樺褐孔菌多糖的分離純化及抗氧化活性研究

樺褐孔菌多糖的分離純化及抗氧化活性研究

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1、分類(lèi)號(hào)Q936單位代碼10447密級(jí)無(wú)研究生學(xué)號(hào)1210150302碩士學(xué)位論文論文題目:樺褐孔菌多糖的分離純化及抗氧化活性研究研究生姓名朱曉麗專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)微生物學(xué)指導(dǎo)教師姓名杜秀菊副教授學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院論文提交日期2015年04月原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,論文中不含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不包含為獲得聊城大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確

2、方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。學(xué)位論文作者簽名:日期學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本學(xué)位論文作者完全了解聊城大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:聊城大學(xué)有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤(pán),允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)聊城大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其它手段保存、匯編學(xué)位論文。學(xué)位論文作者簽名:日期導(dǎo)師簽名:日期摘要樺褐孔菌(Inonotusobliquus(Fr.)Pilat)屬于真菌門(mén)、擔(dān)子菌亞門(mén)、層菌綱、非褐菌目、多孔菌科

3、、褐臥孔菌屬,在俄羅斯通常被稱(chēng)為chaga。是一種藥用真菌,滋生在北半球北緯40°~50°的地區(qū),是一種微帶苦澀的多孢子堅(jiān)硬的菌類(lèi)植物,通常生長(zhǎng)在光線昏暗且濕度較高的山林中,主要生長(zhǎng)于腐樹(shù)或其樹(shù)木根部。樺褐孔菌被人們所知并且得到各國(guó)學(xué)者的廣泛關(guān)注。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)樺褐孔菌含有大量的多糖體,這些多糖體可以抑制腫瘤癌細(xì)胞的擴(kuò)散,提高細(xì)胞的免疫力,從而起到抗癌、抗氧化以及增強(qiáng)免疫力的作用,當(dāng)今抗腫瘤藥物的研究發(fā)展,多糖已經(jīng)成為一個(gè)主要的發(fā)展方向。在提取方法和活性等方面,各國(guó)學(xué)者們已經(jīng)進(jìn)行了大量探索性的研究工作

4、,但是多集中于粗多糖層面,多糖的提取也多集中于水浸提,輔助方法中多用微波輔助。通過(guò)大量查閱相關(guān)文獻(xiàn),并結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際試驗(yàn)情況,本文的主要研究?jī)?nèi)容為:1、采用系統(tǒng)溶劑法,即分別以水、草酸銨(3%)、NaOH(5%)為提取溶劑,對(duì)樺褐孔菌多糖進(jìn)行提取,并且采用光波輔助,最優(yōu)提取工藝條件為:料液比為1:30、溫度95℃、提取時(shí)間2.5h,光波功率1200W。并且證實(shí)光波輔助對(duì)于樺褐孔菌粗多糖的提取得率有一定的提高作用。2、以多糖提取率和多糖含量為判斷指標(biāo),利用料液比、提取時(shí)間和提取溫度三種影響因素設(shè)

5、計(jì)正交試驗(yàn),以得到一組最優(yōu)提取條件來(lái)優(yōu)化傳統(tǒng)的水浸提方法:料液比1:30、提取溫度95℃、提取時(shí)間2.5h。3、通過(guò)乙醇分級(jí)獲得三種不同的多糖組分:IOP40、IOP60、IOP80,含量分別為:19.4%、41.12%、9.23%。4、使用Sevage法和大孔樹(shù)脂法去蛋白及色素來(lái)進(jìn)一步純化樺褐孔菌多糖,并通過(guò)正交試驗(yàn)對(duì)Sevage法進(jìn)行了優(yōu)化,優(yōu)化條件為:Sevage試劑添加量為多糖提取液體積的2倍,氯仿正丁醇體積比為4:1,振搖時(shí)間就為25min,脫蛋白次數(shù)3次。5、提取了三種水溶性多糖成分(

6、IOP40,IOP60和IOP80),分析了它們的理化特性,包括總糖含量、蛋白質(zhì)含量、單糖成分和百分含量。6、依據(jù)2,2-聯(lián)苯-1-苦味基(DPPH)、羥基自由基、過(guò)氧化物陰離子和過(guò)氧化氫的還原力測(cè)試和清除能力,研究了IOP40、IOP60和IOP80的體外抗氧化性能。一般來(lái)說(shuō),隨著測(cè)試范圍內(nèi)濃度的升高,三種多糖成分的抗氧化能力逐漸增大。還原力、DPPH清除能力、H2O2清除能力和羥自由基清除能力的次序都是IOP60>IOP40>IOP80。這些發(fā)現(xiàn)說(shuō)明從樺褐孔菌中提取的三種多糖成分,特別是IOP

7、60可用做功能食品和醫(yī)藥工業(yè)中的天然成分以緩解氧化壓力。關(guān)鍵詞:樺褐孔菌多糖;分離和純化;抗氧化活性ABSTRACTInonotusobliquus(IO(Fr.)Pilat)belongstotheeumycota,basidiomycotina,hymenomycetes,brownfungiorder,polyporaceae,andPoriahypobrunneaPetch,andinRussiaitisusuallycalledchaga.Asamedicalfungi,itgrowsi

8、nareaataboutnorthernlatitudeintheNorthernHemisphere.Itisakindofslightlybitterandastringentfungiwithhardpolysporaandusuallylivinginforestswithdarklightandratherhighhumidity.Itmainlygrowsatrottingtreesortherootsofthem.Inonotusobliquushasbeenwell

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