磁性納米微球在體外分離純化領(lǐng)域的應(yīng)用研究

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1、摘要各種生物分子如核酸、蛋白質(zhì)、多肽和細(xì)胞等的分離、純化和精制是生命科學(xué)各研究領(lǐng)域必不可少的組成部分,分離純化技術(shù)的高低對(duì)整個(gè)生物學(xué)的發(fā)展具有舉足輕重的作用。以磁性材料作為分離載體的磁性分離技術(shù)是近年來(lái)興起的一種新型分離技術(shù),它的發(fā)展對(duì)體外分離純化領(lǐng)域具有重要意義。本文以超順磁性納米材料作為分離介質(zhì),對(duì)磁分離技術(shù)在核酸提取領(lǐng)域的應(yīng)用、生物分子標(biāo)記磁性分離載體的制備及其應(yīng)用可行性進(jìn)行了研究。本文首先簡(jiǎn)要介紹了磁分離技術(shù)在生物分離純化領(lǐng)域的應(yīng)用現(xiàn)狀。磁分離技術(shù)通過(guò)磁性分離載體在外加磁場(chǎng)的定向控制下,利用特異性親和作用可以一步從復(fù)雜的原始生物體系中直接分離出目標(biāo)生物分子,具

2、有磁性分離的簡(jiǎn)單方便性和親和分離的高特異性雙重優(yōu)勢(shì)。其在生物分離純化和檢測(cè)中的應(yīng)用領(lǐng)域包括:核酸提取、細(xì)胞分選、蛋白質(zhì)分離純化、酶的固定化、免疫分析與檢測(cè)等。本文針對(duì)二氧化硅表面修飾的磁性納米微球分離介質(zhì),研究了磁分離技術(shù)在質(zhì)粒DNA與基因組DNA提取領(lǐng)域的應(yīng)用,通過(guò)對(duì)提取流程和試劑體系的設(shè)計(jì),建立了快速提取核酸的磁分離技術(shù)。此外,針對(duì)表面氨基或羧基化的磁性納米微球,探討了生物分子諸如抗體、鏈霉親和素及ProteinA磁性分離載體的制備方法及其應(yīng)用可行性。本文還針對(duì)磁分離技術(shù)在應(yīng)用過(guò)程中的需求,設(shè)計(jì)并開(kāi)發(fā)了幾種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、使用方便、價(jià)格低廉的體外分離純化用實(shí)用新型多功能

3、磁分離架。關(guān)鍵詞:磁性納米微球磁珠磁性分離核酸蛋白質(zhì)AbstractSeparationandpurificationofbiologicalmoleculessuchasnucleicacid,protein,peptideandcellsisamajorandnecessarystepinthefieldoflifescience,thus,thelevelofseparationandpurificationtechnologyplaysanimportantanddecisiveroleinthedevelopmentofbiology.Magneticsep

4、arationtechnologyisanewtypeofseparationtechnologydevelopedinrecentyears.Itsdevelopmenthasagreatsignificenceinthefieldof/nvitroseparationanddetection.Inthisstudy,byusingsuperparamagneticnanomaterialsasseparationmedium,magneticseparationfornucleicacidextraction,preparationofmagneticcarrie

5、rslabeledwithbiologicalmoleculesandtheirapplicationfeasibilitywereinvestigatedanddiscussed.First,applicationstatusofmagneticseparationtechnologyinthefieldof/nvitroseparationanddetectionWasbrieflyintroduced.MagneticseparationtechnologyCandirectlyandsimplyisolatethetargetmoleculefromorigi

6、nalcomplexbiologicalsystemsbyutilizingaspecificaffinityreactionandanorientedcontrolbasedonadditivemagneticfield,therefore,ithasdoubleadvantagenamelyasimpleandconvenientpropertybsedonmagneticseparationandahi曲specificitybasedonaffinityseparation.Itspotentialapplicationfieldsforseparationa

7、nddetectionarecomposedofnucleicacidextraction,cellseparation,proteinisolationandpurification,enzymeimmobilization,immunologicalanalysisanddetectionandSOon.Next,applicationofsilica-modifiedsuperparamagneticnanoparticlesforextractionofplasmidDNAandgenomicDNAWasstudied.Rapidextrac

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