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1、廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文廣西豬源沙門氏菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性的研究姓名：黃福標(biāo)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：黃偉堅(jiān)20120628廣西豬源沙門氏菌的分離鑒定及其生物學(xué)特性的研究摘要沙門氏菌(Salmonella)是獸醫(yī)和醫(yī)學(xué)臨床上最常見的一類食源性人畜共患致病菌，對(duì)畜禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和人類的健康造成了極大的危害。在集約化養(yǎng)豬生產(chǎn)的過(guò)程中，為了防治豬病和促進(jìn)豬的生長(zhǎng)，抗菌藥物被廣泛的使用，導(dǎo)致沙門氏菌的耐藥性問(wèn)題日益突出。生豬是沙門氏菌的重要貯藏宿主，沙門氏菌可通過(guò)其進(jìn)行傳播，進(jìn)而對(duì)食品造成污染，危害公共衛(wèi)生。本研究從廣西區(qū)某屠宰廠的生豬和南寧、貴港、柳州三個(gè)地區(qū)規(guī)
2、?；i場(chǎng)的臨床健康豬共采集樣品235份，經(jīng)細(xì)菌分離純化、生化試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)、PCR鑒定和致病性試驗(yàn)等，共獲得39株沙門氏菌，檢出率為16．6％(39／235)。其中從南寧市某生豬屠宰場(chǎng)屠宰豬的腸道采集樣品131份，分離到沙門氏菌35株。在被調(diào)查的三個(gè)豬場(chǎng)中，南寧地區(qū)豬場(chǎng)采集新鮮豬糞樣品44份，分離到沙門氏菌l株，檢出率為2．3％(1／44)；貴港地區(qū)豬場(chǎng)采集新鮮豬糞樣品30份，分離到沙門氏菌1株，檢出率為3．3％(1／30)；柳州地區(qū)豬場(chǎng)采集新鮮豬糞樣品30份，分離到沙門氏菌2株，檢出率為6．6％(2／30)。39株沙門氏菌分離株分屬4個(gè)血清群：B群19株，．其中的11株為
3、德爾卑沙門氏菌；C1群1株，為里森堡沙門氏菌；C2群1株；E1群8株；剩下的8株屬于A，嚇群。39株沙門氏菌中有33株對(duì)小白鼠具有致病性，致病率高達(dá)84．62％(33／39)。致病性高的有26株，死亡率為100％(3／3)，其余依次5株，死亡率為66．67％(2／3)；2株死亡率為33．33％(1／3)。對(duì)31種抗生素的感受性試驗(yàn)中，39株沙門氏菌對(duì)青霉素G、新生霉素、苯唑西林的耐藥率最高，分別為100％、94．9％、94．9％。耐5種以上抗生素的多重耐藥菌株達(dá)至tJl00％(39／39)，最常見的多重耐藥譜為PEN．OXA．NOV-Ⅵ塒．n仰，占分離菌株的84．62％(33
4、／39)。表明廣西區(qū)不同豬群臨床健康豬不同程度攜帶有沙門氏菌，分離T菌株耐藥性嚴(yán)重，多重耐藥率極高。對(duì)39株廣西沙門氏菌分離株，運(yùn)用Touch．downPCR擴(kuò)增7種毒力基因(invA、hilA、sipA、sopA、sopB、sopD、sopE2)，I、II、ⅡI類整合子及27種耐藥基因：喹諾酮類耐藥基因(qnrA、qnrB、qnrS、aac(6’)一Ib)，超廣譜p一內(nèi)酰胺酶類耐藥基因(TEM、SHV、OXA、blaTEM、blaPSE)、氨基糖苷類耐藥基[](aadAl、aadA2、aadB、aph(3’)一IIa、aacC2、aac(3’)-IIa、strA、strB)
5、、磺胺類耐藥基因(sull、sul2、sul3)、氯霉素類耐藥基因(Catl、Cat2、CmlA、Flor)、四環(huán)素類耐藥基因(tetA、tetB、tetG)。結(jié)果表明，39株沙門氏菌7種毒力基因invA、hilA、sipA：,sopA、sopB、sopD、sopE2的檢出率分別為100％、87．18％、84．62％、5．13％、66．67％、48．72％、35．9％。I類整合子檢出率為46．15％(18／39)其中可變區(qū)檢出率為7．9％(3／39)。對(duì)沙門氏菌進(jìn)行27種耐藥基因的檢測(cè)，共檢測(cè)出21種耐藥基因。所檢測(cè)的耐藥基因tetA、sul2、qnrB較為普遍，檢出率分別為
6、69．23％、69．23％、56．41％；耐藥基因Flor、tetG、TEM、blaTEM、aadA2、strB、sull、qnrS、strA、Sul3、OXA、aph(3’)一IIa、tetB、aac(6’)一Ib、cmlA、aac(3)一IIa、aacC2、aadAl、的檢出率分別為46．15％、41．03％、38．46％、38．46％、38．46％、35．90％、35．90％、28．21％、28．21％、28．21％、25．64％、25．64％、25．64％、23．08％、20．51％、12．82％、7．69％、5．13％，未能檢NNCatl、Cat2、qnrA、SHV
7、、blaPSE、aadB基因。關(guān)鍵詞：沙門氏茵，血清群，多重耐藥，毒力基因，整合子，耐藥基因，Touch-downPCRIIISOLATEDANDSTUDIEDOFV舢RIETY0FBIOLOGICALCHARACTERISTICS0FSALMO侖丁ELLAFROMPIGSINGUANGⅪABSTRACTSalmonellaisoneofthemostcommonfood—bornezoonoticpathogensinveterinaryandmedicalclinical，resultinginag
