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《豬圓環(huán)病毒pcr檢測方法的優(yōu)化》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、第21卷4期中國病毒學(xué)21（4）：405-4072006年7月VIROLOGICASINICAJuly2006豬圓環(huán)病毒PCR檢測方法的優(yōu)化1,22**2122董志強(qiáng)，張志，李曉成，陳德坤，張燕霞，黃保續(xù)（1.西北農(nóng)林科技大學(xué),陜西楊凌712100；2.農(nóng)業(yè)部動(dòng)物檢疫所,山東青島266032）OptimizationofPCRfortheDetectionofPorcineCircovirus21,22**21DONGZhi-qiang，ZHANGZhi，LIXiao-cheng，CHENDe-kun，22ZHANGYan-xia，HUANGBao-xu(1.North-westSci-T
2、echUniversityofAgricultureandForestry，Yangling712100,China；2.NationalAnimalQuarantineInstituteofMinistryofAgriculture,Qingdao266032,China)Abstract：ThreepairsofprimersP1/P2,P3/P4andP5/P6ofporcinecircovirus2weredesignedandsynthesizedtocomparethesensitivityandspecializationtoamplifyproductsof404bp,64
3、7bpand1773-6-5bp.OptimumdilutionofPK15cellgenomeinfectedwithPCV2wasachievedwith10ng,10ngtoyieldfromthethreepairsofprimers.ItwasalsoconfirmedthatP1/P2were68.4%successfulindetectingPCV2in57swinesamplesfromtheprovinceofFujian,Theotherprimers,P3/P4,P5/P6,wereonly57.9%and8.7%successful,respectively.Wec
4、oncludethatp1/p2istheoptimumprimerpairforsurveyingincidentsofPCV2inpigs.Keywords：Porcinecircovirus;PCR;Detection;Optimization關(guān)鍵詞：圓環(huán)病毒；PCR；檢測方法；優(yōu)化中圖分類號：S852.65文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1003-5125(2006)04-0405-03豬圓環(huán)病毒(Porcinecircovirus，PCV)為無囊為此，國內(nèi)外開展了大量相關(guān)研究，建立了病膜的單股負(fù)鏈DNA病毒，是目前發(fā)現(xiàn)的最小的動(dòng)毒分離、免疫熒光法、ELISA方法、免疫組化法[1]物病毒，
5、大小約為17nm。PCV根據(jù)抗原性及基等方法，以及多種檢測PCV2的PCR方法，如競爭[4~10]因組的不同可以分為PCV1和PCV2兩種基因型，PCR、套式PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR等。與傳統(tǒng)PCV1分離自豬腎細(xì)胞系PK15，它不致病，能夠方法相比，PCR具有較高的敏感性和特異性。在這在PK15中穩(wěn)定存在而不形成細(xì)胞病變；PCV2對些PCR方法中，普通的PCR方法仍然是最常見和豬有致病性，可引起豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征最普遍運(yùn)用的診斷方法。然而，由于不同的引物之(PMWS)、豬皮炎與腎病綜合征(PDNS)、斷奶豬和間差別較大，使得PCR方法的特異性和敏感性各不育肥豬的呼吸道疾病、豬的繁殖障礙
6、等疾病。近年相同，因此用于診斷時(shí)往往容易出現(xiàn)假陰性的結(jié)來已成為嚴(yán)重危害我國養(yǎng)豬業(yè)的主要疾病之一。但果。本文針對最常見的三種擴(kuò)增PCV2的引物區(qū)域迄今為止市場上還沒有商品化疫苗和特效藥物防設(shè)計(jì)和比較了3對引物的特異性和敏感性，優(yōu)化了治該病，并且該病有時(shí)呈亞臨床感染，所以做好該P(yáng)CV2的PCR診斷方法，這將有助于我國豬群病的診斷顯得尤為重要。PCV2疫情的監(jiān)測，也能為控制該病的傳播提供技PCV1基因組全長1759bp，PCV2基因組全術(shù)支持。[2，3]長1767bp或1768bp。序列比較表明PCV1與1材料和方法PCV2之間的核酸同源性只有68％，而不同PCV2[3]毒株之間的同源性均為96
7、％以上。由于PCV1和1.1實(shí)驗(yàn)材料PCV2均不產(chǎn)生細(xì)胞病變，因此迫切需要建立一種試驗(yàn)所用的樣品來自福建省57個(gè)豬場發(fā)病豬的肺既敏感又特異的檢測PCV2的方法。臟和淋巴結(jié)。EcoliDH5α由本實(shí)驗(yàn)室保存，DNAZol收稿日期：2005-11-19修回日期：2006-02-16作者簡介：董志強(qiáng)（1980-），男，碩士研究生，研究方向?yàn)榉肿硬≡瓕W(xué)與免疫學(xué)。**通訊作者.Correspondinganthor.Tel:053
