平菇多糖提取、鑒定及其抗氧化活性的研究

平菇多糖提取、鑒定及其抗氧化活性的研究

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1、中文摘要平菇是一種常見的食用菌,在我國種植廣泛。平菇富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),其主要的生理活性成分是平菇多糖。近年來,平菇多糖因具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化等多種生物學(xué)活性而備受關(guān)注。本論文以平菇子實(shí)體為研究原料,建立了平菇多糖的提取優(yōu)化條件以提高多糖得率;對(duì)提取的平菇多糖進(jìn)行分離純化,并對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定:對(duì)平菇多糖體外清除DPPH、超氧陰離子和羥基自由基的能力和對(duì)高糖環(huán)境下的腎系膜細(xì)胞的作用進(jìn)行研究。試驗(yàn)結(jié)果如下:1.正交試驗(yàn)優(yōu)化提取條件:以平菇予實(shí)體為研究對(duì)象,進(jìn)行單因素影響試驗(yàn),篩選出主要影響因素;再結(jié)合實(shí)際綜合考慮,以正交試

2、驗(yàn)確定最佳提取工藝,具體為:以1:30的料液比,提取溫度為60℃,提取時(shí)間為3小時(shí),乙醇的最終濃度為75%。根據(jù)上述優(yōu)化的工藝對(duì)平菇多糖進(jìn)行提取,多糖的得率為5.7%。2.粗多糖PSPO,經(jīng)DEAE.52陰離子交換層析,得到水洗多糖組份PSPO.1和PSPO.2,鹽洗多糖組份PSPO.3和PSPO.4(0.1.0mol/L的NaCl溶液梯度洗脫);PSPO一1和PSPO.4經(jīng)AKATASuperdex.75凝膠柱層析柱進(jìn)一步分離純化,得到PSPO—la和PSPO-4a兩種均一性多糖。3.PSPO.1a和PSPO一4a

3、經(jīng)紅外光譜、紫外光譜、HPLC檢測(cè),PSPO.1a分子量為1.8x104Da,單糖組成為Man,Glu,Gal,Xyl和Rha(摩爾比為2.47:0.91:1.O:1.66:3.87);PSPO.4a分子量為1.1x106Da,單糖組成為Rha,Man和Gal(摩爾比為0.92:2.69:1.O)。4.體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果:PSPO.1a和PSPO.4a對(duì)DPPH的清除率IC50分別為1.434-0.055mg/mL和2.34-0.067mg/mL;對(duì)超氧陰離子的清除率ICso分別為2.0士0.066mg/mL和4.8

4、4-0.067mg/mL;對(duì)羥基自由基的清除率ICso分別為6.14-0.242mg/mL和7.0士0.282mg/mL,PSPO—la的抗氧化活性高于PSPO-4a。5.對(duì)高糖環(huán)境下的腎系膜細(xì)胞結(jié)果:PSPO.1a和PSPO.4a均能抑制高糖環(huán)境下腎系膜細(xì)胞的增殖,低濃度平菇多糖能提高高糖環(huán)境下腎系膜細(xì)胞上清液中SOD和GSH.Px酶的活性,減少M(fèi)DA生成,說明多糖具有保護(hù)細(xì)胞對(duì)抗高糖環(huán)境刺激產(chǎn)生的氧化壓力。同時(shí),平菇多糖能降低系膜細(xì)胞TGF.131、FN和Ⅳ型膠原的合成,提示平菇多糖可抑制腎系膜增生肥大,減少胞外

5、基質(zhì)蛋白的積聚,對(duì)預(yù)防和治療糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展應(yīng)有很好的作用,具有潛在應(yīng)用價(jià)值。關(guān)鍵詞:平菇多糖;多糖結(jié)構(gòu);抗氧化;腎系膜細(xì)胞;胞外基質(zhì)蛋白;TGF-131IIAbstractPleurotusostreatusiswellknownasanediblefunguswhichhashi曲lynutritiousfunction,andareplantedwidelyinChina.Postreatusarerichinnutrients,polysaccharidesofP.ostreatusaremainfunc

6、tioncomponents.Inrecentyears,thepolysaccharidesfromP.ostreatuswerepaidmuchmorecloseattentionsduetomanykindsofbiologicalactivitiessuchasantioxidant,anti—inflammatory,antitumor,anti—promotionpropertiesandSOon.Inthisthesis,thematerialswerethefruitingbodiesofP.1eur

7、otus.OrthogonaldesignmethodwassetuptofindoptimizationoftheextractingconditionsforpolysaccharidesfromP.ostreatus,whichcouldimprovetherateofpolysaccharide.Thenpolysaccharidesextractedfi-omtheP.ostreatuswereisolatedandpurified,inaddition,thestructuralcharacteristi

8、csofthepurifiedpolysaccharidesweredetectedandexplained.Finally,theactivitiesofpolysaccharidesfromP.ostreatusonrepairingthedamageofmesangialcellsinducedbyhi曲glucoseandscaveng

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