羊棲菜褐藻糖膠的分離純化及其免疫活性的研究

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1、.■'■?-.V?—*研究生學(xué)號:2012102167:.康_學(xué)校代碼*leaQQ分類號《駔密級*無碩士學(xué)位論文.$:、、、鴨,'/々羊棲菜揭藻糖膠的分商純化…及其免疫活性的研究.'Sr'-.、PurificationandImmiinoiogiciilactivitiesofl^ucoidansfromSargassumfusiformeVWWB-'作者:康磔峰:唸糧麵師:娜教授一.一學(xué)科專業(yè):生轜化學(xué)與分子生轆學(xué)研究方向:糧復(fù)食物的結(jié)構(gòu)與功能■丨學(xué)位類型.:學(xué)歷領(lǐng)士f.東此師范大學(xué)學(xué)位評定委員會y2015年

2、6月*■*?V^獨創(chuàng)性聲明木人鄭重聲明:所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨立進行研究工作所取得的成果。據(jù)我所知,除了特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本人的研究做出重要貢獻的個人和集體,均B在文中作了明確的說明。木聲明的法律結(jié)果山本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:學(xué)位論文使用授權(quán)書本學(xué)位論文作矜完全了解東北師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:東北師范大學(xué)有權(quán)保留并向國家存關(guān)部門或機構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電-f版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)東北師范人學(xué)可以將學(xué)位論

3、文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保#、匯編本學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作蕎簽名:

4、?年指導(dǎo)教師簽名:J/y4

5、>日.期:(’乃U期:J〇/'.^^學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向:I:作革位:_______________________________電話:_____通m地址:_______________________________郵編:_____學(xué)校代碼:10200研究生學(xué)號:2012102167分類號:Q5密級:無碩士學(xué)位論文羊棲菜褐藻

6、糖膠的分離純化及其免疫活性的研究PurificationandImmunologicalactivitiesofFucoidansfromSargassumfusiforme作者:康彩峰指導(dǎo)教師:吳明江教授學(xué)科專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向:糖復(fù)合物的結(jié)構(gòu)與功能學(xué)位類型:學(xué)歷碩士東北師范大學(xué)學(xué)位評定委員會2015年6月摘要褐藻糖膠是羊棲菜的重要活性成分之一,具有免疫調(diào)節(jié)等許多生物活性。由于褐藻糖膠分子組成復(fù)雜,極性接近,分子量分布范圍較寬,分離純化比較困難。目前對其系統(tǒng)的分級與活性篩選報道的不多,羊棲菜褐藻

7、糖膠免疫調(diào)節(jié)活性的分子機理還不清楚。為了解決這一問題,需對羊棲菜褐藻糖膠進行系統(tǒng)的分級純化及活性篩選工作。本文依次通過水提、醇沉及鹽析的方法從羊棲菜中分離出褐藻糖膠SFPF,利用DEAESepharaseCL-6B陰離子交換柱和SephacrylTMS-400凝膠色譜柱進行分級,得到SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3三個級分。為了了解SFPF、SFPF-1、SFPF-2、SFPF-3四個級分的基本理化性質(zhì),對其總糖含量、糖醛酸含量、蛋白質(zhì)含量、單糖組成、硫酸基團的含量和平均分子量的大小進行測定。通過研究不

8、同劑量的褐藻糖膠及其純化級分在體外細胞實驗(多糖濃度為10μg/ml、100μg/ml、1000μg/ml)和體內(nèi)灌胃實驗(多糖濃度為100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)對小鼠脾淋巴細胞增殖能力、NK細胞和腹腔巨噬細胞功能的影響,進而研究褐藻糖膠的免疫調(diào)節(jié)活性。對SFPF、SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3的基本理化性質(zhì)分析結(jié)果顯示,SFPF-2的總糖含量最高為81.8%,其次是SFPF-1為77.8%,SFPF和SFPF-3的總糖含量分別為65.4%和68.4%;SFPF-1的糖醛酸最

9、高,為17.0%,SFPF-3最低,為7.5%,SFPF和SFPF-2的糖醛酸含量分別為12.4%和14.7%;四種級分的蛋白含量分別為1.4%、1.6%、0.4%和0.3%;SFPF-3的硫酸根含量最高,為18.3%,其次是SFPF為9.3%,SFPF-1的硫酸根含量最低為2.9%,SFPF-2為5.6%;SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3分子量大小分別為4.4×104Da、2.4×104Da、6.0×104Da。四種級分的單糖組成主要由Man、Gal、xyl和Fuc組成,還有少量的GalA,其中四種主

10、要單糖的比例分別為SFPF:2.1:10.2:5.6:81.0;SFPF-1為1.3:4.6:8.0:82.5;SFPF-2為2.4:13.3:3.1:80.6;SFPF-3為1.0:10.0:2.2:84.1。體外細胞實驗的結(jié)果表明,SFPF、SFPF-1、SFPF-2和SFPF-3既能夠促進由ConA誘導(dǎo)的小鼠脾T淋巴細胞和LPS誘導(dǎo)的B淋巴細胞的增殖,也能夠作為分裂原誘導(dǎo)小鼠脾淋

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