。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不應(yīng)承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任。本文件由深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局提出并歸口管理。本文件起草單位:深圳市檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院、中華人民共和國(guó)深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心、深圳市疾病預(yù)防控制中心、深圳市兒童醫(yī)院、美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)有限公司、深圳市外來有害生物檢測(cè)技術(shù)研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。本文件起草人:秦智鋒、孫潔、盧體康、房師松、花群義、劉建利

7、、方興旺、鄧?yán)^巋、陶虹、呂建強(qiáng)、曾少靈、詹愛軍、曹琛福、陳兵、林慶燕、陳書琨、阮周曦、張彩虹。IIPDF文件使用"pdfFactoryPro"試用版本創(chuàng)建www.fineprint.cnSZDB/Z51—2011引言為促進(jìn)深圳市有效應(yīng)對(duì)突發(fā)公共衛(wèi)生事件,規(guī)范我市對(duì)甲型H1N1(2009)流感病毒的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè),保障動(dòng)物及人類的生命健康,制定本指導(dǎo)性技術(shù)文件。本指導(dǎo)性技術(shù)文件中的主要技術(shù)指標(biāo)參照美國(guó)農(nóng)業(yè)部制訂的《REAL-TIMERT-PCRFORTHEDETECTIONOFH1N12009N1GENE》的標(biāo)準(zhǔn),結(jié)合深圳市

8、動(dòng)物和人類甲型H1N1(2009)流感病毒快速篩選檢測(cè)的實(shí)際需求確定。本指導(dǎo)性技術(shù)文件中的甲型H1N1(2009)流感病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)可以采用等效一步法或二步法,本標(biāo)準(zhǔn)以一步法為例規(guī)定各項(xiàng)操作,等效二步法可參見相應(yīng)的說明書

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