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《神農(nóng)香菊diamyb基因克隆及功能分析》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)學(xué)校代碼：10225學(xué)號：S14010學(xué)位論文神農(nóng)香菊刃／蒯熘基因克隆及功能分析指導(dǎo)教師姓名：申請學(xué)位級別：論文提交日期：授予學(xué)位單位：高耀輝何淼副教授碩士2014年6月東北林業(yè)大學(xué)學(xué)科專業(yè)：園林植物與觀賞園藝論文答辯日期：2014年6月4日授予學(xué)位日期：2014年6月答辯委員會主席：論文評閱人：春夕厶符蒜大學(xué)萬方數(shù)據(jù)Univers塒Code：10225RegisterCode：S14010刪㈣刪㈣㈣㈣Y2723007DissertationfortheDe掣eeofMasterCloningandf．unctionalanalysisofD矗I膨】豳譬inT、■．■●■■
2、』■JUP以口朋以Z以PJ"口Z刀口ZCMJ矩Var．口加聊口以C“力ZCandidate：SuperVisor：AcademicDegreeAppHedfor：Sp宅ciality：DateoforalExamiⅡation：University：GaoYjaohuiAssociateProf．HeMiaoMaster0m鋤ent“PlantandHorticultureJune．2014NortheastForestryUniVersity萬方數(shù)據(jù)摘要神農(nóng)香菊∞冊砒，2旃emⅡ融c“研vaL口rom鰳fc甜m)是菊科菊屬中有一種新資源植物，其花、葉及根均具有濃郁的香氣，為菊屬植
3、物中罕見的具有濃郁香味的種。植物的香味物質(zhì)通常含有幾種化學(xué)成分，是由多種酶調(diào)節(jié)生物合成途徑所產(chǎn)生，因此香味成分的含量受相關(guān)酶基因的限制。然而，轉(zhuǎn)錄因子基因表達(dá)的改變通常會導(dǎo)致植物的劇烈變化，膨髓基因香味成分的次生代謝物有關(guān)。因此，開展神農(nóng)香菊芳香物質(zhì)相關(guān)代謝相關(guān)的基因工程研究對改良重要的觀賞植物菊花的花香性狀，培育優(yōu)良的菊花新品種具有十分重要的意義。研究的結(jié)果如下：1．本研究以引自湖北神農(nóng)架的神農(nóng)香菊幼苗葉片總I礬A為模板，通過R．T-PCR方法擴(kuò)增得到一個1300bD的MYB類轉(zhuǎn)錄因子基因，將其命名為Dj柵，利用生物信息學(xué)方法對D腳基因編碼的氨基酸序列進(jìn)行分析，結(jié)果表明該基因序列
4、全長948bp，開放閱讀框編碼315個氨基酸，分子量為34．57，等電點(diǎn)為9．04，具有兩個MYB結(jié)構(gòu)域，是一個典型的R2R3MⅦ轉(zhuǎn)錄因子。通過NCBI網(wǎng)站的BLAST發(fā)現(xiàn)該基因與菊花肘功2基因有著高度同源性(95％)，推測其功能也相似，為與激素應(yīng)答有關(guān)。2．構(gòu)建植物表達(dá)載體PCAMBIAl30l—M縐，采用農(nóng)桿菌侵染方法將神農(nóng)香菊D㈣基因的植物表達(dá)載體轉(zhuǎn)入擬南芥中，對轉(zhuǎn)基因擬南芥進(jìn)行潮霉素篩選，共篩選出D脅^徹6個轉(zhuǎn)基因株系，通過對轉(zhuǎn)基因擬南芥進(jìn)行R1乙PCR檢測，表明神農(nóng)香菊覷刪基因成功轉(zhuǎn)入擬南芥。3．在顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，MYB轉(zhuǎn)基因擬南芥的表皮毛數(shù)量與野生型擬南芥相比明顯的降
5、低。同一視野范圍內(nèi)含有Df洲阿基因的擬南芥表皮毛數(shù)量相對較少，選取了10個視野范圍進(jìn)行數(shù)量的差異統(tǒng)計(jì)分析，表明在轉(zhuǎn)基因擬南芥葉片正面分布著極少數(shù)表皮毛，而在背面卻沒有，這與野生型擬南芥有很大的不同。因此，該現(xiàn)象的產(chǎn)生可能與Di枷轉(zhuǎn)錄因子基因的過量表達(dá)抑制了植株表皮毛形成或者形態(tài)建成，進(jìn)一步說明了D枷基因與表皮毛的形成有關(guān)。關(guān)鍵詞神農(nóng)香菊；M瑚轉(zhuǎn)錄因子；基因克??；生物信息學(xué)；基因轉(zhuǎn)化萬方數(shù)據(jù)AbsnjactAbstract上)P，z西位療琺P刀塒伽妣ⅣmVar．口，om口菇c“misaherbaceousperemlialplantchamcterizedbyspecialscem，
6、wIlichistheimponantaromaresourceingenusDendrathemaandfoundinShe如on西通HuBeiproV沁e，P．R．China．nlenavormatterinplalltsusuallyconsistSofseVeralche血calco塒【ponents，whosepa也wayofthebioSyntllesisisregulatedbym鋤yenzymes，soitisrestrictedto011lyincllea∞numbersofc叩iesofkeyenzymes’genes．Whereas，alte姐：tionint
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