葡萄脫毒培養(yǎng)與病毒檢測技術研究進展

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1、·專題綜述·北方園藝2012(04):174~177葡萄脫毒培養(yǎng)與病毒檢測技術研究進展張麗,石磊,甘曉燕h,李苗,陳虞超,宋玉霞(1.林木育種國家工程實驗室,北京100083;2.寧夏農(nóng)業(yè)生物技術重點實驗室,寧夏銀川750002)摘要:葡萄病毒病是影響葡萄質量和產(chǎn)量的重要限制性因素之一。開展脫毒苗的生產(chǎn),采用高靈敏的病毒檢測手段進行監(jiān)控,是防治葡萄病毒病的有效途徑?,F(xiàn)對目前生產(chǎn)上主要發(fā)生的葡萄病毒病、脫毒培養(yǎng)技術和病毒檢測技術進行簡要綜述,并對當前的研究進展做以展望。關鍵詞:葡萄病毒;脫毒;病毒檢測;進展中圖分類號:S6

2、63.103.6文獻標識碼:A文章編號:1001-0009(2012)04一O174~O4葡萄是果樹中易感染病毒病的樹種之一,具有病毒立高效率、低成本、可操作性強的葡萄種苗脫毒培育體種類多、分布廣、危害大等特點[1]。目前,葡萄病毒病已系的建立;三是探索建立準確、靈敏、簡單、快速的葡萄增加到2O個屬,有55種之多_2]。其中葡萄扇葉病病毒檢測方法。(Grapevinefanleafdisease)、葡萄卷葉病(Grapevine1葡萄主要病毒病的研究leafrolldisease)、葡萄斑點病(Grapevineflec

3、kdisease)、葡1.1葡萄扇葉病萄莖痘病(Grapevinestempittingdisease)和葡萄栓皮病葡萄扇葉病是世界上分布最廣泛的葡萄病毒病之(Grapevinecorkybarkdisease)是葡萄的主要病害。由于一。病株表現(xiàn)為生長受阻,枝、葉變形,結果時間縮短,可葡萄繁殖主要靠扦插和嫁接,使得病毒長期積累和重復感造成果實產(chǎn)量下降5O~70,嚴重影響果實品質[4]。近染,并表現(xiàn)為復合侵染和以潛隱性特征存在,甚至是同種年來在葡萄扇葉病的病毒屬性的研究方面有了突破性的病毒由于侵染的品種和發(fā)病時期不同也表現(xiàn)

4、各異,因而給進展。Ritzenthaler等l5和Serghini等l6完成了葡萄扇葉病毒的識別和診斷帶來極大的困難。此外,病毒的侵染源病毒全部核苷酸序列測定。管漢成等口]也通過RT-PCR復雜,傳播途徑廣泛也進一步加大了防治的困難。技術完成扇葉病毒外殼蛋白基因的序列分析。但此病毒多年來,實現(xiàn)無病毒化栽培一直是國內(nèi)外努力解決在不同株系、不同品種上的癥狀各有差異,且存在復合侵的問題。脫毒和病毒檢測技術是實現(xiàn)無毒化栽培的關染現(xiàn)象,不易從表癥上進行病毒鑒定。鍵。自1964年召開的第一屆葡萄病毒病害學術會議以1.2葡萄卷葉病來,

5、葡萄病毒病的工作迅速地開展起來。歐美國家在該葡萄卷葉病是葡萄生產(chǎn)上另一重要的病毒病。病方面的研究工作方面起步較早,在病毒種類的鑒定,病害分布廣,發(fā)生于葡萄所有種和品種中,具有階段隱癥毒防治措施的制定上都打下了良好的基礎。對葡萄病的特點。感染該病毒的病樹果穗數(shù)量減少,可造成減產(chǎn)毒檢測技術的研究也由傳統(tǒng)的生物學鑒定,病毒血清學4O左右]。果實成熟期推遲,含糖量大幅度降低?!?,抗檢測技術,發(fā)展到目前廣泛應用的分子雜交、雙鏈RNA逆性降低。自1984~1996年,已發(fā)現(xiàn)至少有7種病毒與和PCR等高靈敏的分子生物學技術。我國在葡萄

6、病毒卷葉病相關,被稱之為卷葉相關病1~7(GLRav_1~GI一病方面起步較晚,從20世紀8O年代中期才開始對葡萄RaV-7)。其中GLRaV-1、GIRaV一3、GLRaV一7可以作為病毒病的探索{。l。目前針對葡萄病毒病的研究主要集卷葉病的的代表。裴光前等ll對我國葡萄主栽區(qū)58株中在三方面:一是葡萄主要病毒病的研究;二是探索建表現(xiàn)卷葉病的葡萄上采集休眠枝條進行卷葉病毒EIJSA和RT—PCR檢測,不同程度地檢測出GLRaV-1、第一作者簡介:張麗(1982一),女,寧夏銀川人,碩士,研究實習員,2、3、4、5和7這

7、6種葡萄卷葉病的發(fā)生。并通過葡萄卷現(xiàn)主要從事植物生物技術育種研究工作。葉病毒HSP70基因序列構建系統(tǒng)進化樹分析6種卷葉責任作者:宋玉霞(1963一),女,寧夏銀川人,碩士,研究員,現(xiàn)主要病毒的進化關系,發(fā)現(xiàn)GLRaV一1、3和7可歸為一類,從事植物生物技術育種研究工作?;痦椖浚罕本┝謽I(yè)大學林木育種國家工程實驗室開放課題資助GLRaV-2、4和5可聚一類。項目(FOP2010—6)。1.3葡萄莖痘病收稿日期:2011~12一O8當砧穗組合感染葡萄莖痘病后長勢衰退與死亡,產(chǎn)174北方園藝2012(04):174~177·

8、專題綜述·量減少5O以上。病癥表現(xiàn)為樹皮粗糙、木栓化,木質制而發(fā)揮作用的。目前主要的病毒抑制劑有病毒部和樹皮形成層分布著縱向突起及凹槽。嫁接愈合差,唑、板藍根、鳥嘌呤和尿嘧啶類等多種物質,各種抑制劑發(fā)芽遲,枝蔓生長緩慢,樹體矮化,產(chǎn)量降低。病樹樹勢作用機理也不相同。病毒抑制劑在蘋果、馬鈴薯脫毒中減退,一般不表現(xiàn)癥狀,

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