沈悌-造血干細(xì)胞臨床應(yīng)用ppt培訓(xùn)課件

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1、造血干細(xì)胞及其臨床應(yīng)用授課教師沈悌血細(xì)胞的生成在造血器官中,造血干細(xì)胞增殖、分化、成熟為各種血細(xì)胞,并釋放至循環(huán)中。什麼是造血干細(xì)胞(HematopoieticStemCell,HSC)??在體內(nèi)終生存在,可自我更新 (Self-renewal)?在增殖過程中有多系分化的潛能?移植后可永久性重建造血功能和 免疫功能如何識(shí)別造血干細(xì)胞?形態(tài)類似原淋巴細(xì)胞Rhodamine染色陰性(拒染)表面分化抗原CD34+,lin–生物學(xué)功能可在體外長期培養(yǎng); 體內(nèi)重建造血造血祖細(xì)胞(Progenitor)由HSC增殖、分化而來CD34

2、+,lin+/-有一定的自我更新能力,可 短期重建造血;造血干/祖細(xì)胞存在部位出生前:肝、脾、骨髓、胸腺、 淋巴結(jié)、外周血、臍帶血出生后:骨髓、外周血、(肝、脾)造血干細(xì)胞的數(shù)量BM有核細(xì)胞的0.1%;估計(jì)總量為5×107PB有核細(xì)胞的0.001%CD34+細(xì)胞占骨髓單個(gè)核細(xì)胞的1-4%造血干細(xì)胞 造血所需要的條件造血微環(huán)境 造血生長因子造血微環(huán)境在骨髓中由基質(zhì)細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)組成基質(zhì)細(xì)胞:成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等細(xì)胞外基質(zhì):膠原纖維、纖維連接素、軟骨素等功能:1.為造血干細(xì)胞提供生存與發(fā)育的空間2

3、.與造血干細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞間作用3.生產(chǎn)造血生長因子造血生長因子約有40種,為小分子蛋白或多肽由骨髓基質(zhì)細(xì)胞(正常狀態(tài))、T細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞(應(yīng)激狀態(tài))等分泌。造血細(xì)胞和其他細(xì)胞表面存在細(xì)胞因子的受體各種細(xì)胞因子協(xié)同作用,促使細(xì)胞增殖、分化、成熟、凋亡、釋放。分類:作用于分化早期:SCF、IL-1、IL-3、IL-6等作用于分化晚期:EPO、GM-CSF、G-CSFHSC概念的新進(jìn)展新發(fā)現(xiàn)的HSC的標(biāo)記抗原AC133和KDR 胚胎干細(xì)胞和多向分化造血干細(xì)胞疾病再生障礙性貧血 先天性免疫缺陷病 白血病 骨髓增生異常

4、綜合征(MDS) 自身免疫性疾病? 陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)造血干/祖細(xì)胞的臨床應(yīng)用 ----造血干/祖細(xì)胞移植??重建造血功能??重建免疫功能??腫瘤治療??基因治療造血干/祖細(xì)胞移植的基本概念1.適應(yīng)證 2.供者的選擇 3.HLA配型 4.造血干/祖細(xì)胞的采集 5.移植前的予處理 6.GVHD與GVL 7.各種移植方法的療效HSCT的適應(yīng)癥腫瘤(對化療/放療敏感者)干細(xì)胞缺陷(再障、Sicklecell貧血等)免疫缺陷(SCID、SLE等)基因治療HSC供者的選擇因病種而異病種供者LeukemiaAllo-

5、Auto-UB?LymphomaAuto-Allo-MMAuto-SolidtumorAuto-AAAllo-UBAuto-?SLEetcAuto-GenetherapyAllo-Auto-HLA配型HLA(HumanLeukocyteAntigen)是人類的主要組織相容性復(fù)合物(MHC)HLA的相合程度與異基因移植的兩種免疫反應(yīng)有關(guān):排斥反應(yīng)(Rejection)移植物抗宿主反應(yīng)(GraftversHostDisease,GVHD)Allo-BMT供者的類型同胞HLA全相合;1個(gè)位點(diǎn)不合;>1個(gè)位點(diǎn)不合親屬HLA全相合

6、無關(guān)供者HLA全相合父母或子女HLA半相合HSC的采集HSC主要由骨髓或外周血中采集,也可由臍帶血或胎肝中獲得。由骨髓采集:需在手術(shù)室進(jìn)行,抽取1000至2000ml骨髓液,有核細(xì)胞數(shù)應(yīng)達(dá)到6x108/kg。由外周血采集:需經(jīng)化療和/或集落刺激因子動(dòng)員(Mobilization),使用血細(xì)胞分離機(jī)采集,采集目標(biāo)為CD34+細(xì)胞2x106/kg。移植前的予處理目的:為移植物提供種植空間最大限度消滅腫瘤細(xì)胞抑制受者免疫反應(yīng)方法:射線照射和/或化療藥物常用予處理方案(Preparativeregimen)經(jīng)典方案TBI+CY改

7、良方案馬利蘭(BU)+環(huán)磷酰胺(CY)GVHD發(fā)生條件:移植物含有免疫活性細(xì)胞;受體具有供者不具備的重要的異種抗原;受體不能對移植物表現(xiàn)有效的免疫應(yīng)答。病理基礎(chǔ):移植物中的T細(xì)胞被受體的異體抗原激活,產(chǎn)生r-干擾素并激活巨噬細(xì)胞,分泌TNF、NO等,造成組織損傷。免疫識(shí)別----T細(xì)胞激活---產(chǎn)生細(xì)胞因子---GVHD||組織損傷----------GVHD的預(yù)防與處理GVHD的預(yù)防1.去除T細(xì)胞2.MTX3.環(huán)胞菌素A(CyclosporinA,CsA)GVHD的治療1.大劑量糖皮質(zhì)激素2.抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)

8、與CsA)3.單克隆抗體4.對癥處理移植物抗腫瘤效應(yīng)(GVL)有足夠的臨床證據(jù)表明存在GVL,并用以改善臨床療效。但其發(fā)生機(jī)制有待研究HSCT的療效

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