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《食用菌病毒及菌種脫毒技術(shù)研究進展.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、寧夏農(nóng)林科技，NingxiaJournalofAgri.andFores.Sci.&Tech.2011，52（01）：15-16，3015食用菌病毒及菌種脫毒技術(shù)研究進展王正德，高偉華（南陽師范學(xué)院，河南南陽473061）摘要：介紹了食用菌病毒的種類、危害及檢測方法，概述了目前常用的幾種食用菌病毒的脫毒技術(shù)，最后討論脫毒菌種的應(yīng)用優(yōu)勢及前景。關(guān)鍵詞：食用菌病毒；種類；危害；檢測方法；脫毒技術(shù)中圖分類號：S646文獻標識碼：A文章編號：1002-204X（2011）01-0015-02食用菌營養(yǎng)豐富，風(fēng)味獨特，富含蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)菇菌絲蛋白質(zhì)，根據(jù)能否檢出22kDa的34nm香菇病毒外
2、殼等多種營養(yǎng)成分。經(jīng)過30多年的發(fā)展，我國的食用菌年產(chǎn)量已蛋白帶作為菌株是否帶病毒的指標。結(jié)果在生長不正常香菇菌達到1800多萬t，目前已成為我國繼糧、棉、油、菜、果之后的株和對照的帶病毒菌株中均檢測出了34nm香菇病毒外殼蛋第六大種植產(chǎn)業(yè)[1]。但在其栽培過程中病害日益嚴重，制約著食白帶。這表明應(yīng)用SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳可對香菇病毒進行用菌生產(chǎn)的進一步發(fā)展。目前，使用脫毒菌種是防治食用菌病簡單、快速的早期檢測。近年來，隨著食用菌病毒的不斷發(fā)現(xiàn)及毒病害最有效的措施。20世紀80年代以來，脫毒技術(shù)已使農(nóng)研究的深入，血清學(xué)及分子生物學(xué)等快速檢測技術(shù)也相繼應(yīng)用業(yè)大為受益。我國部分地區(qū)也將植物脫
3、毒技術(shù)與組織快繁技術(shù)于食用菌病毒的檢測。目前，以提純的病毒粒子為抗原，制備出相結(jié)合，進行了無性繁殖植物的脫毒及快繁生產(chǎn)[2-7]，且取得了了OMIV、OMSV和PeSV的抗血清，并建立了這3種病毒的三可觀的經(jīng)濟效益。我國對病毒病的研究除報道了蘑菇、香菇和抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定（TAS-ELISA）快速檢測方法；基于銀耳病毒外，還首次發(fā)現(xiàn)并報道了平菇病毒。但在食用菌生產(chǎn)已經(jīng)獲得的部分食用菌病毒基因組序列，反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反中，我國菌種脫毒技術(shù)研究起步較晚。為此，筆者就食用菌病毒應(yīng)（RT-PCR）也已成功應(yīng)用于食用菌菌種、栽培基質(zhì)、覆土及子的相關(guān)研究及脫毒菌種的制作技術(shù)總結(jié)如下。實體中病毒的
4、快速檢測[11]。1食用菌病毒種類、危害及檢測方法2菌種脫毒方法1.1種類脫毒原意是指采用技術(shù)手段或措施，將種苗自身攜帶的病食用菌病毒是真菌病毒的一部分，形狀多為球形，也有細毒分離出去，使種苗純化，恢復(fù)母本性狀。菌種脫毒應(yīng)用的是菌狀和短桿狀等。已發(fā)現(xiàn)的食用菌病毒有少數(shù)幾種已經(jīng)歸類，“尖端”脫毒理論，其理論根據(jù)是隨著生物體細胞的不斷分裂，如蘑菇細菌狀病毒（MBV）屬Barnaviridae科中Barnavirus屬的其生長尖端組織與生物體自身攜帶的病菌、病毒之間的距離較唯一成員，雙孢蘑菇病毒4屬于分病毒科的雙分體基因組病毒大，因此適時及時地進行分離操作，便可達到脫去病毒的目的。屬（Parti
5、tivirus）；糙皮側(cè)耳病毒I（PoVI）與雙分體基因組分病毒菌種脫毒的操作本身并不復(fù)雜，但需花費較長時間，并需嚴格科（Partitiviridae）的成員相似，特別是與FusariumpoaevirusI控制脫毒時機和操作[12]。strainAII十分相似[8]。目前研究報道最多的食用菌病毒為雙孢2.1菌絲尖端脫毒技術(shù)菇病毒、香菇病毒及平菇病毒。挑取1塊如米粒大小的種源，接入平板培養(yǎng)基邊緣。接種1.2危害后置于規(guī)定溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌絲萌發(fā)至最長為2cm時，用尖在食用菌栽培過程中經(jīng)常會出現(xiàn)由病毒病害引起的菌種刃接種工具切取菌絲體尖端約1mm，接入新制平板上。此為退化及質(zhì)量和產(chǎn)量降低等問題
6、。病毒病害發(fā)病癥狀具有潛隱一次脫毒，代號為TD1；一般可連續(xù)進行3～4次，即可獲得性，直到生產(chǎn)中的某個時期才開始顯癥。感染病毒后，癥狀隨著TD2或TD3，理論上講，次數(shù)越多，相對脫毒效果也越有保證[13]。侵染時間、病毒種類、食用菌品種及環(huán)境條件不同而有變化?？?.2斷橋式脫毒技術(shù)的來說，有菌絲體生長緩慢和子實體發(fā)育不良等癥狀，嚴重影在無菌條件下，用接種耙把培養(yǎng)基斜面最前端較薄的培養(yǎng)響食用菌的產(chǎn)量和品質(zhì)[2]。病毒病害一旦發(fā)生，會形成細菌、真基斷開約1cm，接母種，當(dāng)菌絲長到斷開處時，則會繼續(xù)伸長，菌交叉感染，不僅當(dāng)年的產(chǎn)量下降，還會使生產(chǎn)環(huán)境惡化，影響穿越斷開處，伸入前端的小塊培養(yǎng)基上，
7、經(jīng)過斷裂又伸長，菌絲來年的產(chǎn)量。顯得格外粗壯、有力。轉(zhuǎn)接挑取小塊培養(yǎng)基最前端的組織，常規(guī)1.3檢測接種，經(jīng)過4次尖端挑取培養(yǎng)，便可脫去病毒。采用這種辦法培傳統(tǒng)的病毒檢測手段主要是電子顯微鏡觀察、dsRNA技術(shù)養(yǎng)的平菇菌種發(fā)菌快、抗性強，產(chǎn)量明顯提高。及酶學(xué)方法。電子顯微鏡觀察病毒粒子形態(tài)是最為可靠的一種方法，但受病毒粒子提純困難的限制；dsRNA技術(shù)是在研究真基金項目：南陽師范學(xué)院STP項目。菌病毒的過程中發(fā)展起來的檢測
