nogo-a在晶狀體損傷促進(jìn)視神經(jīng)損傷后再生中的作用的相關(guān)研究

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterPrevalencestudyontheeffectofNogo-AonlensinjurypromotingregenerationafteropticnerveinjuryinratsByXiaoweiMuSul:Prof.YongLiiSupervisor:ProYongLOphthalmology.Ik一一TheFirstAffiliatedHospitalofZhenzhouUniversityMay2012’}原創(chuàng)性聲明本人鄭

2、重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包括任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的科研成果。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。?文作弼日期砂/妊j月歲。日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品,知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索

3、,可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí),第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。?動(dòng)岍:礎(chǔ)蚋如111ll?刪31摘要Nogo—A在晶狀體損傷促進(jìn)視神經(jīng)損傷后再生中的作用的相關(guān)研究研究生穆曉偉導(dǎo)師呂勇鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院眼科河南鄭州450052摘要視神經(jīng)的損傷(opticnerveinjury)在眼科的臨床工作中很常見(jiàn)。視神經(jīng)損傷后往往預(yù)后很差,據(jù)統(tǒng)計(jì)致盲率可達(dá)40%'--'50%。視神經(jīng)損傷后的再生很難,因此,探討視神經(jīng)損傷后再生困難的機(jī)制以

4、及尋找有效方法促進(jìn)視神經(jīng)再生是廣大學(xué)者研究的焦點(diǎn)。傳統(tǒng)觀點(diǎn)提出,成年哺乳動(dòng)物的中樞神經(jīng)損傷后沒(méi)有再生能力而只有再生反應(yīng)【lJ,Aguage在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),將坐骨神經(jīng)移植到視網(wǎng)膜,可明顯提高神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(Retinaganglioncells,RGCs)的存活率,從而促進(jìn)損傷后的視神經(jīng)修復(fù)再生,這一實(shí)驗(yàn)證明視神經(jīng)損傷后可再生。近年來(lái)的大量實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),損傷視神經(jīng)的同時(shí)損傷晶狀體,并成功觀察到損傷后的晶狀體形成外傷性白內(nèi)障,可成功提高視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的存活機(jī)率,從而促進(jìn)視神經(jīng)的修復(fù)再生。Fischerl2]與Leon兩個(gè)小組的研究工作表明其可能的機(jī)制與神經(jīng)營(yíng)

5、養(yǎng)因子(NGF、BDNF、哪等)、局部炎癥、晶狀體蛋白等有關(guān)。近年來(lái),隨著髓鞘相關(guān)抑制分子Nogo.At31、MAGt4]-ts]、OMGP[61等相繼被證實(shí),晶狀體損傷對(duì)視神經(jīng)損傷后再生的促進(jìn)作用的機(jī)制是否與這些神經(jīng)生長(zhǎng)抑制因子有關(guān)報(bào)道很少,本實(shí)驗(yàn)擬對(duì)此相關(guān)機(jī)制進(jìn)行探討。目的觀察單純視神經(jīng)損傷及視神經(jīng)損傷聯(lián)合晶狀體損傷后視神經(jīng)中Nogo.AI摘要mRNA及Nogo.A的表達(dá),探討晶狀體損傷促進(jìn)視神經(jīng)損傷后再生的機(jī)制方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選取Wistar大鼠,共66只。隨即分為三組:A組:正常對(duì)照組(6只);B組:?jiǎn)渭円暽窠?jīng)損傷組(30只);C組:視神經(jīng)損傷聯(lián)

6、合晶狀體損傷組(30只)。分別于7d、14d、21d處死大鼠2只(A組)、10只(B組)、10只(C組),光鏡下觀察視神經(jīng)的病理變化,免疫組化染色檢測(cè)Nogo.a(chǎn)表達(dá)情況,采用逆轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR),半定量分析不同組視神經(jīng)Nogo—AmRNA的表達(dá)詁甲皇日木1.視神經(jīng)的少突膠質(zhì)細(xì)胞中Nogo.a(chǎn)的表達(dá)損傷后7天,正常視神經(jīng)對(duì)照組中,Nogo.A染色陽(yáng)性的少突膠質(zhì)細(xì)胞單行排列,排列規(guī)則,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為:117.40士2.84,呈淡藍(lán)色。術(shù)后第7天,單純損傷組神經(jīng)纖維排列不規(guī)則,少突膠質(zhì)細(xì)胞排列紊亂,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為:136.80士3.94,呈深

7、藍(lán)色。視神經(jīng)聯(lián)合晶狀體損傷組神經(jīng)纖維排列不規(guī)則,少突膠質(zhì)細(xì)胞排列錯(cuò)亂,陽(yáng)性細(xì)胞數(shù):130.40a:2.48,呈深藍(lán)色。3組中N090-A表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)進(jìn)行兩兩比較,除視神經(jīng)損傷聯(lián)合晶狀體損傷組與單純損傷組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p:O.277)外,其余每?jī)山M之間的比較都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。損傷后14天,陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)在正常視神經(jīng)組為:119.80a:4.45,單純視神經(jīng)損傷組為:128.40a:3.82,視神經(jīng)損傷聯(lián)合晶狀體損傷組為:122.6a:3.23。單純損傷組與正常喂養(yǎng)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)、聯(lián)合損傷組與正常喂養(yǎng)組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

8、=o.632),單純損傷組與聯(lián)合損傷組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P-o.121)。損傷后21天,正常組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)

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