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《opn在脈絡膜新生血管生成中作用的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)答辯委員會主席:絲盔區(qū)晝答辯委員會成員:各逍量型鹽旦三遜區(qū)萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學碩士學位論文目錄中文摘要????????????????.2英文摘要????????????????.3前言?????????????????..6材料與方法???????????????.8結(jié)果?????????????????.14分析與討論???????????????.16,J、結(jié)?????????????????.20參考文獻????????????????21附錄?????????????????.24
2、致謝?????????????????.25綜述及參考文獻?????????????..27獨創(chuàng)性聲明??.??????.....?.?....38萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學碩士學位論文OPN在脈絡膜新生血管生成中作用的研究中文摘要背景與目的年齡相關性黃斑變性、眼組織胞漿菌病綜合癥、特發(fā)性脈絡膜新生血管等多種視網(wǎng)膜脈絡膜疾病的發(fā)生發(fā)展與脈絡膜新生血管(CNV)有關。新生血管從脈絡膜長出后突破Bmch膜后長入視網(wǎng)膜色素上皮下間隙或神經(jīng)上皮下,由于新生血管不成熟,易發(fā)生出血和滲漏等改變,繼而形成瘢痕,造成局部
3、損傷,這些損傷好發(fā)于黃斑區(qū),對中心視力影響較大,因此CNV是造成視力喪失的重要原因之一。脈絡膜新生血管的形成是一個復雜過程,其發(fā)生機制尚未闡明,受多種因素調(diào)控。目前己證實,CNV是由多種可以產(chǎn)生細胞因子的細胞組成,CNV的生成受細胞因子及細胞外基質(zhì)之間相互作用的調(diào)控。新近研究發(fā)現(xiàn),骨橋蛋白(osteopontin,OPN)作為細胞外基質(zhì)中的一種重要的粘附蛋白,可促進血管內(nèi)皮細胞增殖和內(nèi)皮細胞管狀生成,促進視網(wǎng)膜新生血管的形成,抗OPN抗體可顯著抑制VEGF誘導的新生血管管狀生成。已有學者證實內(nèi)源性O
4、PN在激光誘導的小鼠CNV形成過程中表達量增高,并猜測OPN在CNV的形成過程中發(fā)揮重要作用,但其具體機制尚不明確。本研究旨在探討OPN在激光誘導的小鼠CNV生成中的作用,為臨床防治CNV類疾病提供新的思路。材料和方法1.選SPF級C57BL/6J雄性小鼠40只,氬激光(532nm)視網(wǎng)膜光凝建立CNV模型。造模成功的小鼠36只,隨機分成3組,分別為A組、B組及C組。2.光凝后第2天,A組腹腔注射400pg抗OPN抗體,B組注射腹腔400肛g小鼠IgG,C組腹腔注射400¨gPBS。3.光凝后第7天
5、,各組分別做熒光素眼底造影(FFA)檢查。4.光凝后第14天摘除眼球,每組中隨機取4只行脈絡膜鞏膜鋪片熒光抗體染色及CNV面積定量分析。7.每組其余8只,分離脈絡膜后,采用熒光定量PCR檢測各組OPN及VEGF基因的表達。結(jié)果2萬方數(shù)據(jù)溫州醫(yī)科大學碩士學位論文1.光凝后第7天:FFA均顯示光凝處熒光素滲漏,提示建模成功。2.光凝后第14天:脈絡膜鋪片熒光抗體染色顯示,在激光光凝處可見綠色團狀強熒光影其形態(tài)如煙花爆破樣,定量分析各組CNV面積(均數(shù)±標準差),分別為A組(16.98_+0.70)Xi0
6、3“m2、B組(27.13_+0.81)×103心、C組(35.39±2.14)×103岬2,各組間差異均有統(tǒng)計學意義(F=533.76,P=0.000);3.光凝后第14天:RealTime-PCR檢測顯示,A組VEGF基因表達明顯降低(t一6.74,P=O.007<0.05),A、B兩組OPN基因表達無明顯差異(t=-5.26,P--O.658>0.05)。結(jié)論激光光凝可誘導小鼠CNV形成,本研究發(fā)現(xiàn)腹腔注射抗OPN抗體可從基因水平下調(diào)VEGF的表達,抑制CNV的形成。關鍵詞骨橋蛋白,抗體,激光
7、光凝,脈絡膜新生血管ResearchontheroleofOPNinchoroidalneovascularizationBackgroundandObjectiveAbstractChoroidalneovascularization(CNV)reflectinmanydiseasesofretinaandchoroidsuchasage.relatedmaculardegeneration(AMD),chorioretinitis,presumedocularhistoplasmosissynd
8、rome(POHS),andSOon.NewlyformedvesselsgeneratedfromthechoriocapillarisinfiltratethroughBruch’Smembrane,growthroughretinalpigmentepitheliumorneurepithelium.Thesevesselsareimmature,fragileandleaky,leadingtotheformofscar,whichcauseregioninj