鹽地堿蓬sshkt1基因在擬南芥sas2-1突變體中表達(dá)的研究

鹽地堿蓬sshkt1基因在擬南芥sas2-1突變體中表達(dá)的研究

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1、山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文鹽地堿蓬SsHKT1基因在擬南芥sas2-1突變體中表達(dá)的研究姓名:趙暢申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師:邵群20070410獨(dú)創(chuàng)聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得(注:如沒有其他需要特別聲明的,本欄可空)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:冬吻學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書翩替謬舊

2、本學(xué)位論文作者完全了解堂控有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)堂控可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名:乞曲勿導(dǎo)師簽字:露F宅亨簽字臼期:岬年莎月7日簽字日期:≯叼年,月7日山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文鹽地堿蓬SsHKTl基因在擬南芥sas2-1突變體中表達(dá)的研究趙暢(山東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,濟(jì)南,250014)摘要離子的吸收與轉(zhuǎn)運(yùn)對植物營養(yǎng)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、生

3、長發(fā)育等都起到重要作用。其中10和Na+由于其重要的生理功能而受到廣泛的關(guān)注。K+是植物細(xì)胞中含量最豐富的無機(jī)離子,是一種重要的營養(yǎng)元素,而Na+是鹽脅迫條件下最主要的毒性離子,植物的耐鹽往往要求植株尤其是地上部分保持低Nr、高K+的狀態(tài)。植物陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)載體t-IKT家族,最初被認(rèn)為參與植物在外部低鉀條件下吸收鉀離子,后來發(fā)現(xiàn)其功能為K+-Na?共轉(zhuǎn)運(yùn)載體或Na+轉(zhuǎn)運(yùn)載體。近年研究表明,HKT蛋白在提高植物耐鹽性方面起到重要作用。擬南芥AtHKTl可能參與根Na+內(nèi)流,將N礦從地上部分再循環(huán)至根,控制Na+的木質(zhì)部卸載,或調(diào)節(jié)K+、Na+平衡。SsHKT

4、l基因是從鹽地堿蓬根中克隆到的陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)載體基因,SsHKTl在低鉀條件下能夠互補(bǔ)酵母吸鉀缺失突變體,表現(xiàn)為高親和鉀載體的特征,但在酵母中沒有發(fā)現(xiàn)有明顯的轉(zhuǎn)運(yùn)N礦的功能。本實驗利用植物表達(dá)載體pROKII和農(nóng)桿菌Gv3101將SsHKTl基因在擬南芥:sas2.J突變體中表達(dá),以研究該蛋白的功能。在含40mglL卡那霉素的培養(yǎng)基上篩選獲得&鼠融!,的純合轉(zhuǎn)化子,并對其進(jìn)行了分子鑒定和分析,其結(jié)果如下:1.提取轉(zhuǎn)基因株系基因組DNA,PCR結(jié)果擴(kuò)增出約1.65kb的特異性條帶,表明SsHKTl已整合J扯as2.J基因組中?!?.提取轉(zhuǎn)基因株系總RNA,RT

5、-PCR結(jié)果擴(kuò)增出約1.65kb的特異性條帶,表明插入擬南芥中的船刪已經(jīng)正常轉(zhuǎn)錄。3.測量正常MS培養(yǎng)基上和高K+濃度處理后野生型、sas2.J和轉(zhuǎn)SsHKTl基因植株地上部分和根的K+含量,結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因植株地上部分和根中的K+含量均高于sas2.J。4.測量不同濃度NaCl(O,50,75,100mmol/L)處理后野生型、sas2.J和轉(zhuǎn)山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文SsHKTl基因植株的Na+含量,轉(zhuǎn)基因植株和sas2-1地上部分和根中的Na+含量相差不大,地上部分都高于野生型,根中低于野生型。5.LiCI耐性分析表明,隨時間延長,轉(zhuǎn)基因和sas2.J

6、植株存活率都低于野生型植株。轉(zhuǎn)基因與sas2一,植株存活率差異不大。以上結(jié)果表明,SsHKTI基因在sas2-1中表達(dá),在正常和高鉀條件下都提高了轉(zhuǎn)基因植株的K+含量,進(jìn)一步確認(rèn)了SsHKTl的K+轉(zhuǎn)運(yùn)功能。轉(zhuǎn)基因植株不論在正常和鹽脅迫條件下,地上部分都過量積累N礦,尤其在鹽脅迫條件下最明顯,鹽脅迫下根中的Na+含量與sas2.j相差不大,轉(zhuǎn)基因植株沒有提高其LiCI耐性,說明SsHKTl對轉(zhuǎn)基因植株的Na+含量影響不大。沒有發(fā)現(xiàn)SsHKTl具有地上部分Na+再循環(huán)或木質(zhì)部卸載功能的證據(jù)。關(guān)鍵詞:鹽生植物,陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)載體,SsHKTl基因,擬南芥sas2

7、.』突變體分類號:Q782山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文StudyaboutSsHKTlGenebyexpressinginmutantofArabidopsisthalianasas2-1ZhaoChang(CollegeofLifeScience,ShandongNormalUniversity,Jinan,250014)AbstractUptakeandtranslocationofcationsplayessentialrolesinplantnutrition,signalu翟nsduction,growth,anddevelopmenLAmongt

8、hem,potassium∽andsodium科a1havebeenthefoc

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