淡紫擬青霉異核現(xiàn)象、遺傳多樣性與不同菌株對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)卵寄生率差異的比較分析

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1、河北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文第一章文獻(xiàn)綜述第一節(jié)淡紫擬青霉研究與應(yīng)用現(xiàn)狀淡紫擬青霉(Paecilomyceslilacinus(Thom．)Samson)屬于內(nèi)寄生性真菌，是一些植物寄生線蟲(chóng)的重要天敵。其菌株首先從秘魯?shù)母Y(jié)線蟲(chóng)的卵囊中分離得到。國(guó)際馬鈴薯中心昆蟲(chóng)系Jatala博士1979年首次報(bào)道，淡紫擬青霉能夠防治南方根結(jié)線蟲(chóng)(Me脅idogjmeincognita)和白色球孢囊線蟲(chóng)(Heteroderaschachii)。植物線蟲(chóng)對(duì)許多經(jīng)濟(jì)作物能造成嚴(yán)重的危害，它可導(dǎo)致作物大幅減產(chǎn)。對(duì)于植物線蟲(chóng)的防治，歷來(lái)以化學(xué)藥劑為主，而化學(xué)藥劑對(duì)環(huán)境污染嚴(yán)重，使用過(guò)程中對(duì)人

2、、畜也不安全，許多化學(xué)殺線劑已被禁用。近些年生物防治的研究為植物線蟲(chóng)的防治提供了一條安全、可靠的途徑。由于該菌可適應(yīng)不同的氣候條件，對(duì)線蟲(chóng)卵具有較高的寄生率，可以有效控制土壤線蟲(chóng)數(shù)量，明顯減少為害，已被廣泛用于生產(chǎn)實(shí)踐中。目前，世界五大洲近70個(gè)國(guó)家的線蟲(chóng)學(xué)家用它來(lái)防治根結(jié)線蟲(chóng)(Meloidigynesp．)、孢囊線蟲(chóng)(Heteroderasp．)等植物寄生線蟲(chóng)，并取得了較好的防效。菲律賓亞洲技術(shù)中心已將此菌商品化，以“Biocon”商品名稱出售這種真菌制劑。1．分類地位及寄主淡紫擬青霉(Paecilomyceslilacinus(Thom)Samson)屬半知菌

3、亞門(Deuteromycotina)、絲孢綱(Hyphomycetes)、絲孢目(Hyphomycetales)、叢梗孢科(Monilaceae)、擬青霉屬(Paecilomyces)。該屬由Bainier建立，主要特征是分生孢子梗呈瓶狀或近球形(瓶梗)，在菌絲端或短枝上輪生，分生孢子單孢鏈狀，該屬至今有近50個(gè)種被報(bào)道，皆為昆蟲(chóng)病原菌和線蟲(chóng)病原菌。種間主要以分生孢子、分生孢子梗及產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)的差異進(jìn)行區(qū)分(浦蟄龍等，1996)。淡紫擬青霉可以適應(yīng)不同的氣候條件，因此寄主范圍廣，能寄生與多種植物寄生線蟲(chóng)，如：根結(jié)線蟲(chóng)、孢囊線蟲(chóng)、腎形線蟲(chóng)(Rotylenchuluss

4、p．)等多種植物寄生線蟲(chóng)，也能寄生在一些昆蟲(chóng)如荔枝蝽象體內(nèi)，同時(shí)也是土壤分離物的常見(jiàn)菌種之一。2．生物學(xué)性狀淡紫擬青霉在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)、薩氏培養(yǎng)基(SDAY)、察氏培養(yǎng)基(Cz)上生長(zhǎng)良好。在PDA上25℃下14d直徑可達(dá)5—7cm，卷毛狀氣生菌絲形成氈狀菌落，起初為白色，產(chǎn)孢時(shí)變?yōu)槠咸丫萍t色，產(chǎn)孢量越多菌落顏色就越深。反面有時(shí)白色，但通常為淺紫色。經(jīng)過(guò)多次轉(zhuǎn)代培養(yǎng)后，菌落形態(tài)及顏色會(huì)稍微發(fā)生變化。分生孢予橢圓形至紡錘形，壁光滑至粗糙，透明無(wú)色，成團(tuán)時(shí)呈紫色。25--,4．01-1m寬，分生孢子梗從深埋的菌絲中伸出，400-600unl長(zhǎng)(如從氣

5、生菌絲中伸出，長(zhǎng)度為前者的1，2)，偶爾形成松散的聯(lián)絲體，高達(dá)2mm高。梗柄壁較厚，黃到紫色，壁粗糙，3~4um寬，孢梗上具有2-4個(gè)瓶頸狀的輪生分枝。瓶梗7．5～9．0×2．5～3．OuIrt，基部較寬，向上較細(xì)，形成一薄的獨(dú)特的頸，約1．0寬；分生孢子呈向二側(cè)分開(kāi)的鏈狀，有的纏在一起，分生孢子橢圓形至紡錘形，壁光滑至粗糙，透明無(wú)色，成團(tuán)時(shí)呈紫色，2．5～3．0×2．0～2．2um，無(wú)厚垣孢子。溫度、光照和pH是影響生長(zhǎng)發(fā)育的重要因子。淡紫擬青霉菌絲在15--30。C生長(zhǎng)良好，最佳生長(zhǎng)和產(chǎn)孢溫度為25--30．0。10．0和40"0不生長(zhǎng)。由于該菌是土壤習(xí)居菌，

6、所以在黑暗中生長(zhǎng)最佳，其次是黑暗和光亮交替，在光亮中也能生長(zhǎng)。pH3—1l均能生長(zhǎng)，菌絲生長(zhǎng)最佳pH6--9，產(chǎn)孢pH4--6，這樣地廣譜適宜溫度和pH范圍，使其在農(nóng)業(yè)土壤中成為有競(jìng)爭(zhēng)力地生物。在大米、小米、麥粒、麥麩等許多營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上均能良好生長(zhǎng)。在許多廉價(jià)材料如：切碎的睡蓮、馬鈴薯槳，甚至剩飯、西瓜皮、菠蘿皮等多種果皮制成的培養(yǎng)基上也能良好的生長(zhǎng)。用多種植物的葉片或幼嫩的莖作基質(zhì)培養(yǎng)該菌，均有很高的產(chǎn)孢量。這些都對(duì)該菌的大規(guī)?；a(chǎn)化有參考意義。3．致病機(jī)制淡紫擬青霉主要寄生于卵，也能侵染幼蟲(chóng)和雌蟲(chóng)，但是較少發(fā)生。對(duì)卵的侵染機(jī)制有兩種解釋：一是；Jatala(

7、1986)、華靜月(1989)認(rèn)為的淡紫擬青霉與線蟲(chóng)的孢囊或卵接觸后，在粘性基質(zhì)中生長(zhǎng)菌絲，并纏卷整個(gè)卵，菌絲末端變粗，由于外源性代謝和真菌幾丁質(zhì)酶的活動(dòng)結(jié)果，在卵殼中發(fā)生了一系列超微結(jié)構(gòu)變化，使卵殼表皮破裂，隨之真菌穿入而寄生于早期胚胎發(fā)育階段的卵，影響其正常發(fā)育。二是；肖炎農(nóng)(1998)一系列實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果證明的淡紫擬青霉所產(chǎn)生的幾丁質(zhì)酶能直接促進(jìn)根結(jié)線蟲(chóng)卵孵化，其孵化率與酶的濃度呈正相關(guān)，說(shuō)明該酶對(duì)根結(jié)線蟲(chóng)有一定的致死作用。對(duì)幼蟲(chóng)和雌蟲(chóng)侵染機(jī)制的解釋是：菌絲或孢子也附著于三齡、四齡幼蟲(chóng)及雌蟲(chóng)的體壁上，在其表面生長(zhǎng)發(fā)育，隨之穿透體壁進(jìn)入體內(nèi)，造成發(fā)育停止，代謝紊

8、亂(Rit