樺褐孔菌的活性成分研究

樺褐孔菌的活性成分研究

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1、STUDYONTHEACTIⅦ玳GI冱DIENTOFINONOTUSOBLIQUUSADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeof—MasterofMedicineByMaiQinOinSupervisor:Prof.HanGuangAssociateProf.XuMeiMay,2014’~一嘲關(guān)于學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明和學(xué)術(shù)誠(chéng)信承諾~本人向河南大學(xué)提出碩

2、士學(xué)位申請(qǐng)。本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立完成的,對(duì)所研究的課題有新的見解。據(jù)我所知,除文中特別加以說明、標(biāo)注和致謝的地方外,論文申不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包括其他人為獲得任何教育、科研機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料.與我一同5-作的同事對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。在此本人鄭重承諾:所呈交的學(xué)位論文不存在舞弊作偽行為,文責(zé)自負(fù)。學(xué)位申請(qǐng)人(學(xué)位論文作者)簽名:?jiǎn)梳焺?01{p年歹RhB關(guān)于學(xué)位論文著作權(quán)使用授權(quán)書本人經(jīng)河南大學(xué)審核批準(zhǔn)授予碩士

3、學(xué)位.作為學(xué)位論文的作者,本人完全了解并同意河南大學(xué)有關(guān)保留、使周學(xué)位論文的要求,即河南大學(xué)有權(quán)向國(guó)家圖書館、科研信息機(jī)構(gòu)、數(shù)據(jù)收集機(jī)構(gòu)和本校圖書館等提供學(xué)位論文(紙質(zhì)文本和電子文本)以供公眾檢索、查閱.本人授權(quán)河南大學(xué)出于宣揚(yáng)、展覽學(xué)校學(xué)術(shù)發(fā)展和進(jìn)行學(xué)術(shù)交流等目的,可以采取影印、縮印、掃描和拷貝等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文(紙質(zhì)文本和電子文本)。(涉及保密內(nèi)容的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位獲得者(學(xué)位論文作者)簽名:表弼釤201學(xué)位論文指導(dǎo)教師簽名:201月厶日少專月,多日摘要樺褐孔菌Inonotusobliq

4、uus(Pers.:Fr.)Pilat為多孔菌科的藥用真菌,分布于北半球450~500的地區(qū),我國(guó)以黑龍江、吉林兩省資源較為豐富。民間用于治療一些惡性腫瘤。目前樺褐孔菌的化學(xué)成分主要以三萜類成分為主,此外還有甾類、多糖類、木質(zhì)素類以及小分子芳香類化合物等。已有大量藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)證明,樺褐孔菌具有抗腫瘤、抗病毒、抗炎、降血脂、降血糖及保肝等廣泛的藥理作用。目前,有關(guān)樺褐孔菌(Inonotusobliquus)化學(xué)成分的系統(tǒng)性研究還不夠深入,且對(duì)于其中微量的化學(xué)成分的活性評(píng)價(jià)尚不全面,此外,單體化合物的藥理作用研究目前多局限于

5、體外實(shí)驗(yàn)。借于此,本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了樺褐孔菌的活性成分研究。本論文采用95%乙醇對(duì)樺褐孔菌(Inonotusobliquus)進(jìn)行回流提取,并依次用石油醚、乙酸乙酸、正丁醇萃??;將萃取物分別采用硅膠柱色譜、ODS開放柱色譜、SephadexLH.20柱色譜、半制備HPLC進(jìn)行化學(xué)成分的分離,共分離得到了14個(gè)化合物;并根據(jù)理化性質(zhì)及1H-NMR、13C-NMR、APCI.MS、DEPT、HSQC、HMBC等波譜數(shù)據(jù)鑒定了化合物的結(jié)構(gòu),分別為lanosterol(1)、inotodiol(2)、3fl-hydroxy—lano

6、sta-8,24一diene一21一al(3)、inonotsuoxideA(4)、inonotsuoxideB(5)、trametenolicacid(6)、lanosta-8,23E-diene-3p,22R,25-triol(7)、betulinicacid(S)、3,3,28一dilly&oxylup-20(29)-ene(9)、olelanolicacid(10)、4-(3,4·dihydroxyphenyl)-(E)-3-buten-2一one(11)、(22E,24S)一5a,8a—epidioxy一24

7、-methyl—cholesta-6,9(11),22-trien-3,8-01(12)、8-epidioxy-5a,8a-ergosta一6,22E-dien一3fl-01(13)、3#-hydroxylanosta-7,9(11),24-trien一21.oicacid(14)。這14個(gè)化合物中有8個(gè)為四環(huán)三萜類,3個(gè)五環(huán)三萜類,2個(gè)甾類化合物,1個(gè)酚類化合物。經(jīng)檢索,其中化合物10、12和14為首次從該藥用真菌中分離得到。體外實(shí)驗(yàn)采用MTT法對(duì)分離得到的化合物1.10、12.14對(duì)人結(jié)腸癌HT-29、人宮頸癌He

8、la兩種腫瘤細(xì)胞株的抗腫瘤活性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià),活性篩選結(jié)果表明,對(duì)人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞株,化合物5表現(xiàn)出中等的細(xì)胞毒活性,ICso值為22.27pM,化合物2、4、8、12、13表現(xiàn)出比較弱的細(xì)胞毒活性,ICso值分別為50.3l、31.99、59.72、30.76、58.23pM,而其余的化合物均未表現(xiàn)出細(xì)胞毒活性,IC50值

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