陰道白假絲酵母菌酶活性及影響因素的實(shí)驗(yàn)研究

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1、重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文陰道白假絲酵母菌酶活性及影響因素的實(shí)驗(yàn)研究姓名:宋琦申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師:熊正愛;劉朝暉201205陰道白假絲酵母菌酶活性及其影響因素的實(shí)驗(yàn)研究摘要外陰陰道假絲酵母菌病(vulvovaginalcandidiasis,VVC)是育齡期婦女常見的下生殖道感染性疾病,全球約75%的女性一生中曾患過至少一次VVC,40%-50%的女性經(jīng)治愈后會(huì)再次復(fù)發(fā),而其中5%_8%的患者可發(fā)展為復(fù)發(fā)性外陰陰道假絲酵母菌病(recurrentvulvovaginalcan

2、didiasis,RVVC)。因此,VVC成為困擾廣大女性、影響生殖健康的常見的陰道炎性疾病,所以對(duì)它的相關(guān)研究顯得尤為重要。VVC的主要條件致病菌為陰道白假絲酵母菌(Candidaalbicans,CA),它是人體的一種共生菌,具有二相性,可存在于人體的皮膚、粘膜、陰道、消化道和全身其他臟器中,在人體內(nèi)環(huán)境發(fā)生改變或免疫力低下時(shí)發(fā)生感染。陰道白假絲酵母菌的致病性與幾種毒力因子相關(guān),由于水解酶和菌絲形成與病原體的侵入以及宿主的組織損傷有關(guān),被認(rèn)為是最重要的毒力因子。目前,VVC的治療方式較為單一

3、,且由于耐藥菌株的出現(xiàn),VVC的發(fā)病率有逐漸增高的趨勢(shì),但其治療效果并不令人滿意。因此本實(shí)驗(yàn)針對(duì)陰道白假絲酵母菌的二相性與酶活性、酶活性與毒力的關(guān)系開展了研究,并探討外環(huán)境的變化對(duì)酶活性強(qiáng)弱的影響。通過研究,期望對(duì)白假絲酵母菌的致病機(jī)制有更深入的了解以及進(jìn)一一步提高對(duì)WC的認(rèn)識(shí)。研究分為以下兩個(gè)部分:第一部分陰道白假絲酵母菌酵母相與菌絲相酶活性和毒力的差異研究目的研究陰道白假絲酵母菌在酵母相和菌絲相時(shí)分泌型酸性蛋白酶和磷脂酶的酶活性的差異,探討酶活性與毒力的關(guān)系。材料與力、法收集白假絲酵母菌標(biāo)本

4、200株,分別用牛奶培養(yǎng)基和卵黃培養(yǎng)基法檢測(cè)其菌絲相和酵母相時(shí)分泌型酸性蛋白酶和磷脂酶的酶活性。并從中挑選24株分別用其菌絲相和酵母相感染血管內(nèi)皮細(xì)胞,再以MTT比色法計(jì)算菌絲相和酵母相的細(xì)胞毒力。結(jié)果酵母相和菌絲相分泌型酸性蛋白酶的活力(PA值)分別為O.681:士-0.105和O.641+0.096;磷脂酶的活力(PZ值)分別為0.621+0.113和O.558+0.102,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p

5、.毒力Pearson系數(shù)分別為.0.485和.0.629,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p

6、時(shí)分泌型酸性蛋白酶和磷脂酶酶活性的改變;研究在不同乳桿菌濃度的環(huán)境下陰道白假絲酵母菌酵母相和菌絲相酶活性的變化。結(jié)果當(dāng)PH=4時(shí),白假絲酵母菌分泌型酸性蛋白酶和磷脂酶的酶活性最低,隨著PH值升高,酶活性隨之升高,至PH=7時(shí)酶活性降低。未添加乳桿菌組白假絲酵母菌的酶活性最高,逐漸添加乳桿菌濃度,酶活性隨之降低。結(jié)論P(yáng)H值影響白假絲酵母菌酶活性的改變,PH值越低,酶活性越低;隨著PH值的增加,白假絲酵母菌的酶活性亦升高,但升至一定PH值后,酶活性反而受到抑制,過酸或過堿的環(huán)境都會(huì)使其分泌的酶的活性

7、降低。乳桿菌對(duì)白假絲酵母菌的酶活性有抑制作用,且對(duì)菌絲相的抑制作用較酵母相更強(qiáng)。桿菌關(guān)鍵詞陰道白假絲酵母菌;二相性;酶活性;毒力;PH值;乳4THEENZYl咀CACTll川rI’YANDINFLUENTIALFACToRVulvovaginalcandidiasisisawidespreadandcommoninfectiousdiseaseinwomenofreproductiveage.Theinfectionaffects75%ofwomenatleastonceduringtheirl

8、ivesofwhich40%-50%willexperiencearecurrence,50/o-8%ofadultwomenhaverecurrentvulvovaginalcandidosis.Therefore,VVCbecomeacommonvaginalinflammatorydiseasewhichfemaleispersecutedbyitanditisharmfultoreproductivehealth.Soitisparticularlyimportanttomakeacor

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