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《胡椒堿對脊髓損傷大鼠神經(jīng)保護(hù)及作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文胡椒堿對脊髓損傷大鼠神經(jīng)保護(hù)及作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究姓名：趙志煌申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：張更申201203中文摘要胡椒堿對脊髓損傷大鼠神經(jīng)保護(hù)及作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)研究摘要背景：脊髓損傷是神經(jīng)外科常見疾病之一，雖經(jīng)國內(nèi)外多年研究，目前尚無理想恢復(fù)神經(jīng)功能的方法。依據(jù)目前對脊髓損傷病理發(fā)展過程的新認(rèn)識及胡椒堿藥理作用的研究，我們設(shè)計本研究以觀察胡椒堿是否具有對脊髓損傷神經(jīng)功能保護(hù)作用，并對可能的作用機(jī)制做進(jìn)一步的探討。以求保護(hù)脊髓損傷后的神經(jīng)功能的新方法。第一部分胡椒堿對脊髓損傷大鼠運(yùn)動功能保護(hù)作用的觀
2、察目的：觀察胡椒堿是否具有對脊髓損傷大鼠運(yùn)動功能保護(hù)作用。方法：(1)動物來源與分組：將36只成年雄性SD大鼠應(yīng)用隨機(jī)數(shù)字表進(jìn)行隨機(jī)分組，分為4組，每組9只，分為假手術(shù)組，生理鹽水組，胡椒堿溶媒組，胡椒堿組。(2)大鼠脊髓損傷動物模型制作：所有組的大鼠均在胸1O左右水平打開背側(cè)脊柱棘突，生理鹽水組，胡椒堿溶媒組，胡椒堿組按照Allen’s法建立脊髓損傷模型，假手術(shù)組不進(jìn)行脊髓損傷。(3)給藥方式：胡椒堿組大鼠進(jìn)行50mg／kg胡椒堿懸濁液(含7ml／kg胡椒堿溶媒)灌胃給藥，胡椒堿溶媒組大鼠只給予7rnl／kg胡椒堿溶媒(含滅
3、菌注射用水、無水乙醇和聚乙二醇．400混合液)灌胃給藥，假手術(shù)組和生理鹽水組大鼠給予7ml／kg生理鹽水灌胃給藥。每組大鼠都是在術(shù)后1d給予灌胃給藥，每天～次，持續(xù)14d。(4)大鼠脊髓神經(jīng)功能測定：受試大鼠分別在術(shù)后1d、7d、14d應(yīng)用國際通用的BBB行為學(xué)評分法(Basso．Beattie．BresnahanTest)進(jìn)行評價。模型各組術(shù)后ld評分為0分則納入實(shí)驗(yàn)。在7d和14d時進(jìn)行各組進(jìn)行比較。術(shù)后14d受試動物麻醉后經(jīng)左心室灌注4％多聚甲醛磷酸緩沖液，取損傷部位5mm脊髓，用4％多聚甲醛液固定48小時，常規(guī)石蠟包埋
4、。(5)數(shù)據(jù)統(tǒng)計：本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSSl3．0統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)均為統(tǒng)計計量資料，符合正態(tài)的數(shù)據(jù)用；士S(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，否則用中位數(shù)表示。多個樣本均數(shù)比較，若數(shù)據(jù)符合正態(tài)性分布且方差齊則采用one．wayANOVA(F檢驗(yàn))，組間兩兩比較采用LSD．t檢驗(yàn)，否則采用秩轉(zhuǎn)中文摘要換的非參數(shù)檢驗(yàn)的Mann．WhitneyU法。定P<0．05為有顯著性差異。結(jié)果：1術(shù)后1d假手術(shù)組大鼠術(shù)后沒有截癱(21分)，術(shù)后7d、術(shù)后14d的評分分別為(21，21)。術(shù)后1d其他組大鼠術(shù)后均出現(xiàn)截癱(O分)，胡椒堿組大鼠術(shù)后7d、14d的評
5、分分別為(6．33士1．58，11．00-J：0．87)。胡椒堿溶媒組大鼠術(shù)后7d、14d的評分分別為(2．89+0．78，6．78d：1．09)。生理鹽水組大鼠術(shù)后7d、14d的評分分別為(3．00-M．32，6．44+1．24)。除了假手術(shù)組，其它各組術(shù)后14天較7天評分均有所恢復(fù)。2術(shù)后7d，假手術(shù)組的評分分別與胡椒堿組(z--．3．841，P=0．000)、胡椒堿溶媒組(Z=．3．855，P=0．000)和生理鹽水組(Z=．3．839，P=0．000)比較均有顯著性差異。術(shù)后14d，假手術(shù)組的評分分別與胡椒堿組(Z--
6、．3．848，P=0．000)、胡椒堿溶媒組(Z=．3．841，P=0．000)和生理鹽水組(Z=．3．848，P=0．ooo)tL較均有顯著性差異。術(shù)后7d以及術(shù)后14d胡椒堿溶媒組和生理鹽水組之間比較均沒有顯著性差異(Z-．0．184P=0．854，Z一0．509P=0．61l、)，術(shù)后7d胡椒堿組分別與胡椒堿溶媒組和生理鹽水組之間比較有顯著性的差異(z--．3．485P=0．000，Z=．3．621P=0．000)，術(shù)后14d胡椒堿組分別與胡椒堿溶媒組和生理鹽水組之間比較有顯著性的差異(Z=．3．621P=0．000，Z
7、=．3．616P=0．ooo)。結(jié)論：胡椒堿具有促進(jìn)脊髓損傷大鼠運(yùn)動神經(jīng)功能恢復(fù)的藥理作用。第二部分胡椒堿促進(jìn)脊髓損傷大鼠運(yùn)動神經(jīng)功能恢復(fù)作用機(jī)理研究目的：探討胡椒堿促進(jìn)脊髓損傷大鼠運(yùn)動神經(jīng)功能恢復(fù)作用機(jī)理。方法：(1)動物來源與分組、大鼠脊髓損傷動物模型制作、給藥方式、大鼠脊髓神經(jīng)功能測定和數(shù)據(jù)統(tǒng)計同第一部分。于術(shù)后7d留取脊髓損傷部位標(biāo)本(同第一部分)。模型各組術(shù)后ld評分為0分則納入實(shí)驗(yàn)。術(shù)后7d脊髓組織和術(shù)后14d脊髓組織(第一部分留取)分別行HE染色以觀察脊髓損傷后的病理變化，原位末端標(biāo)記法(TLrNEL染色)檢測脊
8、髓神經(jīng)細(xì)胞凋亡變化，免疫組織化學(xué)染色法檢測caspase．3蛋白表達(dá)變化。結(jié)果：lHE染色觀察脊髓組織病理改變中文摘要假手術(shù)組脊髓組織完整，細(xì)胞排列整齊，未見明顯壞死及空洞。生理鹽水組、胡椒堿溶媒組和胡椒堿組中，術(shù)后7d各組均有不同程度的組織破壞，并有出血、水腫和空洞。胡椒堿
