wrky轉錄因子sidrw1和nac轉錄因子sisrn1在番茄抗性反應中的功能研究

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1、分類號:墜三2:!密級:玉單位代碼:!Q三三5學號:!Q墨!墨Q5墨洳≥:j▲嗜博士學位論文⑧WRKY轉錄因子SIDRWl和NAC轉錄因子SISRNl在番茄抗性反應中的功能研究提交日期2Q!壟生!且中國·杭州單位代碼:研究生學號:10816058WRKY轉錄因子SIDRWl和NAC轉錄因子SISRNl在番茄抗性反應中的功能研究論文答辯日期2012.3.10答辯委員會主席周雪堊數(shù)援一(姓名、職稱、單位)論文評閱人巫囪隆名遷閱一(姓名、職稱、單位)㈣卯燃一FunctionalanalysisoftomatoWRKYtranscri

2、ptionfactorSIDRWlandNACtranscriptionfactorSISRNlintheregulationofdefenseresponsebyLiuBoAdissertationsubmittedinpartialfulfillmentoftherequirementsforthedegreeofDoctorofPhilosophy1nPlantPathologyatZHEJIANGUNIVERSITYSupervisor:Prof.SongFengmin。gHangzhou,Zhejiang310058

3、People’SRepublicofChinaJanuary,2012III浙江大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中j再包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得逝姿盤堂或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名:簽字日期:年月日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解迸婆盤堂有權保留并向國家有關部門或機構送交本論

4、文的復印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權逝姿盤堂可以將學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索和傳播,可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名:導師簽名:簽字日期:年月日簽字日期:年月日致謝時光荏苒!轉眼學生生涯行將結束!回首博士生活,感慨頗多。這是個收獲的季節(jié),學習了知識,收獲了技能,增長了對生活的理解。有喜就有憂,實驗中難免會遇到挫折和疑惑,生活中難免會有迷茫和摩擦。幸好身邊有老師的指點,還有親朋好友的理解、支持和鼓勵。才能使我在消沉時及時重

5、拾信心,才能使我的實驗得以順利的完成,才能使我的最后幾年學生生涯增添許多美好的回憶。值此論文完成之際,向所有關心和幫助過我的人們表示由衷的感謝!首先,我要感謝恩師宋鳳鳴教授。本論文是在導師的指導和關懷下完成的,從選題立意、實驗方案到研究結果分析整理、論文修改以至最終定稿,都凝聚著導師無數(shù)的心血和智慧。特別是他對科研的熱愛,對工作的嚴謹,以及他樂觀的生活態(tài)度,都將對我以后的人生路產(chǎn)生莫大的影響。其次,感謝實驗室所有成員在科研上給我的指導和幫助,同時感謝他們在生活中的陪伴以及給予我的幫助、信任和包容。最后,特別感謝我的父母、妹妹以

6、及所有其他親朋。是他們的愛和理解,讓我在曲折的前進道路上無后顧之憂,樂觀前行!V劉波2012-1-9于紫金港摘要轉錄因子作為復雜的信號網(wǎng)絡中的成員,在調節(jié)植物應對來自周圍環(huán)境因子脅迫的過程中發(fā)揮著重要的作用。其中,WRKY,NAC等轉錄因子家族成員在植物生長發(fā)育和抗逆等過程中發(fā)揮著重要的調節(jié)功能。而目前關于這兩個轉錄因子家族的研究主要集中在水稻和擬南芥中,番茄等其他植物中的研究很少。本文從番茄中克隆了12個NAC和6個WRKY轉錄因子基因,并且主要利用病毒誘導的基因沉默(VIGS)等技術鑒定了它們在番茄抵抗病原菌以及非生物脅迫

7、過程中的作用,初步篩選出2個具有重要調節(jié)功能的基因SIDRWl(defense.relatedWRKY1)和SISRNl(stress.relatedNAC1)。實驗結果表明,WRKY轉錄因子S1DRWl在番茄與灰霉互作過程中是一個正調控因子。分析發(fā)現(xiàn),WRKY轉錄因子基因SIDRWl編碼一個由360個氨基酸組成的蛋白,根據(jù)推測其分子量大約為39.7kDa,等電點為8.13。而且,它在序列上與另外兩個番茄WRKY轉錄因子基因SIWRKYl和SlWRKY2分別具有99%和91%的相似度。進一步對SIDRWl和SIWRKYl的OR

8、F氨基酸序列比對分析發(fā)現(xiàn),這兩個基因為同一基因。通過實驗手段驗證了S1DRWl的轉錄激活活性,結果表明,它可能是一個轉錄抑制子。GFP融合蛋白分析顯示,該基因定位于細胞核內(nèi)。接種灰霉病菌后,SIDRWl在番茄葉片內(nèi)的表達在接種后24h(24hpi)突然升高,48hpi達到高峰

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