plga、plgaβtcp納米纖維支架的制備、體外降解及細(xì)胞相容性研究

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1、摘要PLGA、PLGA/13.TCP納米纖維組織工程支架的制備,體外降解及細(xì)胞相容性研究運用靜電紡絲技術(shù)制備的組織工程支架,具有類似細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的形態(tài)和結(jié)構(gòu),是組織工程領(lǐng)域的研究熱點。靜電紡絲支架的體外降解性能評價對于進(jìn)一步的體內(nèi)降解和長期成功移植都是不可或缺的步驟。本文研究了靜電紡絲法制備的PLGA、PLGA/B.TCP納米纖維支架的體外降解及細(xì)胞相容性。首先,采用靜電紡絲技術(shù),以銅網(wǎng)(40目)為接受裝置,設(shè)計制備了表面具有巢形花紋結(jié)構(gòu)的PLGA(75/25)納米纖維支架,并比較了巢形結(jié)構(gòu)的

2、三個典型區(qū)域(脊形區(qū)、無紡區(qū)、磁力線區(qū))的微觀拓?fù)鋵W(xué)結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明,支架的表面由許多巢形結(jié)構(gòu)單元(400X3001am)彼此連接而成。盡管纖維直徑在三個典型區(qū)域中無顯著差異(849-a:118rim),但纖維取向和孔徑大小差異很大。其次,在磷酸鹽緩沖溶液(PBS,pH7.4,37℃)和加有溶菌酶(1ysozyme)的PBS(pH7.4,37。C)溶液中對PLGA納米纖維支架分別進(jìn)行體外水解和體外酶解。研究結(jié)果表明,PLGA支架能夠隨降解的進(jìn)行而維持最初的拓?fù)鋵W(xué)結(jié)構(gòu),巢形結(jié)構(gòu)的骨架的存在能夠有效的防止納

3、米纖維支架變形。另一方面,PLGA納米纖維支架水解過程和酶解過程都分為兩個階段。在第一階段,分子量隨降解進(jìn)行持續(xù)下降而重量損失很?。辉赥北京化工大學(xué)碩上學(xué)位論文第二階段,分子量下降到一個低值后隨時間變化不大而重量損失很大。水解20周以后,納米纖維內(nèi)部呈現(xiàn)多孔結(jié)構(gòu),但纖維表面幾乎完整無損。證明納米纖維(<900nm)在水解過程中,白催化效應(yīng)仍然存在。而酶解16周以后的納米纖維,無論內(nèi)部和表面都呈現(xiàn)多孔結(jié)構(gòu),溶菌酶的存在只能加速溶解低分子量的降解產(chǎn)物,對于聚合物鏈的斷裂沒有貢獻(xiàn)。第三,應(yīng)用靜電紡絲技術(shù)制備

4、出具有巢形花紋結(jié)構(gòu)的PLGA/13.TCP(B.TCP含量10%wt和20%wt)納米纖維復(fù)合物支架,以純PLGA納米纖維支架為參照,在磷酸鹽緩沖溶液(PBS,pH7.4,37。C)中進(jìn)行體外降解實驗。研究結(jié)果表明,13.TCP粒子被成功包裹在PLGA納米纖維的內(nèi)部形成PLGA/B.TCP復(fù)合支架,其拉伸強度和彈性模量分別可以達(dá)到5.02MPa和120MPa。三種支架的樣品重量、PLGA分子量、拉伸強度和模量都隨著降解過程的進(jìn)行而逐漸降低。但復(fù)合支架中13.TC含量的增加有利于降低降解介質(zhì)的酸度,減緩

5、樣品重量和PLGA分子量的下降速度,增加降解介質(zhì)中Ca+濃度。采用MTT法檢測了成骨肉瘤細(xì)胞(MG.63)在上述三種納米纖維支架上的增殖,發(fā)現(xiàn)13.TCP的引入及其含量的增加有利于提高材料的細(xì)胞相容性。因此,具有巢形花紋結(jié)構(gòu)的PLGA/B.TCP復(fù)合納米纖維膜具有適中的力學(xué)性能、可控的降解性能和良好的細(xì)胞相容性,有望作為骨組織工程支架材料。關(guān)鍵詞:靜電紡絲,巢形花紋結(jié)構(gòu),自催化,PLGA/13.TCP,力學(xué)性能,細(xì)胞相容性II摘要Preparation,degradationandcytocompat

6、abilityofnest-likepatternedelectrospunPLGAandPLGA/13--TCPscaffoldsABSTRACTScaffoldsfabricatedviaelectrospinningcouldmimickExtracelluarmatrixwellandbecomestudyhotspotsintissueengineering.Invitroevaluationofdegradationpropertiesofelectrospunscaffoldsisall

7、inevitableprocedurebeforefurtherbiodegradationsandlong-termSuccessinvivo.Thepreparation,degradation,andcytocompatibilityofnest—likepatternedelectrospunPLGAandPLGA/B—TCPscaffoldswerestudiedinthisthesis.Firstly,nest—likepatternedelectrospunPLGA(75/25)scaf

8、foldwasfabricatedbyelectrospinningusinggridcopperwiresascollector.Theas-·electrospunnest·-likepatternedPLGAscaffoldswerecomposedofnumerousnest—likeunits(400X3009m),whichhadthreetypicalregionswithdifferenttopography:ridge-likeregi

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