人工養(yǎng)殖菲牛蛭（poecilobdella manillensis lesson，1842）菌性疾病的研究

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1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文人工養(yǎng)殖菲牛蛭（PoecilobdellamanillensisLesson，1842）菌性疾病的研究姓名：李浩華申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：水生生物學(xué)指導(dǎo)教師：呂軍儀20070528人工養(yǎng)殖菲牛蛭(PoecilobdellamanillensisLesson，1842)細(xì)菌性疾病的研究專業(yè)：水生生物學(xué)碩士生：李浩華指導(dǎo)教師：呂軍儀摘要本文對菲牛蛭(Poecilobdellamanillensis)在工廠化養(yǎng)殖條件下發(fā)生疾病的病原菌的形態(tài)、生理生化特性、對多種藥物的敏感性、防治方

2、法以及病蛭組織的顯微病理變化進(jìn)行了研究。從患病的菲牛蛭腐爛處深層肌肉分離病原菌，得到6株優(yōu)勢菌，編號為0601、0602、0603、0604、0605、0606。通過對以上六株菌的菌落和菌體形態(tài)觀察、初步生理生化特征分析，菌株0601、0603、0605的形態(tài)特征一致，菌株0602、0604、0606的形態(tài)特征一致，取菌株0601、0602作為實(shí)驗(yàn)用菌。經(jīng)人工感染試驗(yàn)，0601號菌液濃度為108CFU／ml、107CFU／ml、106CFU／ml、105CnI／ml時(shí)的肌注感染死亡率分別為100

3、％、100％、60％、30*,6。0602號菌液濃度為108CFU／ml、107CFU／ml、106CFU／ml、105CFU／ml時(shí)的肌注感染死亡率分別為100％、80％、50％、30％。再次感染分離得到2株菌，編號為0607和0608，肌注感染感染發(fā)病率均為1000,6。且初次感染與再次感染菲牛蛭發(fā)病癥狀與自然發(fā)病癥狀基本一致。這兩株菌的理化特性指標(biāo)與自然發(fā)病的水蛭中分離到的菌株0601、0602一致。因此確定0601、0602號菌株為致病菌。通過對菌株的菌落和菌體形態(tài)觀察、生理生化特征以及

4、16SrRNA基因序列分析，結(jié)果表明0601號細(xì)菌為嗜水氣單胞菌(Aeromonashydrophila)，0602號細(xì)菌為奇異變形桿菌(Protuesmirabilis)。該病可由這兩種菌單獨(dú)或共同引發(fā)。藥物敏感和治療試驗(yàn)表明，兩株病原菌均對氨曲南、新霉素、環(huán)丙沙星等藥敏感。甩板藍(lán)根和三黃藥浴治療效果較好，治愈率可達(dá)800／'0左右。組織病理觀察表明，患部皮膚表皮角質(zhì)層潰爛、脫落；肌肉發(fā)生潰瘍、腐爛，肌纖維斷裂、溶解、壞死；唾液腺排列混亂，部分出現(xiàn)斷裂，表明這兩種病原菌均具有較強(qiáng)的毒力。關(guān)鍵詞

5、：菲牛蛭，奇異變形桿菌，嗜水氣單胞菌，16SrRNA，組織學(xué)StudiesonthebacterialDiseaseofleech(PoecilobdellamanillensisLesson，1842)Major：HydrobiologyNalne：LiHaohuaSupervisor：Pro．LvJunyiABSTRACTTIlisthesisdescribedthemorphological．physiologicalandbiochemicalcharacteristicsandsens

6、itivitytodrugsofpathogenicbacteriaofthediseaseinleeckSixstrainsnamed0601，0602，0603，0604，0605and0606wereisolatedfromtherottenmuscleoftheillleeehs．Accordingtotheanalyzingresultstothesesixstrainsinmorphological仃aits，physlologkalandbiochemicalreactions，0

7、601，0603，0605strainswereconfirmedthesamebacteriumand0602，0604，0606strainsweretheotherbacterium．Experimentsofartificialinfectiontestshadbeendoneandtheresultsshowedthat0601．0602strainscouldcausediseaseanddeathforleech．Therefore,0601，0602strainswereprov

8、edtobepathogenicbacteria．BasedOllthemorphologicaltraits,physiologicalandbiochemicalreactionsandmolecularidentification(16SrRNA)，0601stainwasidentifiedtobeAeromonashydrophila,and0602strainwasProtuesmirabilis．Bothofthe0601and0602strainshadbeendemonstra