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1、溫州醫(yī)學院碩士學位論文羊棲菜多糖抗腫瘤活性的研究姓名：聶文建申請學位級別：碩士專業(yè)：臨床檢驗診斷學指導教師：呂建新；陳曉明2012-05-16畫溫州醫(yī)學院碩士學位論文羊棲菜多糖抗腫瘤活性的研究中文摘要目的癌癥是影響人類健康的重大疾病，目前臨床治療以西藥化療為主，但由于其毒副作用大，很難達到一個穩(wěn)定的療效。因此尋找安全有效的抗腫瘤藥物是當前亟待解決的難題。多糖由于其毒副作用小，并具有良好的抗腫瘤療效，正越來越受到人們的重視。羊棲菜多糖是天然海藻植物羊棲菜中提取的一種大分子多糖，據(jù)報道有抗腫瘤、抗氧化、增強機體免疫力等功效。本文
2、擬通過羊棲菜多糖作用于HepG2、A549及CNE三種腫瘤株細胞，從細胞水平及動物水平兩個途徑來探討羊棲菜多糖可能的抗腫瘤活性。為羊棲菜多糖抗腫瘤的臨床應用及相關保健用藥提供實驗依據(jù)，更為進～步研制、開發(fā)羊棲菜多糖藥物奠定了基礎。方法1、對人肝癌HepG2細胞水平的研究：將不同濃度羊棲菜多糖作用人肝癌HepG2體外培養(yǎng)細胞后，用CCK8法檢測細胞增殖抑制率，流式細胞檢測技術檢測細胞凋亡情況，RT．PCR檢測Bel一2、Bax基因表達量的變化。2、對人肺腺癌A549Balb／c裸鼠腫瘤模型的研究：30只雌性Balb／c裸鼠隨機
3、分為正常組(NC)與造模組(MM)，造模組采用左下肢腋窩皮下接種A549細胞懸液0．2ml(細胞濃度：1×107／m1)，正常組Balb／c裸鼠采用左下肢腋窩皮下接種同等劑量的不含細胞的基礎培養(yǎng)基。7天后造模組再隨機分為模型組(MC)、羊棲菜多糖給藥組(100mg／kg．d、200mg／kg．d)、陽性對照組(環(huán)磷酰胺10mg／kg．d)。給藥4周后處死裸鼠，摘取腫瘤塊及脾臟，留取血清、肝腎標本，無菌取脾淋巴細胞及腹腔巨噬細胞。計算移植瘤生長抑制率及脾指數(shù)，光鏡下觀察腫瘤塊的組織形態(tài)，MTT法檢測脾淋巴細胞體外增殖能力，采用
4、生化、ELISA方法檢測血清及腹腔巨噬細胞培養(yǎng)上清液IgM、TNF．0【、IL—l水平、肝腎組織SOD活力及MDA含量。3、對人鼻咽癌CNEBalb／c裸鼠腫瘤模型的研究：36只雄性Balb／c裸鼠隨機分為正常組(NC)與造模組(MM)，造模組采用左下肢腋窩皮下接種CNE細胞懸液0．2ml(細胞濃度：1×107／m1)，正常組Balb／c裸鼠采用左下肢腋窩皮下接種同等劑量的不含細胞的基礎培養(yǎng)基。7天后造模組再隨機分為模型組(MC)、羊棲菜多糖給藥組(50mg／l(g．d、100mg／kg．d、200mg／kg．d)、陽性對照
5、組(環(huán)磷酰胺10mg／kg．d)。圃溫州醫(yī)學院碩士學位論文給藥4周后處死裸鼠，摘取腫瘤塊及脾臟，留取血清，無菌取脾淋巴細胞及腹腔巨噬細胞。計算移植瘤生長抑制率及脾指數(shù)，光鏡下觀察腫瘤塊的組織形態(tài)，CCK8法檢測脾淋巴細胞體外增殖能力，采用生化、ELISA方法檢測血清及腹腔巨噬細胞培養(yǎng)上清液IgM、TNF一0c、IL一1、NO水平。結果1、羊棲菜多糖對HepG2細胞的體外增殖有明顯的抑制作用，具有劑量及時間依賴趨勢，并可誘導HepG2細胞凋亡，下調HepG2細胞Bcl一2mRNA表達并上調BaxmRNA表達。2、羊棲菜多糖能顯
6、著抑匍JA549及CNE抑制瘤在小鼠體內生長，病理切片顯示多糖給藥組A549及CNE細胞生長稀疏并存在大量壞死區(qū)域，給藥組脾指數(shù)明顯增大，脾淋巴細胞體外增殖能力顯著增強(p<0．01)，血清及M①培養(yǎng)上清液qbIgM、IL．1、TNF。a及NO水平較模型組有顯著增加(p7、；免疫調節(jié)固溫州醫(yī)學院碩士學位論文AntitumoractivityofpolysaccharidesfromsargassumfusifoFmeAbstractobjectivesCancerisaformidableproblemforpeople．Chemotherapyisoneofthemostfrequentlyusedtherapeuticmodalitiesforthetreatmentofcancer,butitdoesnotachieveasatisfactorytherapeuticresultifit
8、isemployedalone．Soitisthecurrentproblemthatlookingforsomesafeandeffectiveantitumordrugs．Polysaccharidesfromnaturalsourcesarefotmdtobeeffective，no
