沉默med19對人乳腺癌mcf-7細胞侵襲及遷移能力的影響

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1、蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名：至P知掙一日期：!!蘭：竺：!!蘇州大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解蘇州大學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。蘇州大學(xué)有權(quán)向國家圖書館、中國社科院文獻信息情報

2、中心、中國科學(xué)技術(shù)信息研究所(含萬方數(shù)據(jù)電子出版社)、中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文，可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索。涉密論文口本學(xué)位論文屬在——年一月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文口論文作者簽名：導(dǎo)師簽名：至墮絲El叁鴛日期：翌壘：!壘!?期：沉默Medl9對人乳腺癌MCF-7細胞侵襲及遷移能力的影響中文摘要沉默Medl9對人乳腺癌MCF-7細胞侵襲及遷移能力的影響中文摘要目的研究沉默Medl9對人乳腺癌MCF一7細胞侵襲及遷移能力的影響，探討Medl9在乳腺癌

3、侵襲和轉(zhuǎn)移方面的作用及作用機制。研究方法針對Medl9基因靶序列構(gòu)建慢病毒表達載體，將慢病毒表達載體轉(zhuǎn)染人乳腺癌MCF-7細胞株，RT-PCR和Westernblot檢測Medl9基因的轉(zhuǎn)錄及蛋白表達水平；transwell實驗和劃痕實驗檢測細胞侵襲及遷移能力；RT—PCR檢測基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP一9)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)基因轉(zhuǎn)錄水平的改變。結(jié)果將構(gòu)建的siRNA-Medl9慢病毒表達載體成功轉(zhuǎn)染入人乳腺癌MCF-7細胞：轉(zhuǎn)染siRNA—Medl9慢病毒表達載體組(KD組)、空載體組(NC組)及空白組(CON組)MCF-7細胞Medl9mRNA表達量分別是0．076±0．033

4、、0．274±0．010、0．272±0．057，與NC組及CON組MCF一7細胞相比，KD組Medl9mRNA表達水平下降了72．3％、72．1％，KD組Medl9mRNA表達水平顯著性降低(／KO．05)；KD組、NC組、CON組蛋白表達量分別為0．106±0．037、0．725±0．134、0．721±0．135，與NC組及CON組MCF一7細胞相比，KD組Medl9蛋白表達水平下降了85．4％、85．3％，KD組Medl9蛋白表達水平顯著性降低(尺0．05)；KD組、NC組、CON組MCF一7細胞穿過聚碳酸酯膜的細胞數(shù)分別為23．8±4．32、43．4±3．65、45．8±5．81

5、，KD組細胞的侵襲能力顯著性降低(P(O．05)；KD組、NC組、CON組MCF-7細胞在6h、12h、24h分別比較遷移的距離，KD組細胞隨著時間的延長，遷移能力顯著性下降(P

6、，KD組較NC組及CON組相I：匕VEGFmRNA表達量下降了36．77％、37．64％，KD組VEGFmRNA表達水平顯著性降低(PO．05)；細胞侵襲和遷移能力無顯著性差異(P>0．05)；l,64P一9和VEGF基因mRNA表達無顯著性差異(P>O．05)。結(jié)論1、構(gòu)建的siRNA—Medl9慢病毒表達載體轉(zhuǎn)染入人乳腺癌MCF一7細胞后能顯著降低細胞中Medl9的轉(zhuǎn)錄、蛋白表達水平。2、iedl9基因沉默降低細胞的侵襲及轉(zhuǎn)移能力，從而抑制

7、乳腺癌的惡性生物學(xué)行為。3、Medl9基因沉默降低刪P一9和VEGFmRNA的表達，從而抑制乳腺癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。關(guān)鍵詞Medl9基因；慢病毒：乳腺癌細胞；RNA干擾作者：王曉艷指導(dǎo)教師：李莉華ⅡInfluenceofsilencingMe璺!!竺嬰!!筍tasisandinvasionofhumanbreastcancerMCF-7c』!——壘b—str—actofsilencingMedl9onmetastasis