共振光散射技術在藥物分析中的應用

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1、共振光散射技術在藥物分析中的應用【摘要】對共振光散射技術在藥物與生物大分子分析測定中的應用狀況及其進展進行了綜述。重點介紹了該方法在生物體液中藥物的分析和中藥成分的分析應用前景。為體內大分子藥物及其他藥物成分的檢測方法研究提供了新途徑。【關鍵詞】共振光散射技術;藥物分析  Abstract:Theapplicationandthedevelopmentoftheresonancelightscattering(RLS)methodusedindrugdeterminationandthebiomacromolecu

2、ledeterminationaceuticalquantificationinbiologicalfluids,andtheapplicationofRLSinquantificationofChinesemedicineethodmightbeanovelinationmacromoleculardrugsandothermedicinalingredientsinvivo.  Keyaceuticalquantification  共振光散射(resonancelightscattering,RLS)是利用普

3、通熒光分光光度法對散射光進行測量的一種散射光分析技術[1]。該技術由于其簡單、快速、靈敏的分析特點,吸引了生命科學、分析化學、環(huán)境科學、材料科學等領域的分析工對其理論和應用進行了深入的研究,促進了分析學科內部各個分支之間的聯系,尤其是在生化領域已經取得一定的研究成果[2]?! 」馍⑸洮F象廣泛存在于光與粒子相互作用的過程中,當介質中粒子的直徑(d)與入射光波長(λ0)存在d≤0.05λ0時,產生的是以瑞利(Rayleigh)散射為主的分子散射光[3]。根據RLS理論可以得到散射光強度與散射粒子的濃度c成正比的關系,即

4、IRLS=Kcb。據此可以用于大分子物質溶液的分析測定[1]?! LS分析法靈敏度高,操作簡單方便,可通過普通熒光分光光度計同步掃描得到完整的RLS特征光譜和相應RLS峰。由于RLS法源于Rayleigh散射光吸收光譜,它對分子結構大小和形狀(如球形、鏈形、無規(guī)則線團等)、電荷分布、鍵合性質等研究還能提供新的、更豐富的信息。近年來的研究證明,RLS法還可用于痕量金屬、表面活性劑以及納米材料[4,5]等方面的研究測定。該方法一般不需要對樣品進行復雜的化學預處理,避免了一系列煩瑣的操作程序,而直接將處理好的樣品溶液置

5、于普通的熒光分光光度計中進行測定即可?! ?體液中生物大分子的測定  1.1蛋白質  蛋白質的功能很多,與生命的起源和生物的進化、細胞結構、病毒、免疫、酶、激素、物質的遺傳等有密切的聯系,它是生命現象的物質基礎。蛋白質定量測定是生物化學和生命學科中經常涉及的分析內容,在臨床醫(yī)學中也有重要應用。目前,蛋白質測定方法主要有LooeersolGreen法[9]與Bormophenolblue法[10]等。Pasetmack[1]將RLS技術用于測定微量蛋白質以來,RLS法分析技術以其方法簡單、快速、靈敏度高,在生物大分子

6、分析測定研究中的報道日益增多,靈敏度可達納克級[11]。  黃承志等研究了陰離子表面活性劑羅丹明B(RhodamineB,RhB)與十二烷基硫酸鈉(SDS)?蛋白質體系的RLS光譜特征。實驗發(fā)現,SDS與HSA(humanserumalbumin,HSA)結合后再與RhB作用,其散射光強度增強。且RLS增強的程度與蛋白的濃度在一定范圍內呈線性關系。據此,建立了一種測定人血清中總蛋白質的新方法[12]。胡之德等基于在pH2.11的酸性溶液中,聚乙二醇辛基苯基醚(OP)對亮麗春紅5R?蛋白質體系的RLS信號有強烈的增敏

7、現象,建立了OP?蛋白質?亮麗春紅5R三元體系測定人血清中蛋白質濃度的新方法。該體系對人血清白蛋白檢測的線性范圍在0.0~10.0pg·mL-1之間,檢測限為5.0ng·mL-1,檢測實際樣品的回收率在97.80%~109.62%之間,方法令人滿意[13]。王錫寧等利用RLS技術測定白蛋白、紅蛋白。研究了間苯二酚黃?OP?蛋白質體系RLS光譜特性,確定了在340.0nm處,pH2.40,間苯二酚黃濃度為2.3×10-5mol·L-1,OP的濃度為3.0×10-5mol·L-1時為最佳反應條件,據此建立了一種靈敏度高

8、的測定蛋白質的新方法[14]。薛蓓等研究了流動注射(FIA)?RLS技術聯用在線測定人血清中蛋白質含量。以SDS為熒光探針,利用未曾報道過的RLS與FIA聯用檢測人血清樣品中蛋白質含量。與單純用RLS法測定比較,分析時間由40min縮短至1min,RLS信號的重現性得到了顯著改善,提高了實驗的靈敏度和重現性[15]。梁宏等在普通熒光分光光度計上選擇合適的激發(fā)

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