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《地黃多糖對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化作用的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、第18卷第6期中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志Vol．18，No．62012年3月ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulaeMar．，2012地黃多糖對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化作用的研究12221*杜紅陽(yáng)，付海燕，包翠芬，劉宇卓，秦書(shū)儉(1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，沈陽(yáng)110032;2.遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121000)［摘要］目的:探討地黃多糖體外對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)分化為神經(jīng)樣細(xì)胞的誘導(dǎo)作用。方法:以大鼠BMSCs為研究對(duì)象，采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)BMSCs表面標(biāo)志，MTT法檢測(cè)
2、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線，當(dāng)?shù)?代細(xì)胞爬片達(dá)到80%以上匯合－1－1時(shí)，分為對(duì)照組、化學(xué)方法誘導(dǎo)組(5mmol·L，β-mercaptoethanol)、腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子(10μg·L，BDNF)組和地黃多糖組－1(200mg·L)進(jìn)行誘導(dǎo)，6h后應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)元巢蛋白(nestin)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)，RT-PCR檢測(cè)nestin，NSE，βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)和GFAPmRNA的表達(dá)情況。結(jié)果:經(jīng)分離鑒定培養(yǎng)5代以內(nèi)大鼠BMSCs增殖旺盛、具有較好的細(xì)胞活力;免疫細(xì)胞化學(xué)
3、染色和RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，對(duì)照組不表達(dá)神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志物，各誘導(dǎo)組誘導(dǎo)后有特異性神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)。其中地黃多糖組Nestin，NSE陽(yáng)性細(xì)胞率分別為(56.74±1.36)%，(73.37±1.27)%，高于化學(xué)誘導(dǎo)組(28.21±2.43)%，(2.31±2.72)%和神經(jīng)生長(zhǎng)因子組(31.3±1.61)%，(28.87±1.65)%，(P＜0.05);GFAP陽(yáng)性細(xì)胞率(20.17±1.27)%低于化學(xué)誘導(dǎo)組和神經(jīng)生長(zhǎng)因子組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);化學(xué)誘導(dǎo)組Nestin，NSE和GFAP陽(yáng)性細(xì)胞率與生長(zhǎng)因子組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
4、結(jié)論:地黃多糖具有誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的作用，主要向神經(jīng)元樣細(xì)胞方向誘導(dǎo)。［關(guān)鍵詞］地黃多糖;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;神經(jīng)樣細(xì)胞;誘導(dǎo)［中圖分類號(hào)］R285.5［文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼］A［文章編號(hào)］1005-9903(2012)06-0133-05［DOI］CNKI:11-3495/R．20120113．1029．002［網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間］2012-01-1310:29［網(wǎng)絡(luò)出版地址］http://www．cnki．net/kcms/detail/11．3495．R．20120113．1029．002．htmlStudyonDifferentiationofRat
5、BoneMarrowMesenchymalStemCellsintoNeuron-likeCellsInducedbyRehmanniaglutinosaPolysaccharideinvitro12221*DUHong-yang，F(xiàn)UHai-yan，BAOCui-fen，LIUYu-zhuo，QINShu-jian(1.LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032，China;2.LiaoningMedicalUniversity，Jinzhou121001，China)［A
6、bstract］Objective:ToinvestigatetheeffectofRehmanniaglutinosapolysaccharide(RGP)oninducingdifferentiationofratsbonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)intoneuron-likecellsinvitro．Method:AftercharacterizedcellsurfacemarkersbyflowcytometryanalysisandassessedcellgrowthcurvebyMTT，ratBMSC
7、swereexperimentedastheobject．Whenthethirdpassagecellsgrewtofusionofmorethan80%，thecellsweredividedinto4groupssuchasthecontrolgroup，theβ-mercaptoethanol(BME)inductiongroup，thebrainderivedneurotrophicfactor(BDNF)inductiongroupandthe(RGP)inductiongroup．ImmunocytochemicalstainandRT-P
8、CRmethodwereusedtodetectseveralneuralspe
