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《mirna214促進胃癌sgc7901ddp細胞對順鉑耐藥及相關(guān)機制的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、原創(chuàng)性聲明本人聲明,所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了論文中特另tlDn以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得中南大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均己在論文中作了明確的說明。儲虢啦日期:垃年且墮日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定,即:學校有權(quán)保留學位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學位論文,允許學位論文被查閱和借閱;學校可以公布學位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用復印、縮印或其它手段保存學位論文。同時授權(quán)中國科學技
2、術(shù)信息研究所將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》,并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務。作者簽名:熊導師簽名三唑口期:圣型L年』月墮日碩士學位論文中文摘要miRNA.214促進胃癌SGC7901/DDP細胞對順鉑耐藥及相關(guān)機制的研究摘要背景:胃癌是消化系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,化療是改善進展期胃癌及胃癌術(shù)后患者生存時間及生活質(zhì)量的基本治療手段,但化療耐藥限制了化療藥物的有效使用,90%的轉(zhuǎn)移性腫瘤患者治療失敗是由化療耐藥引起。有關(guān)化療耐藥的相關(guān)機制尚未完全闡明,可能與以下因素有關(guān):ABC型膜載體蛋白表達量的升高;p53基因的突變;細胞凋亡通路受阻和DNA損傷修復系統(tǒng)的失調(diào)等。順鉑是
3、一種高效廣譜的周期非特異性抗癌藥物,其全稱為順式二氯二氨合鉑II(cis.dichlorodiamminoplatinumII),目前仍是胃腸道腫瘤化療一線藥物,抗腫瘤作用強,但胃癌對順鉑化療耐藥制約了順鉑的有效使用。微小RNA(microRNA.miRNA)為一類K度是21.25nt的單鏈非編碼蛋白RNA,研究發(fā)現(xiàn),其與腫瘤耐藥關(guān)系密切,并影響腫瘤的化療效果。miRNA一214位于人的1號染色體的長臂(1q24.3)Dnm3基因內(nèi),本課題組前期研究表明miRNA.214與細胞的生長和增殖有關(guān),并能促進胃癌細胞的侵襲、遷移能力。至今為II:,有關(guān)miRNA一214與順鉑耐藥方面的研究僅
4、限于卵巢癌。本實驗首次研究miRNA一214促進胃癌SGC7901/DDP細胞對順鉑的耐藥及相關(guān)機制。目的:探討miRNA一214在促進胃癌細胞SGC7901/DDP對順鉑耐藥中的作用及其機制,尋找新的分子治療靶標,指導臨床用藥。方法:II碩士學位論文中文摘要1、通過熒光定量PCR檢測親本細胞系SGC7901和耐藥細胞系SGC7901/DDP中miRNA.214的表達差異;2、通過轉(zhuǎn)染miR一214inhibitors下調(diào)耐藥細胞系SGC7901/DDP中miR一214的表達量,以無關(guān)序列轉(zhuǎn)染組(NC組)作為陰性對照,同時以空白轉(zhuǎn)染組(CON組)作為空白對照,轉(zhuǎn)染24h后通過熒光顯微鏡
5、觀察瞬時轉(zhuǎn)染效率;3、檢測耐藥細胞系SGC7901/DDP細胞瞬時轉(zhuǎn)染miRNA.214抑制劑(miRNA一214inhibitors)后miRNA.214表達量的改變;4、MTT檢測轉(zhuǎn)染miRNA一214抑制劑(miIⅢA一214inhibitors)后SGC7901/DDP細胞對DDP藥物敏感度的變化;5、Westernblot檢測miR.214inhibitors轉(zhuǎn)染組、無關(guān)序列轉(zhuǎn)染組(NC組)、空白轉(zhuǎn)染組(CON組)分別轉(zhuǎn)染miRNA一214抑制劑及無關(guān)序列后對靶基因PTEN蛋白表達量的影響。結(jié)果:1、熒光定量PCR檢測miRNA一214的含量:與親本細胞株SGC7901相比,
6、miRNA.214在耐藥細胞株SGC7901/DDP中呈顯著高表達(P<0.01),是親本細胞株SGC7901中表達量的2.320=k0.106倍,即與親本細胞株SGC7901相比,miRNA.214在對JII賊I(DDP)耐藥的人胃癌細胞株SGC7901/DDP中呈顯著高表達;2、瞬時轉(zhuǎn)染24h后,于熒光顯微鏡下觀察計數(shù)檢測轉(zhuǎn)染效率,miR一214inhibitors轉(zhuǎn)染人胃癌SGC7901/DDP細胞,轉(zhuǎn)染效率約80%;3、轉(zhuǎn)染后SGC7901/DDP細胞中的miRNA一214含量變化:以空白轉(zhuǎn)染組(control組)表達量為基準,miRNA.214inhibitors轉(zhuǎn)染組miR
7、NA一214水平是control組的0.187+0.03l倍,無關(guān)序列轉(zhuǎn)染組miRNA.214水平是control組的0.869士0,025倍(P<0.05),H口將III碩士學位論文中文摘要miRNA.214的抑制片段轉(zhuǎn)染到SGC7901/DDP中后miRNA一214表達量顯著降低;4、MTT試驗結(jié)果顯示,miRNA.214inhibitors轉(zhuǎn)染組DDP對細胞生長的抑制率明顯高于陰性對照片段轉(zhuǎn)染組的抑制率。miRNA一214inhibito