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《沉默中介體19對人乳腺癌MCF-7細胞侵襲及遷移的影響.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、實用醫(yī)學雜志2014年第30卷第9期1373沉默中介體19對人乳腺癌MCF一7細胞侵襲及遷移的影響王曉艷郭子健吳小紅李莉華摘要目的：研究中介體19(Medl9)對人乳腺癌MCF．7細胞侵襲及遷移的影響。方法：用慢病毒介導的Medl9小分子干擾RNA(siRNA)感染人乳腺癌細胞MCF一7(KD組)，并設置空載體轉染~-(NC組)、空白對照組(CON組)。熒光顯微鏡下觀察細胞感染效率，利用RT—PCR和Westernblot檢測Medl9蛋白表達．用劃痕實驗和transwell實驗檢測細胞遷移及侵襲能
2、力。結果：熒光顯微鏡下觀察細胞感染慢病毒效率達90％以上與NC組及CON組細胞相比，KD組Medl9mRNA表達水平下降了72_3％、72．1％，Medl9蛋白表達水平下降了85．4％、85_3％，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0．05)。分別在0、6、12、24h比較遷移的距離，KD組細胞隨著時間的延長，較CON組、NC組遷移能力顯著下降，差異有統(tǒng)計學意義(P<0．05)；KD組、NC組、CON組MCF．7細胞穿過聚碳酸酯膜的細胞數分別為23．8±4．32、43．4±3．65、45．8±5．81．KD組
3、較CON組、NC組細胞的侵襲能力顯著降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0．05)。NC組與CON組相比。細胞遷移和侵襲能力差異無統(tǒng)計學意義(P>0．05)。結論：Medl9基因沉默抑制細胞的遷移及侵襲能力，從而抑制乳腺癌的惡性生物學行為。關鍵詞Medl9；慢病毒；乳腺癌細胞；RNA干擾InfluenceofsilencingMedl9onmetastasisandinvasionofhumanbreastcancerMCF·7cellsWANGXiao·yah，GUOZi-jian，uXiao—hong
4、，LILi—hua．OncologyInstitute，AffiliatedHospitalof~angnanUniversity，Wuxi214062，ChinaCorrespondingauthor：LILi—huaE—mail：LLHWXSY@aliyun．com【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofsilencingMedl9onmetastasisandinvasionofhumanbreastcancerMCF一7cells．Meth
5、odslentivirnsexpressionvectordeliveringsmallhairpinRNA(shRNA)againstMedl9genewasconstructed，thentransfectedofhumanbreastcancerMCF一7cellline．Therewerethreeexperimentalgroups：non—infected(CON)group，Lv—NC·infected(NC)group，andLv—shMedl9一infected(KD)group．
6、Todeterminethelentiviralinfectioneficiency，expressionofGFPwasdetectedwithfluorescencemicroscopy．ThemRNAandproteinlevelsofMedl9inthreegroupsMCF一7cellsweredetectedbyreal—timePCRandWesternblotting．Scratchingandtranswelltestswereemployedtodeterminetheabili
7、tyofmetastasisandinvasionofcells．ResultsThehighestinfectioneficiencywasobtained，resultingfluorescentexpressionidentifiedinmorethan90％ofMCF一7cells120hafterinfection．TheexpressionofMedl9mRNAintheKDgroupwasdramaticallydecreasedby72_3％comparedwiththeNCgrou
8、p，andby72．1％comparedwiththeCONgroup，respectively(P<0．05)．TheMedl9proteinexpressionintheKDgroupwassignificantlylowerthanthatoftheNCgroupandtheCONgroup，withareductionof85．4％and85．3％，respectively(P
