骨髓間充質(zhì)干細胞向成牙本質(zhì)樣細胞分化的體外實驗研究

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1、·192·牙體牙髓牙周病學(xué)雜志(ChinJConservDent)2010,20(4)骨髓間充質(zhì)干細胞向成牙本質(zhì)樣細胞分化的體外實驗研究董金山,段晴月,文軍,金超威,郝靖惠,陸群(1.第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院牙體牙髓科,陜西西安710032;2.廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院口腔科,廣東廣州510010)[摘要]目的:觀察骨髓間充質(zhì)干細胞向成牙本質(zhì)樣細胞分化的能力。方法:分離培養(yǎng)sD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞、胎鼠牙胚細胞,制備牙胚細胞條件培養(yǎng)液;用牙胚細胞條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)sD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞7d,通過免疫熒光染色和RT—PCR方法,觀測其表達成牙本質(zhì)細胞特異性標(biāo)志物一牙本質(zhì)涎蛋

2、白(DSP)、牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP一1)的情況,明確骨髓間充質(zhì)干細胞能否向成牙本質(zhì)樣細胞分化。結(jié)果:大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞在誘導(dǎo)體系中生長狀態(tài)良好。培養(yǎng)7d后,部分細胞抗牙本質(zhì)涎蛋白(DSP)、抗牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP一1)免疫熒光染色呈陽性;RT—PCR顯示mRNA水平表達牙本質(zhì)涎磷蛋白(DSPP)和牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白(DMP一1)。結(jié)論:大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞在牙胚細胞條件培養(yǎng)液的誘導(dǎo)下可以分化為成牙本質(zhì)樣細胞。[關(guān)鍵詞]骨髓間充質(zhì)干細胞;牙胚細胞條件培養(yǎng)液;成牙本質(zhì)樣細胞[中圖分類號]R780.2[文獻標(biāo)識碼]A[文章編號]1005—2593f2010)o4

3、—0192一o4[牙體牙髓牙周病學(xué)雜志,2010,20(4):192]/nvitrostudyontheodontogenicdiferentiationpotentialityofbonemarrowmesenchymalstemcellsDONGJin—shan,DUANQing—yue,WENJun,JINChao-wei,HAOJing-hui,LUQua(SchoolofStomatology,TheFourthMilitaryMedicalUniversity,Xian710032,China)[Abstract]AIM:Toexplorethepo

4、ssibilityofbonemarrowmesenehymalstemceils(BMSCs)diferentia-tingintoodontoblast-likeceils.METHODS:BMSCswereisolatedfromtwo-weekSprague—Dawleyratsandculturedintoothgermcellsconditionedmedium(TGC-CM).After7dinduction,expressionofdentinsialoprotein(DSP)anddentinmatrixproteinl(DMP1),andsp

5、ecificmarkersofodontoblasts,wereobservedbyimmunofluoreseeneestainingandRT-PCR.RESULTS:After7daysinductioninTGC-CM,positivestainingofDSPandDMP一1weredetectedinBMSCsbyimmunofluorescencestaining.RT—PCRdemonstratedmRNAexpressionofdentinsialophosphoprotein(DSPP)andDMP一1byBMSCs.CONCLUSION:R

6、atBMSCsinducedbyTGC—CMcoulddifferentiateintoodonto-blast—likecells.[Kwords]toothgermcellconditionedmedium;boneITIalTowmes~ncbymalstemcells;odontogeniediferentiation[ChineseJournalofConservativeDentistry,2010,20(4):192]多種口腔、全身性疾病均能導(dǎo)致牙齒的缺失,因此,長期以來人們不斷致力于尋找一種良好的牙而目前對牙列缺損的治療仍以義齒和種植為主。齒替代

7、修復(fù)手段。進入21世紀后,隨著生物醫(yī)學(xué)由于這些傳統(tǒng)治療方法多以損傷鄰近組織為基礎(chǔ),的發(fā)展,以干細胞為基礎(chǔ)的牙齒再生治療作為一門有別于傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的全新治療手段越來越受到了人收稿日期:2009—12—04;修回日期:2010—03—10們的重視。在牙齒再生研究領(lǐng)域中,種子細胞是其基金項目:國家自然科學(xué)基金資助項目(30870636)重要組成部分,主要分為牙源性干細胞和非牙源性作者簡介:董金山(1985一),男,吉林人。碩士生(導(dǎo)師:陸群)干細胞。牙源性干細胞具有良好的成牙潛能,但因通訊作者:陸群,副教授,碩士生導(dǎo)師。Tel:029—84776078其獲取困難,一定程度

8、上限制了應(yīng)用,因此研究非

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