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1、江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文Transwell非直接接觸人培養(yǎng)條件下髓核細(xì)胞誘導(dǎo)BMSCs向髓核方向分化姓名：陳亮申請學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：黃永輝20120605江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要目的：transwellt}接觸共培養(yǎng)條件下，研究髓核細(xì)胞(NPC)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)的誘導(dǎo)作用，從而為椎間盤退變干細(xì)胞治療及組織工程治療的可行性奠定理論依據(jù)。方法：全骨髓法培養(yǎng)大鼠BMSC并鑒定，取第三代BMSCs及NPC復(fù)合藻酸鹽接種于Transwell共培養(yǎng)系統(tǒng)中，上室接種BMSCs藻酸鹽復(fù)合物，下室接種髓核細(xì)胞(
2、NPCs)藻酸鹽復(fù)合物。共培養(yǎng)7天后回收上層BMSCs。RT-PCR方法檢測II型膠原(TypeIIcollagen)、Sox一9和多功能蛋白聚糖(Versian)的mRNA表達(dá)情況。結(jié)果：共培養(yǎng)組II型膠原(TypeIIcollagen)、Sox．9和多功能蛋白聚糖(Versian)的mRNA表達(dá)情況均接近正常髓核細(xì)胞。結(jié)論：共培養(yǎng)條件下髓核細(xì)胞能誘導(dǎo)BMSCs向髓核方向分化?！娟P(guān)鍵字】sox9；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；藻酸鹽；組織工程學(xué)；髓核；椎間盤退變Transwell非直接接觸共培養(yǎng)條件下髓核細(xì)胞誘導(dǎo)BMSCs向髓核方向
3、分化ABSTRACTObjectiveDifferentiationofbonemarrowmesenchymalstemcellscombiningalginategelstentsintonucleuspulposuswithintranswellculture6-wellplate．Toprovidetheoreticalbasisforimplantedintointervertebraldisctopreventandreverseintervertebraldiscdegeneration．MethodsBMS
4、Cswereisolatedandpurifiedbyadherentculture．NPcellsandBMSCscombiningalginategelstentswereCO—culturedwithintranswellculture6-wellplatefor7days，afterthat，wequantifiedTypeIIcollagen、Sox一9andVersianinBMSCsfromtheculturesystemusingRT-PCR．ResultsThemRNAofTypeIIcollagen、S
5、ox一9andVersianshowedpositiveandpromptedthedifferentiationofBMSCstotheNPCs．ConclusionBMSCscanbedifferentiatedintoNPCswithNPontheplanealginategels．[Keywords]sox9；Bonemesenchymalstemcell；Alginate；tissueengineering；nucleuspulposus；intervertebraldiscdegeneration；江蘇大學(xué)碩士
6、學(xué)位論文英文縮略語BMSCs(bonemesenchymalstemcells)MSCs(mesenchymalstemcells)NPCs(nucleuspulposuscells)TypeIIcollagenVersianHLA(humanleucocyteantigen)EDTA(Ethylenediaminetetraaceticacid)FBS(fetalbovineserum)DMEM(dulbecco’Smodifiedeagle’Smedium)IVD(intervertebraldiscdegenerat
7、ion)RT-PCR(reversetranscription—polymerasechainreaction。R-r-PCR)V骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞間充質(zhì)干細(xì)胞髓核細(xì)胞II型膠原多功能蛋白聚糖人類白細(xì)胞抗原乙二胺四乙酸胎牛血清改良伊格爾氏培養(yǎng)基腰椎退行性變反轉(zhuǎn)錄·聚合酶鏈反應(yīng)江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文第一章前言1．1腰椎退行性變的特征腰背痛在現(xiàn)代社會(huì)正常人群中所占的比例呈升高趨勢n1，已越來越得到人們的重視。在西方社會(huì)120／'o．-．35％的人患有下腰痛，而引起腰背痛的主要原因?yàn)樽甸g盤退變(intervertebraldiscd
8、egeneration，IVD)。關(guān)于椎間盤退變的臨床治療方法包括臥床休息，牽引，椎間盤摘除，椎體融合等。但臥床休息與牽引只是暫時(shí)緩解了臨床癥狀，未延緩或逆轉(zhuǎn)椎間盤的退變，而各種手術(shù)雖去除了退變的椎間盤，但易產(chǎn)生術(shù)后腰椎不穩(wěn)，導(dǎo)致臨近椎體退變加速，遠(yuǎn)期效果不甚理想。隨著組織工程學(xué)的出現(xiàn)和發(fā)展使得椎間盤退
