a型流感病毒ha+dna疫苗與原核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)及多克隆抗體制備

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1、東北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文高峰一般均發(fā)生在當(dāng)年11月底至次年的2月底,而南方除冬季活動高峰外,還有一個活動高峰(5~8月份)。然而,流感大流行可發(fā)生在任何季節(jié)。5.周期性流感大流行發(fā)生,在時間上不存在周期性。但從現(xiàn)有資料來看,每次大流行之間間隔均在10年以上。(二)流感的主要癥狀和并發(fā)癥流感的癥狀主要表現(xiàn)在呼吸道癥狀和全身中毒癥狀,呼吸道癥狀表現(xiàn)為咳嗽、流涕、鼻塞、咽喉疼痛,全身癥狀為畏寒、發(fā)熱、頭痛、全身肌肉酸痛、惡心、食欲不振、輕度腹瀉等。體溫常表現(xiàn)為高熱,可達(dá)39℃40℃??谇徽衬た梢猿霈F(xiàn)皰疹。如果出現(xiàn)肺部并發(fā)癥,可以表現(xiàn)為氣短、呼吸困難、

2、肺部聽診可聞及粗糙的呼吸音或濕性噦音。不同的患者可以表現(xiàn)為如下的臨床類型。單純型:最常見,常表現(xiàn)為畏寒、發(fā)熱、全身不適、腰背和四肢酸痛無力、頭昏頭痛。部分患者會出現(xiàn)食欲不振、惡心、便秘等消化道癥狀,體溫可以高達(dá)39℃~40℃,一般持續(xù)2~3天后漸降。部分患者可有打噴嚏、鼻塞、咽痛和咳嗽等癥狀,輕者癥狀類似于普遍感冒,病程僅1~2天。肺炎型:常發(fā)生于老年人、2歲以下的兒童或原先有慢性病患者,表現(xiàn)為高熱、煩躁、呼吸困難。咳血痰和明顯發(fā)紺,肺部聽診呼吸音減低,可聞及濕噦音或哮鳴音。上述癥狀進(jìn)行性加重,抗細(xì)菌感染藥物治療無效。病程常在lO天至1個月以上

3、。多數(shù)患者可以逐漸恢復(fù),少數(shù)病例因呼吸衰竭死亡。胃腸型:以惡心、嘔吐、腹瀉等消化道癥狀為主。中毒型:較少見,肺部病變不明顯,但具有神經(jīng)系統(tǒng)及全身血管系統(tǒng)損害,臨床伴有明顯腦炎或腦膜炎癥狀,如高熱不退,神志昏迷。成人可出現(xiàn)譫妄,小兒可出現(xiàn)抽搐,并出現(xiàn)腦膜刺激征,如頸項(xiàng)強(qiáng)直、布氏征陽性等。少數(shù)病人由于血管神經(jīng)系統(tǒng)紊亂或腎上腺出血而導(dǎo)致血壓下降或休克等。此型病死率較高。流感可合并細(xì)菌性肺炎,在流感癥狀緩解后2~3日,又出現(xiàn)發(fā)熱,伴有細(xì)菌性肺炎的癥狀和體征,包括咳嗽、咳膿痰、胸部影像學(xué)顯示肺實(shí)質(zhì)。常見致病菌有金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌和流感樣菌,此并發(fā)

4、癥常發(fā)生于已經(jīng)患有慢性肺疾病的病人,此外也可以發(fā)生病毒和細(xì)菌混合感染的肺炎。(三)診斷流行病學(xué)資料是診斷流感的主要依據(jù)之一,結(jié)合典型臨床表現(xiàn)不難診岍5

5、,但在流行初期,散發(fā)或輕型的病例診斷比較困難。確診往往需要實(shí)驗(yàn)室檢查。主要診斷依據(jù)如下。1.流行病學(xué)史2東北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文在流行季節(jié),一個單位或地區(qū)出現(xiàn)大量上呼吸道感染患者或醫(yī)院門診、急診上呼吸道感染患者明顯增加。2.臨床癥狀急性起病,畏寒、高熱、頭痛、頭暈、全身酸痛、乏力等中毒癥狀??砂橛醒释?、流涕、流淚、咳嗽等呼吸道癥狀。少數(shù)病例有食欲減退,伴有腹痛、腹脹、嘔吐和腹瀉等消化道癥狀。嬰兒

6、流感的臨床癥狀往往不典型,可見高熱驚厥;部分患兒表現(xiàn)為喉.氣管.支氣管炎,嚴(yán)重者出現(xiàn)氣道梗阻現(xiàn)象;新生兒流感雖少見,但一旦發(fā)生常呈敗血癥表現(xiàn),如嗜睡、拒奶、呼吸暫停等,常伴有肺炎,病死率高。3.輔助檢查u1(1)外周血象:白細(xì)胞總數(shù)不高或偏低,淋巴細(xì)胞相對增加,重癥患者多有白細(xì)胞總數(shù)及淋巴細(xì)胞下降。(2)胸部影像學(xué)檢查:重癥患者胸部X線檢查可顯示單側(cè)或雙側(cè)肺炎,少數(shù)可伴有胸腔積液等。(3)病毒特異抗原及其基因檢查:取患者呼吸道標(biāo)本或肺標(biāo)本,采用免疫熒光或酶聯(lián)免疫法檢測甲、乙型流感病毒型特異的核蛋白(NP)或基質(zhì)蛋白(M1)及亞型特異的血凝素蛋白

7、。還可用逆轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈反應(yīng)(ImPCR)法檢測編碼上述蛋白的特異基因片段。(4)病毒分離:從患者呼吸道標(biāo)本(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、氣管吸出物)或肺標(biāo)本中分離出流感病毒。(5)通過增殖將第(4)項(xiàng)中采集的標(biāo)本接種到犬腎上皮(MDCK)細(xì)胞過夜增殖后,進(jìn)行第(3)項(xiàng)中有關(guān)檢查。(6)血清學(xué)檢查:急性期(發(fā)病后7天內(nèi)采集)和恢復(fù)期(間隔2~3周采集)雙份血清進(jìn)行抗體測定,后者抗體滴度與前者相比有4倍或以上升高,有助于確診和回顧性診斷[注:測H5亞型病毒株抗體需用微量中和實(shí)驗(yàn)或特異性高的酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA);微量中和實(shí)驗(yàn)需在生物科學(xué)實(shí)

8、驗(yàn)室3(BSL3)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行;高致病性禽流感病毒分離與傳代也需在BSL3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行【4】]。4.診斷分類疑似病例:具備流行病學(xué)史和臨床癥狀;確診病例:滿足疑似病例標(biāo)準(zhǔn),同時實(shí)驗(yàn)室檢查符合上述第(3)或(4)或(5)或(6)中任何一項(xiàng)。(四)鑒別診斷除流感病毒外,多種病毒、細(xì)菌等病原體,亦可引起類似癥狀,如呼吸道合胞病毒、鼻病毒、腺病毒、副流感病毒、冠狀病毒,以及肺炎支原體、衣原體和嗜肺軍團(tuán)茵感染等。臨床均表現(xiàn)為不同程度的畏寒、發(fā)熱、乏力、頭痛、肌痛、咳嗽、咳痰、胸悶和氣促,稱為流感樣疾病(iIlnuenza1波eilhless,ILI)。雖

9、不易區(qū)分,但某些臨床特點(diǎn)可提供參考。確診需依據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢查,如病原體分離、血清學(xué)檢查和核酸檢測。1.普通感冒:普通感冒可由多種呼吸道病毒感染引起。除注意

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