gpi錨定蛋白合成抑制劑的合成及其抗真菌活性研究

《gpi錨定蛋白合成抑制劑的合成及其抗真菌活性研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文DMFDCMTHFMeOHEtOHDMSO聊CDCl3DIEAPyBOPMsClEtOAcLAHAc20t．BuOKPd(OAc)2K2C03TLCNaBH3CNA1C13FLZMICso0D縮略詞表Ⅳ'Ⅳ-二甲基甲酰胺二氯甲烷四氫呋喃甲醇乙醇二甲亞砜三乙胺氘代氯仿Ⅳ，Ⅳ-二異丙基乙胺六氟磷酸苯并三唑．1．基．氧基三吡咯烷基甲磺酰氯乙酸乙酯四氫鋰鋁乙酸酐叔丁醇鉀醋酸鈀碳酸鉀薄層色譜分析氰基硼氫化鈉三氯化鋁氟康唑真菌生長80％被抑制時的藥物濃度光密度GPI-錨定蛋白抑制劑的合成及其抗真菌活性研究-二I_●‘·-JL—‘刖罱抗

2、真菌藥物是一類具有殺滅或抑制真菌生長、繁殖的藥物的統(tǒng)稱。自1939年，第一個抗真菌藥物灰黃霉素發(fā)現(xiàn)以來，人類與真菌感染的斗爭持續(xù)T70多年，隨著對真菌認識不斷加深和藥物研發(fā)技術(shù)的發(fā)展，出現(xiàn)大量不同結(jié)構(gòu)和作用機制的抗真菌藥物。臨床上被廣泛應(yīng)用的抗真菌藥物的作用機制主要有三種，以細胞色素P450酶系14a去甲基化酶為靶點的三唑類(如氟康唑)，以細胞膜上的麥角固醇為靶點的多烯類(如兩性霉素B)和以細胞壁上的夕．(1，3)-o．葡聚糖合成酶為靶點的棘白菌素類(如卡泊芬凈)。在眾多引發(fā)深部真菌感染的真菌中，以白色念球菌表現(xiàn)尤為突出并且高度耐藥，其耐藥機制有

3、以下幾種：(1)膜轉(zhuǎn)運蛋白表達改變。(2)藥物作用的靶酶發(fā)生改變。(3)甾醇合成通路的改變。(4)小囊狀空泡的影響。(5)生物被膜的形成。(6)鈣離子調(diào)節(jié)神經(jīng)磷酸酶通路的參與?？紤]到真菌的高度耐藥現(xiàn)象、兩性霉素B的毒副作用和棘白菌素類的實用性不強等因素，因此研發(fā)最新作用機制以求更加安全、高效、低毒的抗真菌藥物日趨迫切【1Ⅲ51。細胞壁是真菌區(qū)別于哺乳動物細胞的最大特征，所以以真菌細胞壁成分為靶點的抗真菌藥物一直是抗真菌藥物研究領(lǐng)域的熱點。將抑制GPI錨定蛋白的生物合成這一過程做為潛在的藥物靶點首先是由Tsukahara等提出的。細胞壁不僅對于真菌

4、細胞維持自身正常的生理功能具有重要作用，而且是其侵襲宿主引起感染的主要工具。目前已知的毒力因子包括粘附素、形態(tài)轉(zhuǎn)換相關(guān)蛋白、侵襲素等都位于細胞壁上，而且基本都屬于占細胞壁蛋白(CcllwallProtein，CWP)絕大多數(shù)(88％)的GPI-錨定蛋白【Glycosylphosphatidylinositol(GPI)一anchoredproteins]。真菌細胞壁存在多個家族的GPI．錨定蛋白，它們不僅作為細胞壁的重要組成部分維持真菌細胞的正常生理功能，而且在形成侵襲性感染過程的(粘附、侵襲、形態(tài)轉(zhuǎn)換、生物被膜形成等)多個環(huán)節(jié)起關(guān)鍵作用。雖然各

5、個家族的GPI．錨定蛋白在結(jié)構(gòu)上存在很大差異，但是它們具有相似的細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運途徑，即通過GPI錨(GPI，糖基化磷脂酰肌醇)轉(zhuǎn)運至細胞膜，然后再轉(zhuǎn)運至細胞壁，發(fā)揮生物學(xué)功能。針對真菌GPI錨合成的生物過程設(shè)計藥物，開發(fā)真菌細胞壁GPI．錨定蛋白抑制劑，不僅可以通過破壞真菌細胞壁的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)揮抗真菌作用，而且可以抑制真菌細胞的毒力(粘附、侵襲、形態(tài)轉(zhuǎn)換、生物被膜形成等)阻斷侵襲性感染的形成。由于GPI錨定蛋白是真菌類微生物細胞壁的主要部分，以此為靶點設(shè)計的藥物很有可能對人體細胞沒有副作用。Tsukahara等通過篩選化合物，發(fā)現(xiàn)化合物BIQ可以抑制

6、細胞表面的GPI錨定蛋白的表達并且存在劑量依賴關(guān)系。以BIQ第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文為母核進行構(gòu)效關(guān)系的研究和改造，發(fā)現(xiàn)化合物E1210具有更好的抗真菌作用，活性更強，選擇性也更高，目前E1210已進入臨床前研究?；衔?0b只是研究E1210過程中發(fā)現(xiàn)的少數(shù)幾個活性較好的化合物【16H19】。而gepinacin是CatherineA．McLellan等通過高通量篩選發(fā)現(xiàn)的唯一一個有效的化合物，以MIC80這一指標來衡量，它的活性其實并不是很突出。但是也說明可以抑制GPI錨定蛋白合成的母核并不只有一個【201。目前以這一靶點的研究發(fā)表的文章較少

7、，且活性數(shù)據(jù)不全，所以對該靶點化合物的構(gòu)效關(guān)系并不明確。根據(jù)文獻調(diào)研，本課題組決定選取化合物lOb為先導(dǎo)化合物，以GPI錨定蛋白的生物合成為靶點進行構(gòu)效關(guān)系的研究。Ⅳ"N""NH≈2倚kFMICso=0．0313ug／mL圖一人?！蟆Ｒ匀樟芜腉eplnaclnMICso=4ug／mLGPI-錨定蛋白抑制劑的合成及其抗真菌活性研究c類：∞倚Y＼Z勺化合物編號A環(huán)YZB環(huán)lOb鑼；一0無hF＼糾29鑼

8、一一CO-無西33鑼爭一CO·-CH2-◇37鑼；．無秒57鑼}-CH2-．S．琶8a鑼；一-CH2--O-毯8b鑼；一-CH2-一O．掙＼==／8c

9、鑼乒-CH2--O·西、8d移；一-CH2-．0．玲F8ej··CH2··-O-診；一∞8f鑼；一··CH2··．O．蟄●41a鑼爭-C