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《何首烏內(nèi)生真菌的分離鑒定及發(fā)酵產(chǎn)物活性成分的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、云南中醫(yī)學院碩士學位論文何首烏內(nèi)生真菌的分離鑒定及發(fā)酵產(chǎn)物活性成分的研究姓名：胡冬雄申請學位級別：碩士專業(yè)：中藥學指導教師：趙榮華201205中文摘要何首烏內(nèi)生真菌的分離鑒定及發(fā)酵產(chǎn)物活性成分的研究摘要植物內(nèi)生真菌是指那些在其生活史的一定階段或全部階段生活于健康植物的各種組織和器官內(nèi)部的真菌。近年來中藥內(nèi)生真菌的研究已成為熱點之一，它不僅可以探索內(nèi)生茵與活性成分的關(guān)系，為中藥的道地性的形成提供科學依據(jù)，而且利用內(nèi)生菌產(chǎn)生代謂}產(chǎn)物解決中藥重要資源的短缺，進而利用工業(yè)化發(fā)酵以實現(xiàn)活性成分規(guī)模生產(chǎn)。本論文以中藥何首烏(P
2、olygonummultiflorumThunb．)為研究對象，對其新鮮根、莖、葉及干燥種子的內(nèi)生真菌進行了分離鑒定，并對分離純化后的內(nèi)生真菌進行了初步的化學研究?，F(xiàn)將本論文主要實驗內(nèi)容和結(jié)果總結(jié)如下：1．菌株分離純化從大理地區(qū)采集何首烏的新鮮根、莖、葉和干燥種子，進行內(nèi)生真菌的分離和純化，共獲得內(nèi)生真菌140株，其中從干燥種子中分離得到10株，并對這些菌株進行了傳代和保存。2．活性菌株篩選以從何首烏分離得到的140株內(nèi)生真菌為發(fā)酵菌株，進行液體發(fā)酵，應(yīng)用HPLC對這140株菌株發(fā)酵產(chǎn)物進行分析，發(fā)現(xiàn)菌株YZ3．58
3、04發(fā)酵產(chǎn)物中有大黃素甲醚；菌株YZ3．5818、YZ3．5837、YZ3．5844、YZ3．5857、YZ3．5777、YZ3．5793的發(fā)酵產(chǎn)物中有大黃素；菌株YZ3．5907發(fā)酵產(chǎn)物中有二苯乙烯苷。表明何首烏內(nèi)生真菌與二苯乙烯苷、大黃素及大黃素甲醚存在相關(guān)性。3．形態(tài)學鑒定3．1對何首烏根、莖、葉分離得到的內(nèi)生真菌菌株YZ3．5750～YZ3．5799、YZ3．5800～YZ3．5879進行初步的形態(tài)學鑒定，共鑒定出真菌90株，分屬3綱4目9科24屬，其中青霉屬(Penicilliumsp．)屬于優(yōu)勢屬。3．2
4、對產(chǎn)生活性成分的8株內(nèi)生真菌進行初步的形態(tài)學鑒定，基于形態(tài)特征的鑒定結(jié)果為：菌株YZ3．5804、YZ3．5837、YZ3．5793初步鑒定為青霉屬(Penicilliumsp．)；菌株YZ3．5818初步鑒定為擬青霉屬(Paecilomycessp．)；菌株YZ3．5844初步鑒定為毛霉屬(Mucorsp．)；菌株YZ3．5857初步鑒定為曲霉屬(Aspergillussp．)；菌株YZ3．5777初步鑒定為根霉屬(Rh忍opussp．)；YZ3．5907何首烏內(nèi)生真菌分離搽定及發(fā)酵產(chǎn)物活性成分的研究初步鑒定為葡萄
5、孢屬(Botrytissp．)。4．分子生物學鑒定對上述的140株內(nèi)生真菌進行分子生物學鑒定，提取純化真菌基因組，對ITS序列進行PCR擴增。測序結(jié)果與提交至ljGenBank數(shù)據(jù)庫中的真菌ITS序列進行比對，共鑒定出41株。如菌株YZ3．575l鑒定為毛殼屬球毛殼Chaetomiumglobosum；菌株YZ3．5784鑒定為MortierelIaelongate．；菌株YZ3．5789鑒定為曲霉屬黃曲霉AspergillusflavuJ。而菌株YZ3．57881j勺ITS序列經(jīng)過比對后與Mucorellipsoi
6、deus(GenBank：州882308．1)ITS序列的相似度為91％，可能為新種。關(guān)鍵詞：何首烏；液體發(fā)酵；形態(tài)鑒定；分子生物學鑒定。2英文摘要IsolationandIdentificationoftheEndophyticFungiinPolygonummultiflorumThunb．a(chǎn)ndstudyontheLiquidFermentationAbstractHuDongxiong(ScienceofChineseTraditionalMedicine)DirectedbyProfessorZhaoRon
7、ghuaPlantendophyticfungi，thatwholestageoracertainstageisexistedinthehealthyplantsvarioustissuesandinternalorgansplants．Inrecentlyyears，researchersfocusedOlltheendophyticfungioftraditionalChinesemedicine．Theresearchesnotonlyexploringtherelationshipofendophyticfu
8、ngiandtheactiveingredientsandprovidingscientificbasisfortheformationofgenuineness，butalsobreakingthroughtheshortageofthemedicineregenerationsbyindustrialfermentationofendoph
