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《哈茨木霉h-13形態(tài)及生理特征的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號:Q:塑密級:醬適單位代碼:一!Q3盟——學(xué)號:S絲QZ!Q!1225名微雇業(yè)大學(xué)學(xué)位論文哈茨木霉H.13形態(tài)及生理特征的研究StudyonMorphologyandPhysiologicaICharacteristicsofTrichodermaharziahumH一13研究生:韭友維指導(dǎo)教師:鎣童科教援合作指導(dǎo)教師:申請學(xué)位門類級別:理堂亟±專業(yè)名稱:一生物物理堂一一研究方向:生物塑型氈堂所在學(xué)院:生金型堂堂瞳答辯委員會主席:2007年6月摘要木霉菌是一種廣泛存在于土壤、植物根際和葉面的腐生型真菌,對多種植物病原真菌具有
2、拮抗作用。因而被當(dāng)作一種生防菌種進(jìn)行使用,并引起了眾多微生物學(xué)家和植物病害研究者的高度重視。本項研究采用對比研究法,與對照菌株相比,將試驗菌株培養(yǎng)后,從菌落,菌絲體,細(xì)胞形態(tài)等宏觀層次闡明主要差異;從菌物對環(huán)境物質(zhì)吸收、轉(zhuǎn)運及利用,闡明對環(huán)境物質(zhì)選擇性吸收的可調(diào)控性;從對目的物合成種類與星的分析,闡明相關(guān)酶基因表達(dá)能力與效果變化規(guī)律;為生產(chǎn)實踐提供技術(shù)參數(shù)。文中采用將試驗菌株與原菌株分別點接在PDA培養(yǎng)基平板上,30℃下培養(yǎng)3天,肉眼觀察菌物呈圓斑狀,菌斑上的菌絲大部分呈白色,菌斑的局部有色素合成,呈現(xiàn)淡黃色。在液體培養(yǎng)基中,木霉
3、菌絲相互纏繞在~起,呈球狀,顯淡黃色。普通光學(xué)顯微鏡觀察表明,木霉菌絲縱橫交錯,呈網(wǎng)絡(luò)狀。掃描電鏡觀察表明,對照菌株孢子基本呈圓形,表面粗糙,中間略有凹陷,試驗菌株孢子表面光滑,棱角清晰,呈饅頭狀,有的甚至呈方形,中問略有凹陷。通過對發(fā)酵液殘留糖含量的測定,試驗菌株培養(yǎng)液中還原糖的濃度明顯低于對照菌株,說明試驗菌株對碳源的吸收利用速率明顯要高于對照菌株。在進(jìn)行產(chǎn)幾丁質(zhì)酶和纖維素酶的試驗中,分別以膠態(tài)幾丁質(zhì)和羧甲基纖維素鈉作為相應(yīng)的產(chǎn)酶培養(yǎng)基中的唯一碳源,通過測定幾丁質(zhì)酶的酶活以及纖維索酶水解圈的大小,得出離子束誘變后,試驗菌株的產(chǎn)
4、酶基因的表達(dá)比對照菌株有了較大的增強,試驗菌株幾丁質(zhì)酶的酶活最高可達(dá)0.292U/ml,而對照菌株酶活只有0.228U/m1故產(chǎn)幾丁質(zhì)酶最佳培養(yǎng)基是在原培養(yǎng)基中添加1.O%的酵母粉:纖維素酶也是木霉抑菌的又一酶制劑,文中采用羧甲基纖維素鈉(CMC)作為唯一碳源的產(chǎn)纖維素酶培養(yǎng)基,以CMC水解圈的大小來衡量纖維素酶的酶活,則試驗菌株的水解圈的直徑偏高于對照菌株。通過上述試驗表明,離子束對木霉的生物學(xué)特性改造產(chǎn)生積極影響,經(jīng)20代轉(zhuǎn)接,木霉的遺傳穩(wěn)定性未見明顯衰退,提高了木霉對環(huán)境物質(zhì)吸收轉(zhuǎn)化利用的選擇性;發(fā)現(xiàn)幾丁質(zhì)酶、纖維素酶量與活
5、性均有定向提高。一總結(jié)上述,,離子柬誘變在生防菌株木霉的改良上起著重大的作用,改良后的菌株對外界環(huán)境的適應(yīng)性比對照菌株提高,遺傳性狀較對照菌株穩(wěn)定,試驗菌株對酸堿、高溫及滲透壓的耐受性增強,所有這些特點表明改造后的菌株更適合用作生防菌株。關(guān)鍵詞:木霉,幾丁質(zhì)酶,纖維素酶,試驗菌株,對照菌株AbstractTfichodermawhichexistsinthesoil.plantrootzoneandleafsurfacewidespreadisatypicalrotfungianditisartantagonisticbacter
6、iumofAgaricusspa:.So婦1,wndistresspathogensTrichodermausedasbiocontrofactorsandattractsmuchattentionofmanymierobiologistsand1eaiTlersonplantdiseases.Contrastingmethodwasmadeuseofinthisexperiment.Afterculturingthemutantstrain。maindifferenceswereconcludedbycolony,mycelia
7、andeellmorphologyincontrasttothewildstrain.Fromtheassimilation,transportationandutilizationofnutrientsmadebythemutantstrain,theresultWasconcludedthattheassimilationfornutrientWascontrollabIe.Fromthekindsandquantityoftargetproducts,aconclusionwasconcludedthatexpression
8、ofsomeenzymegeneswasenhanced.Inthistest.inoculatedthemutantstrainandthewildstrainonthePDAmediumplaterespectively.culturingun