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《阿霉素腎病大鼠足細(xì)胞nephrin與podocalyxin蛋白表達(dá)與潑尼松干預(yù)的實(shí)驗(yàn)分析》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文．●上．-—L刖吾研究現(xiàn)狀、成果小兒腎病綜合征(nephroticsyndrome，NS)是一組由多種原因引起的腎小球基底膜通透性增加，導(dǎo)致血漿內(nèi)大量蛋白質(zhì)從尿中丟失，臨床上以大量蛋白尿、低白蛋白血癥、高脂血癥和不同程度水腫為四大主要特點(diǎn)的綜合征f¨。NS按病因可分為原發(fā)性、繼發(fā)性和先天性三種類型，而原發(fā)性腎病綜合征(primary-nephroticsyndrome，PNS)約占小兒時期NS總數(shù)的90％，是兒童時期常見的腎小球疾病。國外文獻(xiàn)報道兒童PNS年發(fā)病率約為7～16／10萬【2,3】
2、。我國調(diào)查資料結(jié)果顯示，NS約占同期住院泌尿系疾病患兒的21％～31％[訓(xùn)。臨床上，大多數(shù)NS忠,JL腎臟病理表現(xiàn)為微小病變型(minimalchangedisease，MCD)，其中大于90％自4J患兒對糖皮質(zhì)激素治療敏感，然而在彌漫性系膜增生(diffusemesangialproliferation，DMP)、局灶節(jié)段性腎小球硬化(focalse。m-nentalglomerulosclerosis，F(xiàn)SGS)患兒中卻分別只有50％、30％對激素治療敏感[引。由此可見，腎病綜合征不僅是兒童泌尿系疾病中發(fā)病率較高
3、的一種疾病，而且頻反復(fù)、頻復(fù)發(fā)、激素耐藥仍是臨床治療中棘手的19題，但是其病因及發(fā)病機(jī)制目前尚不十分明確，所以研究小)I,NS的病因及發(fā)病機(jī)制一直是兒科腎臟病研究者的首要任務(wù)。自1998年以來，學(xué)者們就已經(jīng)意識到足細(xì)胞分子女[1nephrin、CD2AP、podocin、旺一actinin一4等是NS發(fā)生蛋白尿的關(guān)鍵蛋白．之后，隨著分子病理、分子生物學(xué)等技術(shù)的飛速發(fā)展與曰益完善，人們又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了許多由足細(xì)胞表達(dá)的蛋白分子，即足細(xì)胞相關(guān)分子，并成為目前研究NS白'9熱點(diǎn)之一。尤其最近幾年足細(xì)胞及足細(xì)胞裂孔隔膜相關(guān)蛋白在
4、蛋白尿發(fā)病機(jī)制中的作用備受關(guān)注。在正常生理情況下，腎小球?yàn)V過屏障具有分子屏障及電荷屏障作用。腎小球?yàn)V過屏障分三層，內(nèi)層為帶窗孑i的毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，中層為基底膜(glomerularbasementmembrane，GBM)，外層為上皮細(xì)胞足突(footprocess，F(xiàn)P)之間的裂孔隔膜(slitdiaphragm，SD)(見圖1)，其中足細(xì)胞足突t旬的裂孔隔膜是腎小球?yàn)V過屏障中最重要的組成部分【6]。蛋白尿是腎小球?yàn)V過屏障受損的標(biāo)志。已有研究證實(shí)I，J，白蛋白濾出的最后屏障是腎小球足細(xì)胞足突間SD，所以腎小球?yàn)V過
5、屏障中足細(xì)胞SD結(jié)構(gòu)和功能的完整性對腎小球的濾過功能的正常維持發(fā)天津醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文揮著重要的作用。而足細(xì)胞是高度分化、增生能力有限的細(xì)胞[8]，所以極容易受損，而且受損后很難通過增生來修復(fù)，所以研究足細(xì)胞損傷及保護(hù)機(jī)制將會有一定的意義。近年來發(fā)現(xiàn)足細(xì)胞分子如nephrin、CD2*g關(guān)蛋白fCD2APl、podocin、NEPHl矛Dpodocalyxin等參與了蛋白尿的發(fā)生與發(fā)展【9‘6j，因此本研究期待從足細(xì)胞蛋白水平的角度對NS發(fā)病機(jī)制進(jìn)行探討，從而進(jìn)一步指導(dǎo)臨床治療。Nephrin是足細(xì)胞裂孔隔膜上發(fā)現(xiàn)
6、的第1種似黏附分子的跨膜蛋白，屬于免疫球蛋白超家族。腎臟nephrin足細(xì)胞合成，特異性表達(dá)于SD，為一跨膜蛋白，由位于染色體19q13．1上的NPHSl基因編碼。研究提示nephrin缺陷是發(fā)生蛋白尿和足突融合的原因之一[10】。管娜等[11]對25例腎病綜合征患兒的檢測表明neDhrin的表達(dá)量雖無改變，但其分布出現(xiàn)了變化?？傊?，nephrin分布及表達(dá)的異常己被證實(shí)與多種先天性及獲得性蛋白尿相關(guān)，其正常表達(dá)對維護(hù)足細(xì)胞功能結(jié)構(gòu)的完整性及對維持裂孔隔膜結(jié)構(gòu)和功能起著重要作用。PodocNyxin(PCX)是腎小球
7、主要帶負(fù)電荷的蛋白分子，是組成GBM電荷屏障的主要物質(zhì)，由腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和足細(xì)胞合成，在足細(xì)胞成熟過程中固定于腎小球足細(xì)胞頂膜。Podocatyxin表面電荷具有抗黏附作用，可以防止帶負(fù)電荷的蛋白分子從裂孔隔膜漏入原尿中。它的減少或化學(xué)修飾可以導(dǎo)致濾過屏障的破壞．它對足突的穩(wěn)定性起著直接的作用。因此，本研究選用足細(xì)胞上表達(dá)fl勺nephrin及podocalyxin蛋白作為反映NS時足細(xì)胞損傷的指標(biāo)，以期能夠更深入的探討足細(xì)胞損傷的機(jī)制。阿霉素腎病動物模型具有病理形態(tài)學(xué)改變與人類腎病綜合征類似的特點(diǎn)，所以被廣泛應(yīng)用于
8、人類腎臟病的研究中。阿霉素及其代謝產(chǎn)物可直接損傷足細(xì)胞或使足細(xì)胞代謝紊亂，造成足細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變、基底膜中陰離子位點(diǎn)的改變，從而使腎小球?yàn)V過膜的分子屏障和電荷屏障受損導(dǎo)致蛋白尿的發(fā)生[12]。也有文獻(xiàn)報道阿霉素及其代謝產(chǎn)物還可能從DNA水平直接干預(yù)足突細(xì)胞的蛋白合成，使足突細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生紊亂，造成足突細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變D3]。本研究根據(jù)文獻(xiàn)【J4J
