醋酸高產(chǎn)菌株選育及其代謝調(diào)控研究

醋酸高產(chǎn)菌株選育及其代謝調(diào)控研究

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1、單位代碼:10359密級(jí):公開學(xué)號(hào):2015111078分類號(hào):TS264.2HefeiUniversityofTechnology碩士學(xué)位論文MASTER’SDISSERTATION(學(xué)術(shù)碩士)論文題目:醋酸高產(chǎn)菌株選育及其代謝調(diào)控研究學(xué)科專業(yè):食品科學(xué)作者姓名:姚洪禮導(dǎo)師姓名:吳學(xué)鳳副教授完成時(shí)間:2018年4月合肥工業(yè)大學(xué)學(xué)歷碩士學(xué)位論文醋酸高產(chǎn)菌株選育及其代謝調(diào)控研究作者姓名:姚洪禮指導(dǎo)教師:吳學(xué)鳳副教授學(xué)科專業(yè):食品科學(xué)研究方向:食品微生物2018年4月ADissertationSubmittedfortheDegre

2、eofMasterResearchonBreedingofHighAceticAcidProducingStrainanditsMetabolismControllingByYaoHongliHefeiUniversityofTechnologyHefei,Anhui,P.R.ChinaApril,2018致謝光陰荏苒,歲月如梭,辛勤而又充實(shí)的研究生生涯即將結(jié)束,數(shù)易其稿,字斟句酌,畢業(yè)論文的撰寫也接近尾聲?;厥兹昵髮W(xué)路上的點(diǎn)點(diǎn)滴滴,無論是論文的選題開題,還是實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展及論文的撰寫,都離不開恩師的指導(dǎo)、同學(xué)的幫助及家人的支持,

3、在此向您們特表感謝!本論文是在吳學(xué)鳳老師的悉心指導(dǎo)下完成的,吳學(xué)鳳老師不僅在學(xué)習(xí)和生活以及科學(xué)研究上給予我莫大的幫助,還教會(huì)了我很多做人做事的道理,衷心感謝吳老師一直以來對(duì)我諄諄教導(dǎo)及無微不至的關(guān)懷。忘不了您的樸實(shí)無華的人格魅力、平易近人的處世態(tài)度;忘不了您的孜孜不倦的鉆研精神、苦口婆心的勸說教導(dǎo);忘不了您的勤勞務(wù)實(shí)的工作態(tài)度、因材施教的教學(xué)方法。三年來,是您在我迷惑不解時(shí)給我指點(diǎn)迷津,是您在我科研失敗時(shí)給我指導(dǎo)安慰,是您在我生活所困時(shí)給我支持和希望!衷心感謝李興江老師長(zhǎng)期以來對(duì)我的幫助與支持,從論文的選題、開題、實(shí)驗(yàn)的進(jìn)展以及

4、論文的撰寫與發(fā)表,李興江老師都給予了我莫大的關(guān)心和支持,無論是學(xué)習(xí)、生活還是科研的態(tài)度,您始終是我心中的榜樣,是我將感謝一生的良師益友。衷心感謝姜紹通老師、潘利軍老師、鄭志老師、蔡克周老師、趙妍嫣老師、操麗麗老師、龐敏老師、羅水忠老師、楊培周老師、穆冬冬老師這三年來對(duì)我的指導(dǎo)與幫助,讓我的研究生生涯在一個(gè)和諧友愛的課題組中度過。衷心感謝實(shí)驗(yàn)室?guī)熜掷铐槪瑤熃銓O婷、汪海濤,師妹劉青、王巧云及師弟李傳運(yùn)在學(xué)習(xí)和科研中給予我的幫助!衷心感謝同課題組的鄧永東、水龍龍、彭曄、朱星星、王淑敏、曹鳳紅給予我?guī)椭?,在此,祝福你們?cè)谖磥砣松飞弦环?/p>

5、風(fēng)順!衷心感謝我的室友陳博、王煜、高杰,大千世界而我們卻能歡聚一室,建立親密的友誼,讓我在愉快、溫馨的環(huán)境下順利完成我的碩士論文。衷心感謝我的家人,感謝你們多年以來對(duì)我的支持、鼓勵(lì)和陪伴,感謝你們一直以來對(duì)我的照顧和關(guān)心,你們的健康和快樂是我最大的心愿!作者:姚洪禮2018年01月16I摘要醋酸是食醋的主要成分,廣泛用于醋酸纖維、醋酐、醋酸乙烯、金屬醋酸鹽等化工業(yè),在食品工業(yè)中用作酸化劑、增香劑和香料等。醋酸生產(chǎn)方法很多,但用于食品行業(yè)的醋酸只能使用生物法生產(chǎn)。巴氏醋酸菌(Acetobacterpasteurianus)一直是我

6、國(guó)食醋發(fā)酵的主要菌種,但是該菌種涉及具體菌株多,產(chǎn)酸能力強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)菌株極少,且菌株性能不穩(wěn)定。為提高醋酸發(fā)酵能力,獲得優(yōu)勢(shì)菌株,本研究從幾株常用醋酸菌中選出了一株生長(zhǎng)狀況較好且產(chǎn)酸強(qiáng)度高的菌株(AcetobacterpasteurianusBJST-S);對(duì)該菌株進(jìn)行紫外誘變,選育出一株優(yōu)良醋酸菌YHL3;結(jié)合其發(fā)酵特性及代謝通量分析,探討其誘變機(jī)制;對(duì)其進(jìn)行關(guān)鍵酶活代謝調(diào)控;并優(yōu)化醋酸菌YHL3半連續(xù)罐發(fā)酵工藝參數(shù),建立了高濃度醋酸發(fā)酵體系。主要研究結(jié)果如下:(1)優(yōu)良醋酸菌的選育。通過對(duì)比三個(gè)菌株的發(fā)酵特性,確定了巴氏醋桿菌B

7、JST-S為優(yōu)勢(shì)菌株,其最高產(chǎn)總酸量為60.15g/L;并對(duì)其進(jìn)行誘變選育、高醇?jí)毫ε囵B(yǎng),選出在高醇?jí)毫ο驴偹岙a(chǎn)量最高(42.55±0.86g/L)的菌株,命名為AcetobacterpasteurianusYHL3;利用該菌株,進(jìn)行5次傳代培養(yǎng)和發(fā)酵實(shí)驗(yàn),每批發(fā)酵48h,產(chǎn)酸量維持在58.10~59.68g/L,發(fā)酵強(qiáng)度維持在1.21~1.24g/(L·h)。(2)誘變機(jī)理研究。對(duì)醋酸菌YHL3與BJST-S進(jìn)行耐受性對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果表明,在高醇下,YHL3的乙醇脫氫酶(ADH)和乙醛脫氫酶(ALDH)比酶活最大值分別為5.96±

8、0.26U/mg和4.82±0.22U/mg均高于BJST-S的ADH和ALDH比酶活(分別為4.78±0.28U/mg和4.12±0.24U/mg);在底酸下,YHL3的ADH和ALDH比酶活最大值分別為6.08±0.18U/mg和5.47±0.16U/mg均

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