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《琥珀酸產(chǎn)生菌的分離鑒定、誘變選育與發(fā)酵條件優(yōu)化》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、琥珀酸產(chǎn)生菌的分離鑒定、誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化摘要細(xì)菌發(fā)酵生產(chǎn)琥珀酸成本低廉、對(duì)環(huán)境污染少。由于其生產(chǎn)原料可再生，并能吸收利用溫室氣體C02，使之成為近年來國(guó)內(nèi)外生物質(zhì)能源轉(zhuǎn)化的研究熱點(diǎn)。+本研究通過采用選擇性較強(qiáng)的富集培養(yǎng)和快速準(zhǔn)確篩選程序，從牛瘤胃中分離出適于淀粉質(zhì)原料的琥珀酸產(chǎn)生菌，并進(jìn)行相關(guān)的生理生化鑒定；通過紫外照射誘變育種得到琥珀酸高產(chǎn)突變株，優(yōu)化培養(yǎng)基組成并確定最適發(fā)酵培養(yǎng)條件。主要研究結(jié)論如下：1．在富集培養(yǎng)中添加莫能菌素和富馬酸鈉，經(jīng)溴甲酚綠變色平板快速檢出500株產(chǎn)酸菌株。菌株發(fā)酵后經(jīng)TLC初篩和改進(jìn)后的HPCE方法復(fù)篩檢測(cè)，得到6株優(yōu)良產(chǎn)
2、酸菌株，其中B-15菌株產(chǎn)琥珀酸11．5g．L～，副產(chǎn)物甲酸4．659·L．1，乙酸6．25g·L～，該菌株琥珀酸產(chǎn)量最高。菌株B．15經(jīng)生理生化鑒定后，初步確定其為放線孝T菌屬(Actinobac趔凇sp．)。2．以B．15為出發(fā)菌株，通過紫外照射誘變，依次采用溴甲酚綠平板、氟乙酸平板和丙烯醇平板對(duì)菌株進(jìn)行定向選育，得到的突變株FB．4發(fā)酵產(chǎn)琥珀酸19．909‘L-】，副產(chǎn)物乙醇7．55g·L-J，甲酸2．05g'L一，乙酸4．85g·L一，其琥珀酸產(chǎn)量較原始菌株提高70％。3．對(duì)突變株FB一4進(jìn)行發(fā)酵試驗(yàn)的結(jié)果表明，最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為，葡萄糖509'L一
3、，酵母提取物109·L．1，玉米漿5g-L～，K2HP043g-L～，MgCl2·6H200．4g'L～，CaCl20．3g·L一，NaCl0．5g'L～，MgC0315g．L一，復(fù)合氮源對(duì)菌株發(fā)酵影響較大；搖瓶最適發(fā)酵培養(yǎng)條件為，溫度37"C，接種量5％，轉(zhuǎn)速100r．min～，厭氧發(fā)酵氣室控制條件為，40％C02，5％I-12。在上述條件下初始pH7．0，發(fā)酵48h，琥珀酸產(chǎn)量達(dá)24g·U1。關(guān)鍵詞：琥珀酸菌株分離鑒定誘變育種發(fā)酵Isolation，Identification，MutationBreedingandFermentationConditio
4、nOptimizationofaStrainforProducingSuccinicacidABSTRACTTherearesomeadvantagesinsuccinicacidfermentationbybacteria，suchaslowprocessingCOStandlittlepollutionforenvironment．BecauseofusingrenewableagricultureresourcesandgreenhousegasC02，theresearchforsuccinicacidfermentationhasbecometheh
5、otspotofbioconversionresearchathomeandabroadinlastyears．Inhighselectivityenrichmentculturingprocessandrapidscreeningprocedure．thesuecinicacidproducerswimstarchnessandsaccharidewereisolatedfrombovinerumen．Aftertherelatedphysiologicalandbiochemicalreactionidentification，theparentstrai
6、nwasirradiatedbyUV．Duringsomescreeningplatesthemutantslrainswereobtainedwithhi【曲yieldofsuccinieacid．Andthen,theculturemediumingredientandfermentationconditionwereoptimized．Themainresultswereasfollowing：1．Themonensinandfumaratesodiumwereaddedinenrichmentcultureforselectiveculturingmo
7、stofbacteria，whichwouldproducesuccinicacidfrombovineruminalcontents．Fivehundredstrainsproducingorganicacidwereisolatedwithyellowhoopasselectivemarkpresentedinthebromocresolgreenmedium．AftersimplefermentationsixstainswithhighyieldwereselectedbyTLCpreliminaryscreeningandtheimprovedHPC
8、Esecondaryscreening
