蓖麻堿高效降解菌選育及混菌發(fā)酵條件的優(yōu)化

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1、分類號(hào)：TS201．3密級(jí)：(秘密、機(jī)密、絕密)學(xué)校代碼：10057研究生學(xué)號(hào)：09811004蓖麻堿高效降解菌選育及混茵發(fā)酵條件的優(yōu)化BreedingofHighlyEffectiveDegradingMicroorganismsforRicinineandOptimizationofFermentationConditionsbyMixedStrains專業(yè)名稱：指導(dǎo)教師姓名：研究生姓名：申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：論文提交同期：論文課題來(lái)源：學(xué)位授予單位：農(nóng)產(chǎn)品加工及貯藏工程(工)王昌祿教授孔祥波工學(xué)碩士2011年12月

2、橫向項(xiàng)目天津科技大學(xué)天津科技大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包括任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果內(nèi)容，也不包括為獲得天津科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。對(duì)本文研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名：孫樣塘日期：如f1年弓月w日知識(shí)產(chǎn)權(quán)和專利權(quán)保護(hù)聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師具體指導(dǎo)下并得到相關(guān)研究經(jīng)費(fèi)支持

3、下完成的，其數(shù)據(jù)和研究成果歸屬于導(dǎo)師和作者本人，知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬天津科技大學(xué)；所涉及的創(chuàng)造性發(fā)明的專利權(quán)及使用權(quán)完全歸天津科技大學(xué)所有。本人保證畢業(yè)后，以本論文數(shù)據(jù)和資料發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名第一單位仍然為天津科技大學(xué)。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。．I·．作者簽名：豕?！鄹?日期：山I>年鄉(xiāng)月如日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子舨，同意公布論文的全部或部分內(nèi)容，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)

4、天津科技大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密II(請(qǐng)?jiān)诜娇騼?nèi)打“√”)，在年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于作者簽名：導(dǎo)師簽名：(請(qǐng)?jiān)诜娇騼?nèi)打“巾)。日期：JDf上年害月山日日期：切礦年≥月刎摘要蓖麻產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展為我們帶來(lái)了一種新型的優(yōu)質(zhì)蛋白飼料資源——蓖麻餅粕，它豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸及多種礦物質(zhì)元素是飼料開(kāi)發(fā)的一大亮點(diǎn)，但其中含有的蓖麻堿及變應(yīng)原毒素限制了它的應(yīng)用，尤其是蓖麻堿，屬于劇毒生物堿，降解處理較為困難。本文從變質(zhì)的

5、蓖麻餅粕中分離篩選出一株可高效降解蓖麻堿的細(xì)菌，并從實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有菌株中篩選出一株脫毒效果良好的酵母菌，采用混合發(fā)酵方式處理蓖麻餅粕，降解其中的蓖麻堿毒素，經(jīng)單因素試驗(yàn)和響應(yīng)面分析優(yōu)化發(fā)酵條件，構(gòu)建了相應(yīng)的二次多項(xiàng)式回歸模型，獲得最佳工藝參數(shù)；比較了發(fā)酵前后餅粕的營(yíng)養(yǎng)成分變化，對(duì)供試菌株腈水解酶的活性進(jìn)行了初步研究，主要結(jié)果如下。從腐敗變質(zhì)的蓖麻餅粕中篩選出一株高效降解蓖麻堿的細(xì)菌BPW，蓖麻堿降解率可達(dá)67．04％，經(jīng)形態(tài)觀察及生理生化鑒定，初步判斷為節(jié)桿菌屬；從實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有降解菌中篩選出一株假絲酵母SJM，其蓖麻堿

6、降解率為66．30％。對(duì)兩株菌混合發(fā)酵處理蓖麻餅粕脫除蓖麻堿毒素進(jìn)行研究，確定了最佳發(fā)酵條件。采用單因素試驗(yàn)及響應(yīng)面分析法優(yōu)化發(fā)酵條件，以蓖麻堿降解率為響應(yīng)值得到發(fā)酵回歸模型，最佳工藝參數(shù)為：底物料液比2：5，溫度31℃，SJM與BPW菌接種比為1：l(v／v)，總接種量14．35％(v／w)，培養(yǎng)時(shí)間131h，在此條件下，蓖麻堿降解率可達(dá)94．19％，變應(yīng)原降解率91．04％，發(fā)酵后餅粕蛋白質(zhì)總量無(wú)明顯變化。菌株腈水解酶活性分析表明，實(shí)驗(yàn)條件下使用供試菌液3mL，pH=7(BPW菌)或pH=8(SJM菌)，反應(yīng)

7、20min為蓖麻堿降解活性最佳測(cè)定條件，此時(shí)細(xì)菌BPW降解率約41．59％，酵母SJM約39，88％。底物專一性試驗(yàn)推測(cè)，兩株菌都含有酰膠酶。關(guān)鍵詞：蓖麻堿；蓖麻餅粕；混菌發(fā)酵；降解ABSTRACTAnewtypeofhigh—qualityproteinfeedresource—castorbeanmealisbroughtaboutbvthedevelopmentofcastorindustry．Itsrichprotein，aminoacidsandmineralsaremajorbrightspotsin

8、fodderdevelopment．However，ricinineandallergenlimitsitsapplication．Especiallyricinine，whichisahighlytoxicalkaloid，causesmuchdifficultyindegradationtreatment．Inthisarticle，astrainofbacteria