黃曲霉毒素b1膠體金免疫層析試紙條的研制

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1、揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文揚(yáng)州大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明和版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明：所呈交的學(xué)位論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)標(biāo)明引用的內(nèi)容外，論文不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果。對本文的研究做出貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，已在文中以明確方式標(biāo)明．本聲明的法律結(jié)果Fh本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：聲寄矢簽字日期：加少年期叼El學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)揚(yáng)州大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，

2、以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到‘中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。學(xué)位論文作者簽名：盧窨美簽字日期：咖年鏟月1日導(dǎo)師簽名：簽字日期：妒p年廠月7日盧守英：黃曲霉毒素Bl膠體金免疫層析試紙條的研制1黃曲霉毒素B1概述．i上—JL月lJ舌人類第一次認(rèn)識黃曲霉毒素危害是在20世紀(jì)60年代初，英國東南部地區(qū)一些農(nóng)場的10萬只火雞幼仔死于一種病因不明的疾病。病理分析為肝臟出血，腎臟腫脹，膽管上皮細(xì)胞異常增生。由于病因不明，被定為火雞X病。后經(jīng)研究證實(shí)，此病是由于火雞吃了含有霉變花生餅的飼料而引起，

3、由此才發(fā)現(xiàn)了黃曲霉毒素(Aflatoxins，AFT)t11。黃曲霉毒素是被公認(rèn)的環(huán)境污染物，主要由產(chǎn)毒的黃曲霉菌(Aspergillusflavus)與寄生曲霉菌(A．parasiticus)產(chǎn)生的一組自然發(fā)生的真菌代謝產(chǎn)物【zJ。AFT是目前化學(xué)致癌物中最強(qiáng)的一種致癌誘變劑，其毒性比氰化鉀強(qiáng)10倍，比砒霜強(qiáng)68倍；其致癌性比二甲基亞硝胺強(qiáng)75倍，比二甲基偶氮苯強(qiáng)900倍。AFT廣泛存在于花生、棉籽、玉米、小麥和稻米等農(nóng)產(chǎn)品中，給人們的身體健康和消費(fèi)安全帶來了極大的危害【31。1．1黃曲霉毒素理化性質(zhì)AFT及其衍生物有20多種，其中l(wèi)O余種的化學(xué)結(jié)構(gòu)已明確，從化學(xué)結(jié)構(gòu)上看，各種

4、黃曲霉毒素彼此十分相似，都是二氫呋喃氧雜萘鄰?fù)难苌?。根?jù)其在紫外光照射下所發(fā)出熒光顏色的不同，可分為兩大類：發(fā)藍(lán)紫色熒光的為B族毒素，如AFBl、AFB2；發(fā)綠色熒光的為G族，如AFGl、AFG2。M1和M2也是黃曲霉毒素家族中較為重要的成員，它們主要是由AFBl通過肝微粒體酶作用羥化而成，主要存在于動物的代謝產(chǎn)物中，如乳汁、尿液和排泄物【4】。此外還有B2a、G2a、P1，Q，H1，GM和毒醇等。已知毒性大小的黃曲霉毒素排列順序?yàn)椋篈FB1>AFM1>AFG1>AFB2>AFG2。其中AFB1的急性毒性最強(qiáng)，長期食入含有此類毒素的飼料可使動物發(fā)生肝癌等病變，也是目前發(fā)現(xiàn)的最

5、強(qiáng)致癌物【5】。各種AFT的分子量為312~346，熔點(diǎn)為268-269℃。AFT難溶于水、己烷、石油醚，在水中的最大溶解度只有10¨g／L，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、二甲基甲酰胺等有機(jī)溶劑。結(jié)晶的AFT非常穩(wěn)定，高溫(200℃)、紫外線照射都不能使之破壞t6

6、。AFT在酸性、中性溶液中非常穩(wěn)定。在pH9～10的堿性溶液中，能迅速分解產(chǎn)生鈉鹽，熒光也隨之消失。此反應(yīng)是可逆的，在酸性條件下又能形成帶熒光的揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文2AFBl。AFT的水溶液對光較敏感，加入30％的甘油，可使其穩(wěn)定性大為提高。1．2黃曲霉毒素B1的毒性機(jī)理AFBl在人類食物和動物飼料中非常常見，在非洲和

7、東南亞等一些地區(qū)，飲食AFBl污染是人類肝細(xì)胞癌(Hepatocellularcarc泌oma,HCC)最主要的危險(xiǎn)因素之一。流行病學(xué)資料顯示，凡是AFT污染嚴(yán)重的地區(qū)，也是肝癌的高發(fā)地區(qū)【7】。AFT主要侵害人和動物的肝臟，屬于肝毒類，同時(shí)又是細(xì)胞毒。AFT對動物的危害主要表現(xiàn)在：降低采食量，影響生長速度和生產(chǎn)能力；損害組織器官，尤其是肝損傷；抑制免疫機(jī)能；致癌和致畸【8】。動物個(gè)體對AFT的敏感性主要和動物的種類、年齡、性別和營養(yǎng)條件有關(guān)。人如果食用AFBl污染的食品后，可出現(xiàn)發(fā)熱、腹痛、嘔吐等臨床癥狀，嚴(yán)重者在2~3周內(nèi)出現(xiàn)肝脾腫大、肝區(qū)疼痛、下肢浮腫及肝功能異常等中毒性肝

8、病癥狀【9】。AFT進(jìn)入胃腸被吸收后，主要分布于肝臟，血液中分布極少，肌肉中幾乎檢測不到【l剛。AFBl在沒有經(jīng)過代謝活化之前的母體化合物是無致癌性的，因此AFBl被稱為前致癌物，必須通過體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化，形成活性中間體才具有致癌性【1¨。AFBl的代謝作用發(fā)生在肝臟。AFBl經(jīng)飲食攝入后，約有50％在十二指腸被吸收并主要分布在肝臟，未被吸收的AFBl通過糞便排出體外而不對機(jī)體造成損害。AFBl在體內(nèi)的代謝主要是通過I相酶細(xì)胞色素P450(CYP450)超家族成員作用后形成幾種親電