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《nedd4-2clc-2泛素化信號(hào)通路在大鼠內(nèi)側(cè)顳葉癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)中圖分類號(hào)＆Z2UDC魚!Q碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q三三三密級(jí)公玨Nedd4．2／CIC．2泛素化信號(hào)通路在大鼠內(nèi)側(cè)顳葉癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用TheeffectofNedd4--2／CIC--2ubiquitinsignalpathwayinthepathogenesisofmedialtemporallobeepilepsyrats作者姓名：學(xué)科專業(yè)：研究方向：學(xué)院(系、所)：指導(dǎo)教師：楊萍臨床醫(yī)學(xué)兒科學(xué)中南大學(xué)湘雅醫(yī)院黃榕教授答辯委員會(huì)主席塑芝卜中南大學(xué)2014年5月萬方數(shù)據(jù)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明【IIIIIIIIIlllllllIIIIIIlllY2686861本
2、人鄭重聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對(duì)本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。作者簽名：—塑恥嗍：盟年』月耳目學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者和指導(dǎo)教師完全了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定：即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版；本人允許本學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)
3、?？梢詫⒈緦W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密論文待解密后適應(yīng)本聲明。作者簽名：年醐：世年』月卑日鼻，導(dǎo)師簽名絲日期：趔2年且丑日萬方數(shù)據(jù)本研究受以下項(xiàng)目資助國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目：Nedd4．2／C1C．2泛素化信號(hào)通路在內(nèi)側(cè)顳葉癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用。編號(hào)：81100846萬方數(shù)據(jù)Nedd4．2／CIC-2泛素化信號(hào)通路在大鼠內(nèi)側(cè)顳葉癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用摘要目的：研究?jī)?nèi)側(cè)顳葉癲癇(mesialtemporallobeepilepsy,mTLE)大鼠模型以及阻斷泛素一蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin-
4、proteasomesystem，ups)后各個(gè)時(shí)期海馬組織的病理學(xué)改變，分析泛素(Ubiquitin，Ub)、Nedd4—2、C1C一2的表達(dá)變化，探討Nedd4．2／CIC．2泛素化信號(hào)通路在mTLE發(fā)病機(jī)制中的作用。方法：25日齡SD大鼠75只(清潔級(jí))，隨機(jī)分為3組，對(duì)照組、模型組、MG．132(蛋白酶體抑SRJ完：U)預(yù)處理組。模型組及預(yù)處理組大鼠分別予以相應(yīng)藥物(匹羅卡品、氯化鋰、MG一132等)腹腔注射進(jìn)行造模，誘導(dǎo)出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)(Statusepilepticus，SE)，對(duì)照組用等量生理鹽水代替。造模成功后，根據(jù)SE后獲取標(biāo)本的時(shí)間不同將各組分別隨機(jī)分
5、為3個(gè)亞組，即急性期組、潛伏期組、慢性期組。(1)對(duì)照組、模型組的各亞組：應(yīng)用免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation，Co-Ip)技術(shù)、免疫熒光雙標(biāo)結(jié)合激光共聚焦技術(shù)分析大鼠海馬中Ub與Nedd4．2是否存在相關(guān)性；(2)對(duì)照組、模型組、MG．132預(yù)處理組的各亞組：對(duì)各組大鼠模型進(jìn)行行為學(xué)觀察；對(duì)各組大鼠腦組織切片行HE染色、尼氏染色，觀察各組神經(jīng)元的丟失，Timm染色觀察苔蘚纖維出芽(Mossfibersprouting，MFS)；采用Westernblot技術(shù)檢測(cè)各組大鼠海馬中Ub、Nedd4—2、C1C．2的表達(dá)水平。結(jié)果：對(duì)照組大鼠行為學(xué)及組織
6、病理學(xué)均無改變。氯化鋰一匹羅1T萬方數(shù)據(jù)卡品腹腔注射造模成功率為90．O％，死亡率為24．1％，有73．7％的大鼠在8周后出現(xiàn)慢性自發(fā)發(fā)作。模型組大鼠海馬神經(jīng)元丟失明顯，可見MFS，MG．132預(yù)處理組病理改變較模型組更為明顯，兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。Co．IP及免疫熒光雙標(biāo)結(jié)合激光共聚焦技術(shù)證明Ub與Nedd4．2是有相互關(guān)系的蛋白。Westernbolt檢測(cè)模型組和MG．132預(yù)處理組Ub、Nedd4．2、CIC．2表達(dá)均存在變化。Ub結(jié)果：模型組與對(duì)照組比較表達(dá)無明顯變化；MG．132預(yù)處理組與對(duì)照組及模型組比較，急性期及潛伏期中表達(dá)上升，慢性期
7、中表達(dá)下降愀0．05)；Nedd4．2結(jié)果：模型組與對(duì)照組比較，急性期及潛伏期中表達(dá)下降，慢性期中表達(dá)上升(P<0．05)；MG．132預(yù)處理與對(duì)照組比較，三個(gè)時(shí)期表達(dá)均下降(P<0．05)，與模型組比較，在急性期、慢性期表達(dá)下降，潛伏期表達(dá)上升(P<0．05)；CIC。2結(jié)果：模型組和對(duì)照組的比較與Nedd4．2一致；MG．132預(yù)處理組與對(duì)照組比較，在急性期及慢性期表達(dá)降低，在潛伏期升高(P<0．05)，與模型組的比較與Ub相同。結(jié)論：(1)在正常及mTLE大鼠模型的海馬中均存在Ub介導(dǎo)的信號(hào)通路，Nedd4．2是這一途徑
