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《磁性殼聚糖微球的制備及其在漆酶固定化中的應(yīng)用》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、中文摘要光纖生物傳感技術(shù)在醫(yī)學(xué)、生物工程、食品工業(yè)和環(huán)境監(jiān)控等方面有廣闊的應(yīng)用前景?；谄崦复呋暮难跣凸饫w生物傳感器可被應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)和早期疾病診斷。而生物傳感材料是影響這類光纖生物傳感器靈敏性，精確度和測(cè)試范圍的主要蚓素。在本文中我們進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)來制備固定化漆酶，使用該固定化酶可望提高基于漆酶催化的耗氧型光纖生物傳感器的性能。我們的工作主要包括以下方面：1、利用反相懸浮法來制備磁性殼聚糖微球，通過加入戊二醛來實(shí)現(xiàn)微球的交聯(lián)和硬化。并通過SEM，F(xiàn)TIR等測(cè)試技術(shù)對(duì)微球的形貌和結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察和研究。測(cè)試結(jié)果表明制備的微球具有良好的球形形貌，且表面平滑，F(xiàn)e。0a納米粒子被包裹
2、在微球內(nèi)形成核殼結(jié)構(gòu)。微球的平均粒徑為0．9um，尺寸分布范圍窄。2、漆酶通過吸附和與戊二醛的交聯(lián)被固定在磁性殼聚糖微球上。通過研究彳i同條件對(duì)漆酶固定化的影響，得出最佳的固定化條件為：50mg8％戊二醛交聯(lián)的磁性殼聚糖微球，加入lOmL0．8mg／mL漆酶磷酸鹽緩沖液(0．1mol／LpH=7．0)，在4℃固定2h。在此固定化條件下，酶的固定化效率為24％。3、研究固定化漆酶的性質(zhì)。固定化酶的最適溫度分別為10℃和55℃，最適pH為3．02。與游離酶相比，固定化漆酶與ABTS的親和力降低，其Km值從36．8umoJ／I．增至171．1Hmol／L。但固定化酶的穩(wěn)定性明顯改善，在60
3、℃條件下保溫210min，固定化酶保留酶活74％，而在相同條件下游離酶酶活僅保留19．4％。固定化酶連續(xù)進(jìn)行10次操作后，酶活仍保持80％以上，漆酶使用效率明顯提高，且該固定漆酶具有良好的存儲(chǔ)穩(wěn)定性。固定化也提高了漆酶在酸性條件下的穩(wěn)定性。關(guān)鍵詞：光纖生物傳感器，漆酶，殼聚糖，固定化，穩(wěn)定性AbstractFiberopticbiosensingtechnologyhasawideapplicationprospectinmedicalscience，biologicalengineering，foodindustriesandenvironmentmonitoring．Thefib
4、eropticbiosensorbasedonoxygenconsumptioninrelationtoanalyteoxidationoflaccaseCallbeappliedonclinicalmedicineexaminationanddiseasediagnosis．Thebiosensingmaterialisthemainfactortoinfiuencethedelicacy,precisionandtestingscopeofthefiberopticbiosensor．InthisPaoer-wehavedoneagreatdealofexperimentsont
5、hepreparationofimmobilizedlaccasewhichcanbeexpectedtoimprovetlleperformanceofthefiberopticbiosensorbasedonoxygenconsumptioninrelationtoanalyteoxidationof1accase．0urmainworksare：1、Magneticchitosanmicrosphereswerepreparedwithreversed-phasesuspensionmethodology．Cross-linkingandhardeningofthespheri
6、calparticleswereachievedbytheadditionofglutaraldehyde．Thetestingtechnologies，suchasSEM、FTIR，wereusedtoinvestigatethemorphologyandstructureofthemicrospheres．Theresultsindicatedt11atthemicrosphereshadwellshapedsphericflformwithsmoothsurfaceandMagneticFe30dnanoparticleswerepackedinthemicrospherest
7、oforillcore—shellstructure．Itsmeanparticlesizewas0．9IlmwithanalTowsizedistribution．2、Laccasewasimmobilizedonmagneticchitosanmicrospheresbyadsorptionandcross—linkingwithglutaraldehvde．Theeffectsoftheimmobilizationconditionsonlaccas
