共振光散射成像分析技術(shù)開發(fā)及其在生化分析中的應(yīng)用

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1、西南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文共振光散射成像分析技術(shù)開發(fā)及其在生化分析中的應(yīng)用姓名：郭宏平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：黃承志20050501西南師托k學(xué)碘l‘論文接抓光散劓成像分析技術(shù)開發(fā)及jC扎宅化分析中的冉i訂共振光散射成像分析技術(shù)開發(fā)及其在生化分析中的應(yīng)用學(xué)科專業(yè)：分析化學(xué)指導(dǎo)教師：黃承志教授內(nèi)容摘要研究方向：生化藥物分析研究生：郭宏平(2002399)基于光散射粒子高的光發(fā)射能力，在臨床檢驗和生物分析、超靈敏免疫檢測和DNA探針分析中進(jìn)行光散射微粒標(biāo)記顯微成像分析已引起人們廣泛關(guān)注。實驗證明應(yīng)用共振光散射(RLS)粒子作為標(biāo)

2、記比熒光標(biāo)記的靈敏度能夠得到顯著提高。本文在普通RLS技術(shù)的基礎(chǔ)上，建立了一種共振光散射成像技術(shù)，可以觀察到單個聚集粒子的光散射性質(zhì)，通過對單個散射粒子的光散射信號檢測，實現(xiàn)了生物大分子及藥物分子的分析測定。研究內(nèi)容包括下列四個方面：(1)研究了鉻水解聚合物的光譜性質(zhì)，并且運用共振光散射(RLs)光譜研究其與核酸的相互作用。鉻聚合物在415nln和580nlTl處具有特征吸收，在350llm處具有最大熒光發(fā)射。在酸性條件下，鉻聚合物與核酸作用產(chǎn)生強烈增強的RLS信號，其特征峰位于299．0nm，據(jù)此討論無機聚合物試劑與生物大分子之間的作用，

3、并建立了核酸的分析方法。(2)在酸性介質(zhì)中，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)存在時，四．(對磺基苯基)hi-啉(TPPS,)和四．(s．磺基噻吩)al-啉FRs—ST)P】，可以發(fā)生^聚集，從而導(dǎo)致增強的RLS信號，且其特征峰分別位于490．0rltn與469．0nm處。運用488nm氬離子激光光源激發(fā)溶液中的聚集粒子，在與激光光束呈直角的方向，我們可以通過普通的顯微鏡觀察到單個聚集粒子的散射光，并且能夠用～個冷卻型電荷耦合裝置(CCD)進(jìn)行成像。對這些數(shù)字化圖像進(jìn)行數(shù)據(jù)分析的結(jié)果表明，在焦平面上檢測到的聚集粒子個數(shù)與溶液中的蛋白質(zhì)濃度成正比，據(jù)此建立了靈敏測定蛋

4、白質(zhì)的分析方法，并且成功地用于人血清樣品中蛋白質(zhì)的測定。(3)在中性介質(zhì)中，四(四一氨基苯基)hi-啉(TAPP)與肝素通過靜電和疏水作用相互結(jié)合，在430．0nm處產(chǎn)生RLS特征峰。在441．6砌He．Cd激光線的激發(fā)下，單個TAPP-肝素聚集粒子的光散射信號可以通過普通的顯微鏡觀察到，并且能夠用CCD對其成像進(jìn)行表征。數(shù)據(jù)分析表明，焦平面一定面積內(nèi)的成像粒西南師范入學(xué)碩lj論文兆振光散目J成像分析技術(shù)開發(fā)及．tL：／li生化分析中的應(yīng)用子數(shù)與肝素的濃度在一定范圍內(nèi)成線性關(guān)系，據(jù)此建立了靈敏測定肝素的方法，并成功用于肝素鈉注射液中肝素含量

5、的測定。(4)在中性介質(zhì)中，四．(對磺基苯基)卟啉(TPPS4)與鹽酸小檗堿相互作用導(dǎo)致增強的RLS信號。結(jié)合微流控技術(shù)，微流通道中的聚集粒子可以通過角度化的488哪激光激發(fā)，單個TPPS4一鹽酸小檗堿聚集粒子的光散射信號可以通過普通的顯微鏡觀察到，并且能夠用CCD對其成像進(jìn)行表征。據(jù)此建立了一種角度化的光散射成像一微流控分析方法。數(shù)據(jù)分析表明，焦平面一定面積內(nèi)的成像粒子數(shù)與鹽酸小檗堿的濃度在一定范圍內(nèi)成線性關(guān)系，據(jù)此建立了靈敏測定小檗堿的方法，并成功用于片劑中小檗堿含量的測定。關(guān)鍵詞：共振光散射技術(shù)共振光散射成像技術(shù)共振光散射成像一微流控

6、技術(shù)鉻聚合物蛋白質(zhì)核酸肝素鹽酸小檗堿兩商師范大學(xué)碩一I論文#振光敬剁成像分析技術(shù)開發(fā)世扎托生化竹析中的』、V用DevelopmentofResonanceLightScatteringImagingTechniqueandItsApplicationsinBiochemicalAnalysisMajor：AnalyticalChemistryResearch：BiochemicalandPharmaceuticalAnalysisSupervisor：ProfessorChangZhiHuangPostgraduate：HongPingGu

7、o(2002399)ABsTRACTBasedonthehighlight-scatteringpowerofresonancelightscattering(RLS)particles，theapplicationsofRLSparticlesashighlyfluorescentanalogsandtheirI．}seastracerlabelsinclinicalandbiologicalapplications，ultrasensitiveimmuno-andDNAprobeassayscombinedwithmicroscopya

8、ndimagingtechniqueshavebeingaddressedmoreandmoreinterests．IthasprovedthattheuseofRLSparti