硫鏈絲菌肽對人喉癌hep-2細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移能力的影響及foxm1在其中的作用

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1、重慶醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文硫鏈絲菌肽對人喉癌Hep--2細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移能力的影響及FoxM1在其中的作用姓名:林力申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師:陳鴻雁201205硫鏈絲菌肽對人喉癌Hep一2細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移能力的影響及FoxMl在其中的作用摘要目的(1)硫鏈絲菌肽(thiostr印ton)對人喉癌Hep.2細(xì)胞株增殖、侵襲以及轉(zhuǎn)移能力的影響;(2)FoxMl在硫鏈絲菌肽(thiostrepton)抑制Hep.2增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移中的作用。方法(1)采用MTT法檢測硫鏈絲菌肽

2、作用于Hep一2細(xì)胞的增殖抑制率;用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測不同濃度硫鏈絲菌肽對Hep.2細(xì)胞周期動力學(xué)的影響;使用TraJlswell小室檢測不同濃度硫鏈絲菌肽對Hep一2細(xì)胞體外侵襲及遷移能力的影響。(2)RT-PCR法檢測Hep一2細(xì)胞中FoxMl的亞型;分別使用免疫細(xì)胞化學(xué)法、I弭PCR法以及、Ⅳestemblot法檢測Hep.2細(xì)胞中FoxMl的蛋白表達(dá)以及不同濃度硫鏈絲菌肽作用Hep.2細(xì)胞48h后Foxml的mRNA及蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果(1)不同濃度(1uM、2uM、4uM、8u

3、M、12uM、16uM)硫鏈絲菌肽作用于喉癌Hep.2細(xì)胞株48小時后的增殖抑制率分別為5.27%、9.43%、20.25%、41.61%、67.96%、96.95%。濃度為2uM、3uM的硫鏈絲菌肽作用于H印一2細(xì)胞48h后,F(xiàn)CM法測得Hep一2細(xì)胞停滯于Gl/GO期(伙O.05),且呈劑量依賴性(尸

4、經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)法、RT-PCR和Westemblot均檢測到FoxMl的————————J塑型堂堂墮燮mRNA及蛋白的表達(dá)明顯降低(尸<0.05)。結(jié)論硫鏈絲菌肽能明確有效的抑制喉癌Hep.2細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移能力,其機(jī)制或許是與降低腫瘤細(xì)胞中F。xMl的表達(dá)有關(guān)。關(guān)鍵詞硫鏈絲菌肽,H印.2,F(xiàn)oxMl,細(xì)胞增殖,侵襲,轉(zhuǎn)移EFFECToF聊oSTR置PToN0INPROL胍RA.HoN,嗍s10NANDMETAsTAsIsANDTHEoFFOIxMl礬咖P-2CELLL礬EABSTRACT

5、Objec吐ve(1)Toexploremee腩ctofthi。str印t。nonproliferati。n,inVasi。na11dmetastasisinHep.2cellline;(2)T。eXplorethee髓ctofFoxmlinitsway..(1)MTTreductionassaywasusedtoinvestigatetheproliferationinllibitionoftmostr印tononH?。?cellline.ThechangeofcellcycleaRerusi

6、Ilgmiostr印tonwereanalyzedbynowc”ome仃y;Mi野ationaIldinVasiondete刪nationswereusedtoex鋤inemee虢ctofthlostreptononmeinVasionandmetastasisofHep.2cellline.(2)IUPCRwasusedtolnvestigatemesub邯eofFo)(1111.IIllmunocytochemistry,RT-PCRandWestemblotwasusedtoinvesti

7、gatetheFoxm1expressioninHep一2celllineby觚ostrepton.脅ultsTheproliferationinhibitionrateofthiostreptonontheH印一2celllineaRer48hineachconcentrationgroup(1“M、2肚M、4州、8州、12ILM、16}LM)are(5.27%、9.43%、20.25%、41.61%、67.96%、96.95%1:Hep。2celllinewerekeptatstageG1/

8、GOdosedependen廿yin2uMand3“M鏟oup(P

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