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《酶免法檢測丙肝病毒核心抗原在獻血者篩查中應用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、酶免法檢測丙肝病毒核心抗原在獻血者篩查中應用研究【摘要】目的：分析基層血站大規(guī)模篩查獻血者HCV感染采用ELISA方法聯(lián)合檢測抗HCV和HCVC抗原的可行性。方法：采用ELISA法檢測獻血者樣本抗HCV和HCVC抗原，結(jié)果：與HCVPCR法進行比較分析。結(jié)果：獻血者780份抗HCV初復檢陰性樣本中，HCVC抗原檢測結(jié)果均為陰性。56份抗HCV初復檢陽性樣本中，HCVC抗原檢測陽性16份，HCVPCR陽性17份；11份抗HCV初檢或復檢陽性樣本中，HCVC抗原檢測陽性1份，HCVPCR陽性1份；17份抗HCV初檢或復檢或初復檢結(jié)果灰區(qū)樣本中，HCVC抗原
2、檢測陽性3份，HCVPCR陽性4份。結(jié)論：ELISA法檢測HCVC抗原靈敏度及特異性均較高，適合基層血站開展對獻血者HCV大規(guī)模篩查，也適合基層醫(yī)院開展對患者輸血前HCV感染的檢測?！娟P鍵詞】丙型肝炎病毒；核心抗原；核酸檢測【中圖分類號】R446【文獻標識碼】A【文章編號】1004-7484(2013)03-0595-01丙型肝炎主要經(jīng)過血液傳播，是一種嚴重的經(jīng)血傳播疾病，目前沒有較好的預防和治療方法。我國是丙型肝炎感染大國，在一般人群中，丙型肝炎病毒感染率達3.2%。我國獻血法規(guī)定，對獻血者必須進行HCV檢測，目前多數(shù)血站篩查獻血者是否感染HCV采用
3、不同廠家試劑兩遍檢測抗-HCVo酶免疫法檢測抗-HCV窗口期長（大約70天），而HCV感染者在發(fā)病前12天即可具有傳染性［1］。酶免法檢測HCVC抗原可縮短HCV窗口期至15天［2］,是否適合獻血者大量篩查，我們對此進行了分析。1材料和方法1.1樣本從本血站2012年6月至12月無償獻血者中抽選酶免法抗-HCV初檢、復檢均陽性樣本56份，抗-HCV初檢、復檢均為陰性樣本780份，僅抗-HCV初檢或僅復檢陽性樣本11份，灰區(qū)樣本（初檢或復檢有一次灰區(qū)或初復檢均灰區(qū)，灰區(qū)二cutoffX0.8）17份，共計864份樣本。1.2試劑和儀器抗-HCV初檢試劑為
4、上?？迫A生物工程股份有限公司提供，批號201207041等；抗-HCV復檢試劑，英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供，批號2012065815等;HCVCAg檢測試劑，湖南康潤藥業(yè)有限公司提供，批號20121001；深圳愛康UranusAE200全自動酶標儀；美國ABI7300型基因擴增儀，試劑由深圳凱杰生物工程有限公司提供，批號20121101c1.3方法獻血者血清標本經(jīng)抗-HCVELISA試劑初、復檢后，將所需標本分裝并置-8（rc條件下存放，確保被檢標本僅凍融一次。864份樣本均檢測HCVC抗原。將抗-HCV初檢、復檢均陽性和僅初檢或復檢陽性及灰區(qū)血
5、清標本共84份樣本同時進行HCVC抗原和HCVRT-PCR檢測。具體操作方法和結(jié)果判斷，嚴格按照說明書要求進行，記錄檢測結(jié)果。2結(jié)果2.1780份抗-HCV初檢、復檢均合格的獻血者樣本中，ELISA檢測HCVC抗原結(jié)果均為陰性(780/780)。2.256份抗-HCV初檢、復檢均陽性的獻血者樣本中，HCVc抗原檢測陽性樣本16份，HCVPCR檢測陽性樣本17份。僅抗-HCV初檢或僅復檢陽性11份樣本中，HCVc抗原檢測陽性樣本1份，HCVPCR檢測陽性樣本1份?？?HCV檢測結(jié)果灰區(qū)樣本17份中，HCVc抗原檢測陽性樣本3份，HCVPCR檢測陽性樣本4
6、份。見附表1。檢測結(jié)果采用x2檢驗，P>0.05,84份樣本中HCVC抗原酶免疫法檢出陽性率與HCVPCR方法陽性檢出率無顯著性差別。兩種方法檢出陽性符合率達90%以上。3討論衛(wèi)生部發(fā)布的《血站技術(shù)操作規(guī)程》【2012］中明確要求，獻血者丙型肝炎病毒(HCV)感染標志物及其檢測方法有2種選擇，可任選其中1種：1)采用2個不同生產(chǎn)廠家的ELISA試劑檢測HCV抗體或聯(lián)合檢測HCV抗原和抗體；2)采用1種ELISA試劑檢測HCV抗體或聯(lián)合檢測HCV抗原和抗體，采用1種試劑檢測HCV核酸。大多數(shù)血站目前廣泛選用的檢測方法是采用2個不同生產(chǎn)廠家的ELISA試劑
7、檢測HCV抗體，抗HCV試劑因不同生產(chǎn)廠家所用抗原片段及抗原質(zhì)量不同，試劑的靈敏度和特異性存在一定差異，從而導致抗-HCV檢測結(jié)果的不一致。ELISA檢測抗-HCV窗口期長，可出現(xiàn)漏檢和假陽性情況［3］。應用PCR方法檢測HCV特異性強,靈敏度高，是HCV感染輔助確證技術(shù)之一，但該方法要求條件高，操作復雜，需具備較高的設備、設施及技術(shù)條件，檢測費用也高，易出現(xiàn)假陽性和假陰性，并不適合基層血站對獻血者大規(guī)模篩查。本實驗結(jié)果顯示與檢測抗HCV相比，ELISA方法檢測HCVC抗原具有較高的特異性(780/780)；對抗-HCV初檢和復檢均陽性、僅初檢或復檢陽
8、性、檢測結(jié)果灰區(qū)等84份血清標本，ELISA方法檢測HCVC抗原的檢測結(jié)果(20/84)與HC
