高產(chǎn)油脂菌株選育及其油脂提取工藝研究

高產(chǎn)油脂菌株選育及其油脂提取工藝研究

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1、河南科技大學(xué)碩士學(xué)位論文高產(chǎn)油脂菌株選育及其油脂提取工藝研究姓名:王敏申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:李市場20091201摘要論文題目:高產(chǎn)油脂菌株選育及其油脂提取工藝研究專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究生:王敏指導(dǎo)教師:李市場摘要油脂既是構(gòu)成和維持生命活動的基本物質(zhì)之一,也是重要的工業(yè)原料,具有廣泛的應(yīng)用價值。目前油脂資源主要來源于動植物,隨著人們對微生物油脂研究的不斷深入,利用微生物發(fā)酵法獲得油脂,不但可以緩解動植物油脂資源緊缺的局面,而且產(chǎn)油微生物可以進行廢棄物的資源化再利用,為油脂資源的獲得提供了一條新的途

2、徑。本論文以粘紅酵母(Rhodotorulaglutinis)31596為研究對象,從培養(yǎng)基優(yōu)化、高產(chǎn)菌株的誘變、油脂提取工藝優(yōu)化等三個方面選育高產(chǎn)油脂菌株。主要研究工作如下:1.基礎(chǔ)產(chǎn)脂培養(yǎng)基的優(yōu)化在溫度28℃,初始pH5.8,接種量5%,250mL搖瓶娤液量40mL的培養(yǎng)條件下,確定粘紅酵母(Rhodotorulaglutinis)31596搖瓶發(fā)酵的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基成分(g/L):葡萄糖80,硫酸銨1.11,磷酸二氫鉀2.5,蛋白胨1.8;其生物量和油脂量分別達到了18.18±3.34g/L和32.06±1.91mg/g。2.高產(chǎn)油

3、脂菌株的誘變選育為了進一步提高其菌體生物量和菌體油脂量,以粘紅酵母(Rhodotorulaglutinis)31596為出發(fā)菌株,對其進行低能離子注入誘變和紫外誘變,經(jīng)過初篩、復(fù)篩,獲得一株油脂高產(chǎn)菌株VB19。該突變菌株搖瓶培養(yǎng)96h,生物量達21.63±1.14g/L,油脂量達42±1.78mg/g,分別比出發(fā)菌株提高19%和31%,連續(xù)傳代多次,其產(chǎn)量性狀無顯著變化。3.粘紅酵母油脂提取工藝的優(yōu)化通過研究酸熱法、超聲波法和酸熱耦合超聲波法對粘紅酵母Rhodotorulaglutinis微生物油脂提取的影響,結(jié)果顯示酸熱耦合超聲波法

4、效果最好。在酸熱耦合超聲波法提取油脂的過程中,通過Plackett-Burmen試驗設(shè)計,以P<0.05為準(zhǔn),篩選出酸處理時間(P=0.0360)、超聲處理時間(P=0.0105)、提取液配比(VCHCl3︰VCH3OH)(P=0.0105)三個對粘紅酵母Rhodotorulaglutinis油脂提取具有顯著影響的因素。在此基礎(chǔ)上,通過Box-Behnken試驗設(shè)計,對酸處理時間、超聲處理時I河南科技大學(xué)碩士學(xué)位論文間、提取液配比(VCHCl3︰VCH3OH)三個顯著因子進行響應(yīng)面優(yōu)化,得到最佳工藝參數(shù)為酸處理時間34min,超聲時間7

5、.5min,提取液配比(VCHCl3︰VCH3OH)1.9︰1。與原始工藝相比,濕菌油脂重量從42.67±1.43mg/g提高到57.33±2.4mg/g,提高了36.5%。關(guān)鍵詞:粘紅酵母,微生物油脂,誘變選育,工藝優(yōu)化論文類型:應(yīng)用基礎(chǔ)研究II摘要Subject:StudyonOilHigh-yieldStrainsandTecnichsofExtractingMicrobialOilSpecialty:BiochemistryandMolecularBiologyName:WangMinSupervisor:LishichangA

6、BSTRACTOilwhichhasawiderangeofapplicationsisoneofprimarysubstancethatcanmakeupandsustainlifeactivity,andisimportantindustrialrawmaterials.Currently,oilsourceismainlyfromanimalsandplants.Asmicrobialoilwasstudiedbypeople,utilizationofmicrobialfermentationwasusedtoobtainoil

7、s,whichnotonlycanalleviatethesituationofscarceresourcesofanimalandplantoils,butalsocanreusewasteresourcebyoil-producingstrains.Thatprovidesanewwayforaccesstooilresources.TakingRhodotorulaglutinis31596astheresearchobjectinthispaper,high-yieldingstrainsofoilwereobtainedbyt

8、hreemeans,suchasmediumoptimization,bacterialmutationandoptimizationofoilextraction.Majorresearcheswerea

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