玉米籽粒特異表達(dá)大豆鐵蛋白ferritin基因遺傳轉(zhuǎn)化

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)ThesisforMaster’Sdegree,ShanxiUniversity,2012StudyonEndosperm—specificExpressionofSoybeanFerritinGeneinMaizeStudentNameXiao—liLiSupervisorProf.Yun-pingDuanMajorSpecialtyDepartmentProf.Chuan—xaioXieCropGeneticsandBreedingBiotechnologyandGermplasmImprovementinMaizeBiologicalEngineeringIn

2、stituteResearchDuration2009.09—2012.06June,2012萬(wàn)方數(shù)據(jù)目錄中文摘要????????????????????????????IABSTRACT.......??...................????.????.?........?......??....?.?..............III第一章文獻(xiàn)綜述??????????????????????????l1.1植物鐵蛋白概述??????????????????????l1.1.1鐵的生理功能?????????????????????11.1.2缺鐵的影響及防治???

3、????????????????21.1.3鐵蛋白的結(jié)構(gòu)?????????????????????31.1.4鐵蛋白的生理功能???????????????????31.1.5轉(zhuǎn)鐵蛋白基因研究進(jìn)展?????????????????31.2植物啟動(dòng)子概述???????????????????????41.2.1植物啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)及其功能????????????????41.2.2啟動(dòng)子分類??????????????????????51.2.3胚乳特異啟動(dòng)子????????????????????71.3農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化????????????????????91.3.1植物

4、遺傳轉(zhuǎn)化方法???????????????????91.3.2農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化機(jī)理????????????????????91.3.3農(nóng)桿菌介導(dǎo)的玉米遺傳轉(zhuǎn)化影響因素??????????一101.3.4農(nóng)桿菌介導(dǎo)的玉米轉(zhuǎn)化研究??????????????.11第二章大豆鐵蛋白Ferritin基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建?????????..132.1實(shí)驗(yàn)材料?????????????????????????.132.1.1載體與菌株?????????????????????..132.1.2酶及其他試劑????????????????????..132.1.3培養(yǎng)基及抗生素??????

5、?????????????一132.1.4儀器??????????????????????????????132.2實(shí)驗(yàn)方法?????????????????????????.132.2.1Zein::Ferritin基因插入片段分離?????????????132.2.2CUB載體線性片段的獲得???????????????一142.2.3pCUB.Zein::Ferritin載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)化??????????16萬(wàn)方數(shù)據(jù)2.2.4pCUB—Zein.'.'Ferritin重組質(zhì)粒的驗(yàn)證???????????172.3結(jié)果與分析?????????????????????

6、???.202.3.1Zein::Ferritin基因目的片段的獲得????????????202.3.2線性pCUB的獲得??????????????????一202.3.3重組質(zhì)粒pCUB—Zein:.Ferritin的驗(yàn)證??????????一212.4討論????????????????????????????????????.24第三章農(nóng)桿菌介導(dǎo)的玉米遺傳轉(zhuǎn)化?????????????????.253.1實(shí)驗(yàn)材料?????????????????????????253.2實(shí)驗(yàn)方法和步驟??????????????????????.253.2.1植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿

7、菌???????????????一253.2.2農(nóng)桿菌介導(dǎo)的玉米莖尖遺傳轉(zhuǎn)化????????????..263.2.3To代轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR檢測(cè)???????????????273.2.4T1代轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR檢測(cè)???????????????293.3結(jié)果與分析????????????????????????.293.3.1植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌PCR檢測(cè)???????????293.3.2莖尖轉(zhuǎn)化??????????????????????..293.3.3To代轉(zhuǎn)基因植株P(guān)CR檢測(cè)??????????????

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